非永生性多能干细胞制造技术

本文公开了由胚外干细胞如滋养层干细胞体外产生的非永生性多能干细胞、其组合物及其用途。本文还公开了用一种或多种诱导剂培养体外产生的非永生性多能干细胞以产生细胞群体的方法。本文还公开了通过利用本文公开的细胞和由其分化的细胞治疗病症或病况的方法。和由其分化的细胞治疗病症或病况的方法。和由其分化的细胞治疗病症或病况的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】非永生性多能干细胞
交叉引用
[0001]本申请要求于2020年5月5日提交的美国临时申请号63/020,247的权益，该申请通过引用整体并入本文。

技术介绍

[0002]作为克服现有胚胎干细胞和iPS细胞的某些缺点的替代方案，需要用于治疗各种疾病或病况的新的干细胞。援引并入
[0003]本文中的所有出版物、专利和专利申请都通过引用并入本文，其程度如同每个单独的出版物、专利或专利申请被具体地且单独地指出通过引用并入。在本文中的术语与并入的参考文献中的术语之间存在冲突的情况下，以本文中的术语为准。

技术实现思路

[0004]在本专利技术的
技术实现思路
中提供的专利技术实施方案仅是说明性的，并提供本文公开的选择性实施方案的概述。本专利技术的
技术实现思路
是说明性和选择性的，不限制任何权利要求的范围，不提供本文公开或预期的专利技术实施方案的整个范围，并且不应解释为限制或约束本公开或任何要求保护的专利技术实施方案的范围。
[0005]在许多方面的一些方面，本文公开了一种非永生性多能干细胞(MPSC)群体，其中MPSC群体表达HLA
‑
G和胰岛素，并且其中MPSC群体能够在从培养MPSC开始的90天内高达至少89代群体倍增。在一些情况下，MPSC群体能够在从培养MPSC开始的90天内达到约89至约100代群体倍增。在一些情况下，MPSC群体从培养MPSC开始能够在约12天内达到约25至约30代群体倍增，在约30天内达到约50至约55代群体倍增，和/或在约63天内达到约75至约80代群体倍增。在一些情况下，MPSC群能够在约22至约27小时，例如约25小时内倍增。在一些方面，本文公开了一种非永生性多能干细胞(MPSC)群体，其中MPSC群体表达HLA
‑
G和胰岛素，并且其中MPSC群体不含病原体。
[0006]在一些情况下，本文公开的MPSC不含病原体。在一些情况下，MPSC不含细菌。在一些情况下，MPSC不含病毒，例如巨细胞病毒。在一些情况下，MPSC不含选自以下的病原体：EBV(爱泼斯坦
‑
巴尔病毒)、HAdV(人腺病毒)、HCMV(人巨细胞病毒)、肝炎病毒(例如，甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒和/或丙型肝炎病毒)、人疱疹病毒(例如，HHV6(人疱疹病毒6)和/或HHV8(人疱疹病毒8))、人免疫缺陷病毒(例如，HIV1(人免疫缺陷病毒1)、HIV2(人免疫缺陷病毒2))、人乳头瘤病毒(例如，HPV16、HPV18等)、单纯疱疹病毒(例如，HSV 1(单纯疱疹病毒1)、HSV 2(单纯疱疹2)等)、人嗜T淋巴细胞病毒(例如，HTLV 1(人嗜T淋巴细胞病毒1)、HTLV 2(人嗜T淋巴细胞病毒2)等)、VZV(水痘病毒)、牛棒状杆菌、棒状杆菌属(HAC2)、汉坦病毒(例如，汉滩型、汉城型或辛诺柏型)、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)、支原体属、梅毒螺旋体及其任何组合。
[0007]在一些情况下，本文公开的MPSC或包含MPSC的群体还表达以下的一种或多种蛋白
质：β人绒毛膜促性腺激素(b
‑
HCG)、热休克蛋白90(HSP90)、尾型同源异型框2(CDX2)、成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)、pAKT、pCREB1(CAMP应答元件结合蛋白1)、人淋巴细胞抗原A(HLA
‑
A)、HLA
‑
B或HLA
‑
C。在一些情况下，MPSC群体还表达杀伤细胞免疫球蛋白样受体4(KIR2DL4)、FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)、NKp46、T细胞受体(TCR)、免疫球蛋白样转录物4(ILT
‑
4)、CD49f、CD3、CD4、CD8、CD10、CD11b、CD14、CD16、CD19、CD34、CD38、CD44、CD56、CD90/Thy
‑
1、CD105、CD141、CD146、CD166或CD107a中的一种或多种蛋白质。在一些情况下，MPSC群体还表达白介素6(IL
‑
6)、IL
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8、单核细胞趋化蛋白
‑
1(MCP
‑
