【技术实现步骤摘要】
基于野猪肾细胞的非洲猪瘟病毒抗体免疫荧光检测方法
[0001]本专利技术属于兽医生物
，涉及基于野猪肾细胞的非洲猪瘟病毒抗体免疫荧光检测方法。
技术介绍
[0002]非洲猪瘟(African swine fever，ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV)感染猪引起的一种急性、热性传染病。临床症状主要表现为高热、网状内皮系统出血。以直接、间接接触或软蜱吸血途径传播，仅感染猪科动物。强毒感染死亡率可达100％。世界动物卫生组织(WOAH)将ASF列为法定报告的动物疫病，我国动物疫病病原微生物名录将其列为一类动物疫病。根据编码p72蛋白基因B646L的3
’
端序列不同，将ASFV分为24个基因型。
[0003]2018年8月，ASF首次传入我国，在几个月内，疫情蔓延至绝大多数省(自治区、直辖市)。目前，ASFV在我国流行已经近4年，我国对ASF的防控仍无商品化疫苗可供使用，主要依靠生物安全防控策略，但是疫情的走向依然复杂且不容乐观。流行病毒学调查显示...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种野猪肾细胞，所述野猪肾细胞的微生物保藏号为CCTCC NO:C2022258。2.一种野猪肾细胞的传代方法，所述传代方法为：在培养基中培养权利要求1所述的野猪肾细胞，得到传代的野猪肾细胞。3.如权利要求2所述的传代方法，其特征在于，所述培养基为RPMI 1640培养液；优选地，所述培养的条件为35
‑
38℃，3
‑
7％二氧化碳；优选地，所述培养的时间为24
‑
120h；优选地，所述培养为单层培养；优选地，所述传代的次数为1
‑
50；优选地，所述传代的次数为10
‑
30。4.提供了一种野猪肾细胞，所述野猪肾细胞是根据权利要求2或3所述的传代方法传代得到的所述野猪肾细胞。5.一种非洲猪瘟病毒的培养方法，所述培养方法为：用权利要求1或4所述的野猪肾细胞作为培养细胞，培养所述非洲猪瘟病毒。6.如权利要求5所述的培养方法，所述培养方法包括如下步骤：S1：在培养基中培养所述培养细胞，得到增殖的培养细胞；S2：将所述非洲猪瘟病毒接种到所述增殖的培养细胞，得到非洲猪瘟病毒培养体系；S3：培养所述非洲猪瘟病毒培养体系，收获增殖的非洲猪瘟病毒；优选地，在步骤S1中，所述培养时间为72
‑
96h；优选地，在步骤S2中，所述非洲猪瘟病毒接种剂量为0.05
‑
0.5MOI，培养时间为72
‑
144h；优选地，在步骤S3中，所述培养的条件为35
‑
38℃，3
‑
7％二氧化碳。7.一种试剂盒，所述试剂盒中含有权利要求1或4所述的野猪肾细胞；优选地，所述试剂盒中还含有非洲猪瘟病毒和荧光分子标记的抗猪IgG抗体；优选地，所述非洲猪瘟病毒为基因I型非洲猪瘟病毒；优选地，所述荧光分子为FITC；优选地，所述抗猪IgG抗体是兔抗猪IgG抗体；优选地，所述抗体是单克隆抗体或多克隆抗体；优选地，述试剂盒中还含有非洲猪瘟病毒阳性血清、非洲猪瘟病毒阴性血清、细胞培养板、PBS溶液、4w/w％多聚甲醛固定液、0.25v/v％Triton
‑
X100透膜液与RPMI 1640培养液中任一种或其组合。8.权利要求1或4所述的野猪肾细胞，权利要求2或3所述的传代方法，权利要求5或6所述的培养方法，或权利要求7所述的试剂盒在如下A1到A9中任一方面中的用途：A1：研究或制备非洲猪瘟预防制剂；A2：研究或制备非洲猪瘟诊断制剂；A3：研究或制备非洲猪瘟病毒检测制剂；A4：研究非诊断目的的非洲猪瘟病毒检测方法；A5：研究非洲猪瘟病毒与抗非洲猪瘟病毒抗体相互作用机制的制剂；A6：研究或制备非洲猪瘟治疗制剂；A7：研究非洲猪瘟病毒遗传机制；
A8：研究非洲猪瘟病毒感染的病理机制；A9：研究或制备干预非洲猪瘟病毒增殖的方法或药物的制剂。9.一种抗非洲猪瘟病毒抗体检测方法，所述检测方法包括如下步骤：...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵东明，步志高，朱远茂，李芳，孙恩成，王婉，
申请(专利权)人：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。