一种快速腐熟浒苔的微生物复合制剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提出了一种快速腐熟浒苔的微生物复合制剂及其制备方法和应用。本发明专利技术包括芽孢杆菌YH

【技术实现步骤摘要】
一种快速腐熟浒苔的微生物复合制剂及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及微生物制剂的
，特别是指一种快速腐熟浒苔的微生物复合制剂及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]浒苔（Enteromorpha prolifera），又称苔条、苔菜，是目前在我国黄海引起绿潮的主要原因。浒苔生长迅速，藻体呈深绿色或鲜绿色，有中空管状结构，高度分枝。营养生殖是浒苔常见的繁殖方式，在绿潮高发期每克浒苔可以产生上亿株新藻体。浒苔藻体易漂浮在海面上，削弱进入海水中的光强，破坏海水中其它生物的生长环境，对养殖业造成经济损失，治理浒苔迫在眉睫。
[0003]微生物制剂，俗称活菌，目前，市场上的微生物制剂大多是用于植物秸秆及其废弃物的降解的微生物制剂。由于浒苔与植物相比，浒苔含有更丰富的硫酸杂多糖，常见的微生物及酶制剂对浒苔的降解效果有限，而且，降解周期较长，一般在5
‑
10天，严重影响了浒苔的处理效率。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种快速腐熟浒苔的微生物复合制剂及其制备方法和应用，旨在解决现有技术中的微生物制剂对浒苔的降解效果有限而且降解周期较长严重影响了浒苔的处理效率的问题。
[0005]为了解决上述技术问题，本专利技术的技术方案是这样实现的：在一个方面，本专利技术的一种快速腐熟浒苔的微生物复合制剂，包括芽孢杆菌YH
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B7和酶制剂；所述芽孢杆菌YH
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B7分类命名为Bacillus sp. YH
‑
B7，于2022年5月26日保藏于中国武汉典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 2022728；所述酶制剂的添加量为所述芽孢杆菌YH
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B7质量的0.5
‑
3%。
[0006]本专利技术的微生物复合制剂由芽孢杆菌Bacillus sp. YH
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B7和酶制剂组成，芽孢杆菌Bacillus sp. YH
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B7的腐熟温度为37
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40℃，0.5
‑
2天内可以完成浒苔腐熟，具有发酵迅速和降解效果好的特点；酶制剂在发酵初期可以对浒苔藻体进行降解，释放少量还原糖，供菌株活化增殖使用，加快增菌腐熟的效率；这种是一种专门针对浒苔而开发的微生物复合制剂，经过该微生物复合制剂腐熟后的浒苔，藻体纤维素和囊枝悬挂的长度大大减少，藻体细胞萎缩变色并逐渐碎裂，内容物消失，处于死亡状态，降解效果好，腐熟后浒苔的叶绿素总量减少了85%以上，小于10kDa分子量的物质含量明显提高，降解周期短，单次腐熟时间为1
‑
2天，有效提高了微生物复合制剂的利用率，降低了浒苔的处理成本，还可以实现多次累计腐熟，在3
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5次连续腐熟的情况下，仍能够在1天完成新添加浒苔的腐熟，大大提高了浒苔腐熟的效果。
[0007]作为一种优选的实施方案，所述酶制剂为纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、糖化酶中的任意一种或几种。本专利技术的酶制剂种类繁琐，价廉易得，酶制剂对浒苔进行预处理，软
化浒苔纤维，缩短腐熟时间，酶制剂与芽孢杆菌Bacillus sp. YH
‑
B7科学匹配，实现了浒苔的快速高效腐熟。
[0008]在另一个方面，本专利技术的一种快速腐熟浒苔的微生物复合制剂的制备方法，包括以下步骤：1）将芽孢杆菌YH
‑
B7接种到肉汤培养基中，肉汤培养基的组成为：蛋白胨1%、牛肉膏1.5%、氯化钠1.5%，pH值7.0，于35
‑
37℃下，震荡培养，活化，增菌至5
×
106个/mL以上，作为一级种子；2）取浒苔水解液，添加玉米浆干粉，玉米浆干粉的添加量为浒苔水解液质量的0.1%，调节pH值为6.5
‑
7.0，于115℃下，灭菌20min，得发酵培养基；3）取步骤1）所得的一级种子，按照5
‑
10%的接种量转接到步骤2）所得的发酵培养基中，于35
‑
37℃下，震荡培养48
‑
60h，菌浓度达到108个/mL以上，得发酵液；4）在步骤3）所得的发酵液中添加絮凝剂，絮凝剂的添加量为发酵液重量的10
‑
100ppm，进行沉淀絮凝，去除上清，使菌重为12
‑
15%，喷雾干燥，进风温度为160
‑
180℃，出口温度80
‑
90℃，得菌剂；5）在步骤4）所得的菌剂中添加酶制剂，搅拌，混合均匀，得微生物复合制剂。
[0009]本专利技术的快速腐熟浒苔的微生物复合制剂的制备方法是先将芽孢杆菌YH
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B7进行培养，然后，将其接种至发酵培养基中，最后，絮凝，干燥，并混合酶制剂，而得到的；这种制备方法操作方便，条件温和，对设备没有特殊的要求，活菌率高，成本低，实现了浒苔的快速腐熟效果，易于实现产业化。
[0010]作为一种优选的实施方案，所述步骤1）中，芽孢杆菌YH
‑
