细胞培养基测试方法及其在生物制药中的应用技术

本发明专利技术提供了细胞培养基测试方法及其在生物制药中的应用。本发明专利技术建立了一种用于生物制药领域的培养基测试方法，所述方法可以全面而有效地检测不同来源的培养基(如商业化细胞培养基或实验室预制的培养基等)，对其进行质量分析/稳定性分析，有效保证大规模生产工艺表现及产品质量的一致性不受培养基批次间差异的影响，增加生物制药生产的稳定性。增加生物制药生产的稳定性。

【技术实现步骤摘要】
细胞培养基测试方法及其在生物制药中的应用


[0001]本专利技术属于检测技术和生物制药领域，具体涉及一种细胞培养基测试方法及其在生物制药中的应用。

技术介绍

[0002]细胞作为产品表达的载体被越来越多的用于现代生物医药生产中，其中哺乳动物细胞是工业生物医药生产的主要宿主，哺乳动物细胞能够产生多样化、正确折叠和糖基化的蛋白质，复杂的蛋白质需要经过正确的翻译后修饰，才会具有药物功能和非免疫原性。细胞的生长和生产离不开细胞培养基，所以细胞培养基的质量把控对于生物制药生产相当重要。
[0003]现代生物制药生产中一般使用无动物源性的和化学限定的培养基培养细胞。细胞培养基的成分非常复杂，含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素、缓冲体系、脂类、保护剂等。尽管商品化的培养基的组分一般会根据标准进行配比，但不同批次间的差异仍会导致细胞生长发生异常，甚至进一步影响到生物制品的质量。
[0004]细胞悬浮培养相较于传统的贴壁培养，可以获得更高的细胞密度(可提高一个数量级)，贴壁培养的细胞密度在105cell/mL(细胞每毫升)级本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种分析培养基质量的方法，包括：(1)分析待测培养基的理化性质，分析其理化性质三指标：pH值、浊度和渗透压；确定符合理化性质三指标的培养基、及不符合理化性质三指标的培养基；(2)对于(1)中获得的符合理化性质三指标的培养基，进行生化四指标和金属元素六指标的分析；所述生化四指标为：谷氨酰胺、葡萄糖、钾离子和钠离子；所述金属元素六指标为：钙离子、铜离子、铁离子、镁离子、锰离子和锌离子；确定符合生化四指标、金属元素六指标的培养基，其为合格培养基；确定不符合生化四指标、金属元素六指标的培养基，其为不合格培养基；其中，所述的合格培养基为功能稳定、适于细胞促生长的培养基。2.一种定向选择功能稳定、适于细胞促生长的培养基的方法，包括：(1
’
)分析待测培养基的理化性质，分析其理化性质三指标：pH值、浊度和渗透压；选择符合理化性质三指标的培养基；(2
’
)对于(1
’
)中获得的符合理化性质三指标的培养基，进行生化四指标和金属元素六指标的分析；所述生化四指标为：谷氨酰胺、葡萄糖、钾离子和钠离子；所述金属元素六指标为：钙离子、铜离子、铁离子、镁离子、锰离子和锌离子；确定符合生化四指标、金属元素六指标的培养基，其为能稳定、适于细胞促生长的培养基。3.如权利要求1
‑
2任一所述的方法，其特征在于，培养基中，所述理化性质三指标符合如下范围：pH：6.90
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7.55；浊度：＜4.00NTU；渗透压：300
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340mOsm/kg。4.如权利要求1
‑
2任一所述的方法，其特征在于，培养基中，所述生化四指标符合如下范围：和/或，所述金属元素六指标符合如下范围：
5.如权利要求1
‑
2任一所述的方法，其特征在于，使用摇瓶培养和多级种子培养基传代模式进行所述分析或所述定向选择时；较佳地，所述多级种子培养及传代包括：复苏阶段及1
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5次的传代；较佳地，所述多级为五级，包括复苏阶段及1
‑
4次的传代；较佳地，所述摇瓶培养包括悬浮震荡形式的摇瓶培养。6.一种培养细胞或利用所述细胞进行蛋白生产的方法，包括：(a)以权利要求2
‑
5任一所述的方法定向选择功能稳定、适于细胞促生长的培养基；(b)利用(a)的培养基培养细胞或利用所述细胞进行蛋白生产。7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述细胞包括：引入外源基因的细胞或未引入外源基因的细胞。8.如权利要求1
‑
7任一所述的方法，其特征在于，所述的细胞包括：CHO细胞；例如，所述细胞为CHO
‑
K1细胞系...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈彬，董常宏，周潭澈，李乐，刘海宽，王影，
申请(专利权)人：无锡药明生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：