1)、CLXL2、血小板衍生生长因子AA(PDGF
‑
AA)、血管内皮生长因子(VEGF)、纤溶酶原活化物抑制剂1(PAI
‑
1)或IL
‑
10中的一种或多种蛋白质。在一些情况下，至少一些MPSC不表达Ki
‑
67、热休克蛋白70(HSP70)、p53或合胞素(Syncytin)中的一种或多种蛋白质。在一些情况下，MPSC群体(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)表达CD44、CD90、CD105、CD146、CD166、HLA
‑
A、HLA
‑
B或HLA
‑
C中的一种或多种蛋白质。在一些情况下，至少一些MPSC不表达CD19、CD45或HLA
‑
DR中的一种或多种蛋白质。在一些情况下，大于96％、97％、98％或99％的MPSC不表达CD19、CD45或HLA
‑
DR中的一种或多种蛋白质。在一些情况下，MPSC群体还表达CD16或CD56中的一种或多种蛋白或其组合。在一些情况下，至少一些MPSC不表达CD3。在一些情况下，大于96％、97％、98％或99％的MPSC不表达CD3。在一些情况下，至少65％或至少70％的MPSC群体表达HLA
‑
G。在一些情况下，HLA
‑
G包含HLA
‑
G1、HLA
‑
G2、HLA
‑
G3、HLA
‑
G4、HLA
‑
G5、HLA
‑
G6或HLA
‑
G7或其任何组合。在一些情况下，HLA
‑
G包括HLA
‑
G2、HLA
‑
G4、HLAG
‑
6或HLA
‑
G7或其任何组合。在一些情况下，HLA
‑
G包括HLAG
‑
6或HLA
‑
G7或其组合。在一些情况下，少于15％(例如，少于10％)的MPSC群体表达HLA
‑
G1。
[0008]在一些情况下，至少10％的本文公开的MPSC群体是单克隆的。在一些情况下，约13％至约15％的MPSC群体是单克隆的。在一些情况下，群体中存在至少约1
×
106个MPSC。在一些情况下，如通过基于阵列的全基因组测定所测量的，MPSC具有稳定的核型。在一些情况下，如通过基于阵列的全基因组测定所测量的，MPSC没有经历来自群体倍增的染色体畸变。在一些情况下，其中如通过基于阵列的全基因组测定所测量的，MPSC没有经历来自冷冻和解冻的显著的染色体畸变。
[0009]在一些情况下，本公开提供了本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种非永生性多能干细胞(MPSC)群体，其中所述MPSC群体表达HLA
‑
G和胰岛素，并且其中所述MPSC群体能够在从培养MPSC开始的约90天内达到至少89代群体倍增。2.根据权利要求1所述的MPSC群体，其中所述MPSC群体从培养MPSC开始能够在约12天内达到约25至约30代群体倍增、在约30天内达到约50至约55代群体倍增和/或在约63天内达到约75至约80代群体倍增。3.根据权利要求1或2所述的MPSC群体，其能够在约22至约27小时内倍增。4.根据权利要求3所述的MPSC群体，其能够在约25小时内倍增。5.一种非永生性多能干细胞(MPSC)群体，其中所述MPSC群体表达HLA
‑
G和胰岛素，并且其中所述MPSC群体不含病原体。6.根据前述权利要求中任一项所述的MPSC群体，其中所述MPSC不含细菌。7.根据前述权利要求中任一项所述的MPSC群体，其中所述MPSC不含病毒。8.根据前述权利要求中任一项所述的MPSC群体，其中所述MPSC不含巨细胞病毒。9.根据前述权利要求中任一项所述的MPSC群体，其中所述MPSC不含病原体，所述病原体为EBV(爱泼斯坦
‑
巴尔病毒)、人腺病毒(HAdV)、人巨细胞病毒(HCMV)、肝炎病毒、人免疫缺陷病毒(HIV)、人乳头瘤病毒(HPV)、单纯疱疹病毒(HSV)、人嗜T淋巴细胞病毒(HTLV)、水痘病毒(VZV)、棒状杆菌、汉坦病毒、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)、支原体、密螺旋体或其任何组合。10.根据权利要求9所述的MPSC群体，其中所述MPSC不含肝炎病毒，并且其中所述肝炎病毒包括甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎或其组合。11.根据权利要求9所述的MPSC群体，其中所述MPSC不含单纯疱疹病毒(HSV)，并且其中所述单纯疱疹病毒(HSV)包含人疱疹病毒6(HHV6)、人疱疹病毒8(HHV8)或其组合。12.根据权利要求9所述的MPSC群体，其中所述MPSC不含人免疫缺陷病毒，并且其中所述人免疫缺陷病毒包含人免疫缺陷病毒1(HIV1)、人免疫缺陷病毒2(HIV2)或其组合。13.根据权利要求9所述的MPSC群体，其中所述MPSC不含人乳头瘤病毒，并且其中所述人乳头瘤病毒包含HPV16、HPV18或其组合。14.