一种DNA保存液制造技术

本发明专利技术提供一种DNA保存液，属于生物技术领域。本发明专利技术的DNA保存液中通过添加赖氨酸、三磷酸腺苷(ATP)和λ噬菌体DNA中的一种或多种作为保护剂，能够有效提升低浓度DNA在各温度条件条件下的保存时长。条件条件下的保存时长。

【技术实现步骤摘要】
一种DNA保存液


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种DNA保存液。

技术介绍

[0002]DNA为大分子双螺旋结构，高浓度的DNA十分稳定，可长期存储于低温环境中，如
‑
20℃，相较于高浓度DNA，低浓度的DNA的保存具有较大的难度，其主要原因来源于管材的吸附、核酸酶降解、二价阳离子打断等。其后果是低浓度DNA在长期保存中有效浓度下降，进而导致定量、建库等下游反应难以进行。

技术实现思路

[0003]本专利技术旨在针对现有技术的不足，提供一种DNA保存液，其能够适用于保存低浓度的DNA样本，在一定时间后能够有效扩增。
[0004]本申请的第一方面提供一种DNA保存液，所述保存液包含Tris(三羟甲基氨基甲烷)、EDTA(乙二胺四乙酸)和添加剂，所述添加剂是赖氨酸、三磷酸腺苷(ATP)、λ噬菌体DNA中的一种或多种。
[0005]在一些实施方案中，所述添加剂是赖氨酸、三磷酸腺苷(ATP)、λ噬菌体DNA中的一种或两种或三种。
[0006]在一些实施方案中，所述Tris的浓度是10
‑
100mM，优选10
‑
60mM，包括所述范围内的10mM，15mM，20mM，25mM，30mM，32mM，35mM，38mM，40mM，42mM，45mM，48mM，50mM，52mM，55mM，58mM和60mM。
[0007]在一些实施方案中，所述EDTA的浓度是1
‑
20mM，优选1
‑
10mM，包括所述范围内的1mM，2mM，3mM，4mM，5mM，6mM，7mM，8mM，9mM和10mM。
[0008]在一些实施方案中，所述赖氨酸的浓度是1
‑
20mM，优选1
‑
10mM，包括所述范围内的1mM，2mM，3mM，4mM，5mM，6mM，7mM，8mM，9mM和10mM。
[0009]在一些实施方案中，所述ATP的浓度是1
‑
100μM，优选10
‑
80μM，包括所述范围内的10μM，15μM，20μM，25μM，30μM，32μM，35μM，38μM，40μM，42μM，45μM，48μM，50μM，52μM，55μM，58μM，60μM，65μM，70μM，75μM和80μM。
[0010]在一些实施方案中，所述λ噬菌体DNA的浓度是1
‑
20μM，优选1
‑
10μM，包括所述范围内的1μM，2μM，3μM，4μM，5μM，6μM，7μM，8μM，9μM和10μM。
[0011]在一些实施方案中，所述保存液包含10
‑
100mM Tris，1
‑
20mM EDTA，1
‑
20mM赖氨酸，1
‑
100μMATP和1
‑
20μMλ噬菌体DNA；优选地，所述保存液包含10
‑
60mM Tris，1
‑
10mM EDTA，1
‑
10mM赖氨酸，10
‑
80μMATP和1
‑
10μMλ噬菌体DNA；优选地，所述保存液包含30
‑
60mM Tris，5
‑
10mM EDTA，5
‑
10mM赖氨酸，30
‑
50μMATP和5
‑
10μMλ噬菌体DNA；优选地，所述保存液包含30mM Tris，5mM EDTA，5mM赖氨酸，30μMATP和5μMλ噬菌体DNA。
[0012]在一些实施方案中，所述保存液的PH是例如7
‑
9，优选7.5
‑
8.5，更优选8。
[0013]本申请的第二方面提供一种试剂盒，所述试剂盒包含第一方面所述的DNA保存液。
