一种纯化融合蛋白的方法技术

本发明专利技术提供了一种纯化融合蛋白的方法，包括以下步骤：步骤1，处理层析填料，上样；步骤2，使用平衡缓冲液淋洗；步骤3，使用洗脱缓冲液洗脱产品，并收集产品。本发明专利技术通过改进纯化条件，对添加剂种类、添加剂浓度、洗脱pH的考量和筛选，得到了合适的纯化工艺，使得融合蛋白中去除多聚体的效果较好，最终得到了纯度高、稳定性好的融合蛋白，有利于提高产品的质量控制水平、药物稳定性。药物稳定性。

【技术实现步骤摘要】
一种纯化融合蛋白的方法


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种有效提纯多功能融合蛋白，减少多聚体杂质的纯化工艺。

技术介绍

[0002]多聚体是指抗体蛋白以二聚体或多聚体形式存在的聚集体。多聚体主要在细胞培养、蛋白纯化、制剂处方和药物储存的工艺过程中由于受培养工艺、纯化条件以及制剂存储过程中某些因素的影响，从而导致蛋白质部分分解折叠或者错误折叠，暴露的相关区域相互作用引发聚集，形成多聚体。
[0003]多聚体不仅可能会使得药物活性降低甚至失去生物活性，从而影响药效，更有可能使得受体发生过敏性免疫原反应，从而影响了受体的健康。因此，多聚体是抗体蛋白类药物在制备过程中需要监控和去除的杂质，药物中的多聚体含量被认为是产品的一个重要的质量指标。
[0004]在抗体融合蛋白药物生产的过程中，虽然我们可以通过改变操作条件，来控制多聚体的产生，但是我们没有办法达到产品中完全没有多聚体的控制效果。所以有效的多聚体的去除手段对于多聚体的控制就显得至关重要。
[0005]目前抗体融合蛋白类药物去除多聚体的纯化工艺，主要包括凝胶本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种纯化融合蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，处理层析填料，上样；步骤2，使用平衡缓冲液淋洗；步骤3，使用洗脱缓冲液洗脱产品，并收集产品；所述融合蛋白包括第一重链、第二重链、第一轻链和第二轻链，所述第一重链的一部分和第一轻链的一部分、所述第二重链的一部分和第二轻链的一部分分别配对，且二者之一或全部形成PD
‑
1抗原结合位点，所述第一重链还包含细胞因子IL
‑
15片段以及免疫球蛋白Fc部分，所述第二重链还包含IL
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15受体片段以及免疫球蛋白Fc部分，所述第一重链中的细胞因子IL
‑
15片段与第二重链中的IL
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15受体片段相互结合。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述洗脱缓冲液包含NaAc
‑
HAc、Tris
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盐酸、柠檬酸缓冲液或磷酸缓冲液中的一种或几种。3.根据权利要求2所述的方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴崇兵，顾海涛，姜晓玲，
申请(专利权)人：盛禾中国生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：