一种提高细胞抗高pCO2环境压力的培养方法技术

本发明专利技术涉及一种提高细胞抗高pCO2环境压力的培养方法，具体包括以下步骤：a)接种细胞并在36

【技术实现步骤摘要】
一种提高细胞抗高pCO2环境压力的培养方法
(1)

[0001]本专利技术属于生物制药领域，特别是哺乳动物细胞批次补料培养
，涉及抵抗高二氧化碳分压，在低pH培养条件下降低抗体蛋白中五聚甘露糖(Man5)修饰比例的方法。
(2)
技术介绍

[0002]在生物制药领域，抗体类药物被广泛应用于疾病治疗，高聚甘露糖型是抗体N
‑
糖基化修饰中一种常见的非成熟化糖型，CHO细胞表达抗体的高聚甘露糖型主要是Man 5(五聚甘露糖型)，高比例的Man 5使抗体在人体中的清除效率增加，从而影响抗体类药物的药物代谢动力学和药效动力学参数，因此Man 5水平常是抗体类药物的一个重要质量参数，降低Man 5水平往往是新药或生物类似药开发过程中追求的目标。目前，本领域中对于pH和Man5水平的关联以及究竟如何控制并不明确。
[0003]相反，在细胞培养工艺开发或生产过程中，常常无法避免培养体系中pCO2过高的情况发生。放大生产时，因大规模生物反应器的O2传质能力增强，CO2溢出难度增大，pCO2随之升高，培养液pH降低，于是需要大量碱液Na本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用乙酰唑胺减少细胞培养生产的抗体蛋白中的五聚甘露糖的方法，该方法包括以下步骤：a)接种细胞并在36
‑
37℃，优选36.5℃下培养；b)在细胞生长到8
‑
30x106细胞/ml的细胞密度，优选15.0x106细胞/ml时，降低培养温度至30
‑
32℃，优选31℃，在降温日通过通入CO2使pH从7.00
±
0.20范围的第一pH下降至范围在6.7
‑
6.90，优选6.80的第二pH，所述第一pH大于第二pH，维持该pH直到收获细胞；c)在b)步骤中，在降低温度同时添加乙酰唑胺，其浓度为50μM
‑
150μM，优选为150μM；和d)收获细胞并收集抗体蛋白产物。2.一种抗体生产方法，该方法包括以下步骤：a)接种细胞并在36
‑
37℃，优选36.5℃下培养；b)在细胞生长到8
‑
30x106细胞/ml的细胞密度，优选15.0x106细胞/ml时，降低培养温度至30
‑
32℃，优选31℃，在降温日将pCO2从20mmHg
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60mmHg的第一pCO2提高到高于80mmHg，优选80mmHg
‑
200mmHg的第二pCO2，所述第二pCO2高于第一pCO2，维持pCO2直至收获细胞，可任选地所述pCO2的提高是通过将二氧化碳的通气比例从6％以下提高到8
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【专利技术属性】
技术研发人员：陈孝欢，李清梅，程吕，孙瑞强，
申请(专利权)人：上海药明生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：