[0014]在一些实施方案中，所述试剂盒还包括其他辅助试剂例如核酸提取试剂。
[0015]本申请的第三方面提供第一方面所述的DNA保存液或第二方面所述的试剂盒在保存DNA中的应用。
[0016]本申请所述的保存DNA是指稳定储存DNA，即利用qPCR检测所述DNA的靶标基因能够有效扩增。
[0017]本申请的第四方面提供一种保存DNA的方法，所述方法包括：(1)获得DNA；(2)将所述DNA置于第一方面所述的保存液中进行保存。
[0018]在一些实施方案中，所述DNA是单链DNA或双链DNA中的一种或多种。
[0019]在一些实施方案中，所述DNA来自感兴趣的物种，例如包括但不限于真核生物或原核生物，例如动物、植物或微生物，例如灵长动物、啮齿动物、种子植物、孢子植物、细菌、真菌或病毒，又例如人、小鼠、大鼠、食蟹猴、兔、犬、猫、牛、马、羊、猪、水稻、拟南芥、大肠杆菌、酵母菌和噬菌体。
[0020]在一些实施方案中，所述DNA是由人工合成所得或由提取所得，包括但不限于本领域一切已知的提取方法。
[0021]在一些实施方案中，所述保存温度可以是
‑
40℃～40℃，优选
‑
20～37℃；所述保存时间是0
‑
30周，优选0
‑
25周，优选0
‑
20周；更优选
‑
20～37℃保存0
‑
20周，最优选
‑
20～37℃保存0
‑
16周。
[0022]在一些实施方案中，所述DNA在保存液中的浓度为至少1
×
10
‑6pM，优选至少1
×
10
‑5pM，最优选至少1
×
10
‑4pM，例如至少1
×
10
‑4pM、至少1
×
10
‑3pM、至少1
×
10
‑2pM和至少1
×
10
‑1pM。
[0023]本申请的第五方面提供第一方面所述的DNA保存液的制备方法，所述方法包括：
[0024](1)无菌水溶解配方量的Tris，分别加入EDTA和赖氨酸至配方量，获得母液A；
[0025](2)向母液A中加入λ噬菌体DNA和三磷酸腺苷(ATP)至配方量，获得DNA保存液。
[0026]在一些实施方案中，所述方法还包括调节DNA保存液的PH至7
‑
9，优选7.5
‑
8.5，优选8。
[0027]有益效果
[0028]本专利技术针对低浓度DNA的保存液进行研究，在TE缓冲液(Tris和EDTA)的基础上，通过添加赖氨酸、λ噬菌体DNA和ATP作为添加剂，能够显著提高低浓度DNA在
‑
20℃
‑
37℃的储存稳定性，其中当保存液中DNA浓度为10本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种DNA保存液，所述保存液包含Tris(三羟甲基氨基甲烷)、EDTA(乙二胺四乙酸)和添加剂，所述添加剂是赖氨酸、三磷酸腺苷(ATP)、λ噬菌体DNA中的一种或多种。2.根据权利要求1所述的保存液，所述Tris的浓度是10
‑
100mM，优选10
‑
60mM；所述EDTA的浓度是1
‑
20mM，优选1
‑
10mM。3.根据权利要求1所述的保存液，所述赖氨酸的浓度是1
‑
20mM，优选1
‑
10mM。4.根据权利要求1所述的保存液，所述ATP的浓度是1
‑
100μM，优选10
‑
80μM。5.根据权利要求1所述的保存液，所述λ噬菌体DNA的浓度是1
‑
20μM，优选1
‑
10μM。6.根据权利要求1所述的保存液，所述保存液的PH是7
‑
9，优选7.5
‑
8.5，更优选8。7.一种试剂盒，所述试剂盒包含权利要求1
‑
6任一项所述的DNA保存液。8.权利要求1
‑
6任一项所述的保存液或权利要求7所...

【专利技术属性】
技术研发人员：瞿志鹏，曹林，樊安琪，杨程程，吴恒，王小婉，
申请(专利权)人：南京诺唯赞生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：