利用激流式生物反应器培养动物细胞的方法技术

本发明专利技术涉及利用激流式生物反应器培养动物细胞的方法，包括以下步骤：提供激流式生物反应器；向激流式生物反应器中加入细胞基础培养基，并控制预培养条件进行预培养，得到预培养体系；将动物细胞接种于预培养体系中，并控制批培养条件进行批培养，得到目标密度范围的动物细胞；其中，在批培养过程中，通过激流式生物反应器的控制系统在线实时监测并控制温度为27.0℃

【技术实现步骤摘要】
利用激流式生物反应器培养动物细胞的方法


[0001]本专利技术涉及生物
，特别是涉及利用激流式生物反应器培养动物细胞的方法。

技术介绍

[0002]动物细胞高密度大规模的培养，有助于提高疫苗、抗体类蛋白质药物的产量，在生物制药领域发挥着重要的作用。目前，用于动物细胞培养的传统生物反应器主要为搅拌式反应器和波浪式反应器。其中，搅拌式反应器的工作原理是通过搅拌桨的转动带动液体形成涡流实现混合过程，通过底部发泡器通入气体进行鼓泡通气实现氧气和二氧化碳与培养基的气液交换。但是，在实际使用过程中，该搅拌式反应器存在搅拌桨和底部通气方式带来的高剪切力、高能量耗散、易泡沫堆积等问题，这种现象在哺乳动物细胞和昆虫细胞高密度培养时尤其显著。而波浪式反应器的工作原理是通过摇动平台摆动产生的波浪来实现袋内的混合过程。该波浪式反应器虽然可有效避免氧传质过程中出现的强剪切力，实现了对剪切敏感细胞有利的无泡气液交换过程，避免了消泡剂的使用，但其主要用于种子扩大培养阶段，且因其反应袋制造工艺的限制而难以支持大体积培养，从而不适合细胞的大规模培养。<br/>[0003]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用激流式生物反应器培养动物细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：提供激流式生物反应器；向所述激流式生物反应器中加入细胞基础培养基，并控制预培养条件进行预培养，得到预培养体系；将动物细胞接种于所述预培养体系中，并控制批培养条件进行批培养，得到目标密度范围的动物细胞；其中，在所述批培养过程中，通过所述激流式生物反应器的控制系统在线实时监测并控制温度为27.0℃
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37.2℃，pH值为6.20
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7.35，DO为40％以上，转速为35rpm
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60rpm，以及通过定期取样监测和控制葡萄糖的浓度为1.5g/L以上。2.根据权利要求1所述的利用激流式生物反应器培养动物细胞的方法，其特征在于，将动物细胞接种于所述预培养体系的步骤中，所述动物细胞接种密度为(0.5
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1.2)
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106cells/mL。3.根据权利要求1所述的利用激流式生物反应器培养动物细胞的方法，其特征在于，所述动物细胞选自悬浮细胞，所述悬浮细胞选自CHO、HEK293或者SF9。4.根据权利要求3所述的利用激流式生物反应器培养动物细胞的方法，其特征在于，当所述悬浮细胞选自CHO或者HEK293时，在所述批培养过程中，还包括通过定期取样监测和控制谷氨酰胺的浓度为2mM以上。5.根据权利要求4所述的利用激流式生物反应器培养动物细胞的方法，其特征在于，当所述悬浮细胞选自CHO时，在所述批培养过程中，控制所述温度为36.8℃
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37.2℃，控制所述pH值为6.95
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7.20，控制所述DO值为50％以上，控制所述转速为55rpm
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60rpm，控制所述葡萄糖的浓度为3g/L
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6g/L，控制所述谷氨酰胺的浓度为2mM
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【专利技术属性】
技术研发人员：左冲，支伟特，任莉琼，傅锦林，徐江运，徐龙渤，徐茏林，
申请(专利权)人：浙江金仪盛世生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：