根据权利要求9所述的MPSC群体，其中所述MPSC不含单纯疱疹病毒，并且其中所述单纯疱疹病毒包含单纯疱疹病毒(HSV 1)、单纯疱疹病毒(HSV 2)或其组合。15.根据权利要求9所述的MPSC群体，其中所述MPSC不含人嗜T淋巴细胞病毒，并且其中所述人嗜T淋巴细胞病毒包含人嗜T淋巴细胞病毒(HTLV 1)、人嗜T淋巴细胞病毒(HTLV 2)或其组合。16.根据权利要求9所述的MPSC群体，其中所述MPSC不含棒状杆菌，并且其中所述棒状杆菌包含牛棒状杆菌、棒状杆菌属(HAC2)或其组合。17.根据权利要求9所述的MPSC群体，其中所述MPSC不含汉坦病毒，并且其中所述汉坦病毒包含汉滩型汉坦病毒、汉城型汉坦病毒、辛诺柏型汉坦病毒或其组合。18.根据前述权利要求中任一项所述的MPSC群体，其中所述MPSC群体还表达b
‑
HCG、HSP90、CDX2、FGFR1、pAKT、pCREB1、HLA
‑
A、HLA
‑
B、HLA
‑
C或其任何组合中的一种或多种蛋白质。19.根据前述权利要求中任一项所述的MPSC群体，其中所述MPSC群体还表达KIR2DL4、Flt3L、NKp46、TCR、ILT
‑
4、CD49f、CD3、CD4、CD8、CD10、CD11b、CD14、CD16、CD19、CD34、CD38、
CD44、CD56、CD90/Thy
‑
1、CD105、CD141、CD146、CD166、CD107a或其任何组合中的一种或多种蛋白质。20.根据前述权利要求中任一项所述的MPSC群体，其中所述MPSC群体还表达IL
‑
6、IL
‑
8、MCP
‑
1、CLXL2、PDGF
‑
AA、VEGF、PAI
‑
1、IL
‑
10或其任何组合中的一种或多种蛋白质。21.根据前述权利要求中任一项所述的MPSC群体，其中至少一些所述MPSC不表达Ki
‑
67、HSP70、p53、合胞素或其组合中的一种或多种蛋白质。22.根据前述权利要求中任一项所述的MPSC群体，其中所述MPSC群体表达CD44、CD90、CD105、CD146、CD166、HLA
‑
A、HLA
‑
B、HLA
‑
C或其组合中的一种或多种蛋白质。23.根据前述权利要求中任一项所述的MPSC群体，其中至少一些所述MPSC不表达CD19、CD45、HLA
‑
DR或其组合中的一种或多种蛋白质。24.根据前述权利要求中任一项所述的MPSC群体，其中大于96％的所述MPSC不表达CD19、CD45、HLA
‑
DR或其组合中的一种或多种蛋白质。25.根据前述权利要求中任一项所述的MPSC群体，其表达CD16、CD56或其组合。26.根据前述权利要求中任一项所述的MPSC群体，其中至少一些所述MPSC不表达CD3。27.根据前述权利要求中任一项所述的MPSC群体，其中大于96％的所述MPSC不表达CD3。28.根据前述权利要求中任一项所述的MPSC群体，其中至少65％的所述MPSC群体表达HLA
‑
G。29.根据权利要求28所述的MPSC群体，其中所述HLA
‑
G包含HLA
‑
G1、HLA
‑
G2、HLA
‑
G3、HLA
‑
G4、HLA
‑
G5、HLA
‑
G6、HLA
‑
G7或其任何组合。30.根据权利要求28或29所述的MPSC群体，其中所述HLA
‑
G包含HLA
‑
G2、HLA
‑
G4、HLAG
‑
6、HLA
‑
G7或其任何组合。31.根据权利要求28至30中任一项所述的MPSC群体，其中所述HLA
‑
G包含HLAG
‑
6、HLA
‑
G7或其组合。32.根据前述权利要求中任一项所述的MPSC群体，其中少于15％的所述MPSC群体表达HLA
‑
G1。33.根据前述权利要求中任一项所述的MPSC群体，其中至少10％的所述MPSC群体是单克隆的。34.根据权利要求25所述的MPSC群体，其中约13％至约15％的所述MPSC群体是单克隆的。35.根据前述权利要求中任一项所述的MPSC群体，其包含至少1
×
106个MPSC。36.根据前述权利要求中任一项所述的MPSC群体，其中如通过基于阵列的全基因组测定所测量的，所述MPSC具有稳定核型。37.根据前述权利要求中任一项所述的MPSC群体，其中如通过基于阵列的全基因组测定所测量的，所述MPSC不显示来自群体倍增的染色体畸变。38.根据前述权利要求中任一项所述的MPSC群体，其中如通过基于阵列的全基因组测定所测量的，所述MPSC没有表现出来自冷冻和解冻的显著的染色体畸变。39.一种生长非永生性多能干细胞(MPSC)群体的方法，所述方法包括在培养基中以约1,000至约5,000个细胞/cm2的密度接种所述MPSC的传代培养物，并培养所述细胞。
40.一种生长非永生性多能干细胞(MPSC)群体的方法，所述方法包括在培养基中以约1,000至约...

【专利技术属性】
技术研发人员：李昭男，李育达，李东颖，
申请(专利权)人：艾克塞利瑞提德生物技术公司，
类型：发明
国别省市：