B7是先在无菌条件下保藏甘油管中，并接种于肉汤斜面培养基上，肉汤斜面培养基的组成为：蛋白胨1%、牛肉膏1.5%、氯化钠1.5%、琼脂2%，pH值7.0，于35
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37℃下，培养2天，然后，再接种到肉汤培养基中。通常情况下，芽孢杆菌YH
‑
B7是在无菌条件下保藏于甘油管中的，本专利技术先将保藏的芽孢杆菌YH
‑
B7在肉汤斜面培养基中进行斜面活化，然后，再对其进行培养。
[0011]作为一种优选的实施方案，所述步骤2）中，浒苔水解液的制备方法为：取浒苔干粉，加入摩尔浓度为0.1
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0.3mol/L的硫酸水溶液中，浒苔干粉与硫酸的质量比为20:3
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5，于110
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120℃下，高温酸解30
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50min，纱布过滤除渣，得浒苔水解液。本专利技术浒苔水解液采用高温酸解的方法，这种方法操作简单，容易实现，所得的浒苔水解液活性成分高，杂质少。
[0012]作为一种优选的实施方案，所述步骤4）中，絮凝剂为硫酸铵、海藻酸钠、碱淀粉、明胶、单宁酸、壳聚糖中的任意一种或几种。絮凝剂的作用是为了浓缩发酵液，以提高后续喷雾干燥的效率；絮凝剂的种类有很多，而且，已经商品化，通常情况下，絮凝剂是使用复合絮凝剂。
[0013]在再一个方面，本专利技术的一种快速腐熟浒苔的微生物复合制剂的应用，所述微生物复合制剂用于快速腐熟浒苔。这种微生物复合制剂，一方面，可以用于浒苔绿潮大规模爆发时打捞浒苔的腐熟投放，缩短投放周期，有效提高投放效率；另一方面，可以用于浒苔的快速腐熟降解，增加降解产物中可溶性物质的含量；再者，还可以用于硫酸多糖和浒苔多糖的提取。
[0014]作为一种优选的实施方案，本专利技术的一种快速腐熟浒苔的微生物复合制剂的应用包括以下步骤：1）取微生物复合制剂，添加到水中，微生物复合制剂的添加量为水质量的0.1
‑
1%，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种快速腐熟浒苔的微生物复合制剂，其特征在于：所述微生物复合制剂包括芽孢杆菌YH
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B7和酶制剂；所述芽孢杆菌YH
‑
B7分类命名为Bacillus sp. YH
‑
B7，于2022年5月26日保藏于中国武汉典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 2022728；所述酶制剂的添加量为所述芽孢杆菌YH
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B7质量的0.5
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3%。2.根据权利要求1所述的快速腐熟浒苔的微生物复合制剂，其特征在于：所述酶制剂为纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、糖化酶中的任意一种或几种。3.根据权利要求1或2所述的快速腐熟浒苔的微生物复合制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1）将芽孢杆菌YH
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B7接种到肉汤培养基中，肉汤培养基的组成为：蛋白胨1%、牛肉膏1.5%、氯化钠1.5%，pH值7.0，于35
‑
37℃下，震荡培养，活化，增菌至5
×
106个/mL以上，作为一级种子；2）取浒苔水解液，添加玉米浆干粉，玉米浆干粉的添加量为浒苔水解液质量的0.1%，调节pH值为6.5
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7.0，于115℃下，灭菌20min，得发酵培养基；3）取步骤1）所得的一级种子，按照5
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10%的接种量转接到步骤2）所得的发酵培养基中，于35
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37℃下，震荡培养48
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60h，菌浓度达到108个/mL以上，得发酵液；4）在步骤3）所得的发酵液中添加絮凝剂，絮凝剂的添加量为发酵液重量的10
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100ppm，进行沉淀絮凝，去除上清，使菌重为12
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15%，喷雾干燥，进风温度为160
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180℃，出口温度80
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90℃，得菌剂；5）在步骤4）所得的菌剂中添加酶制剂，搅拌，混合均匀，得微生物复合制剂。4.根据权利要求3所述的快速腐熟浒苔的微生物复合制剂的制备方法，其特征在于：所述步骤1）中，芽孢杆菌YH
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B7是先在无菌条件下保藏甘油管中，并接种于肉汤斜面培养基上，肉汤斜面培养基的组成为：蛋白胨...

【专利技术属性】
技术研发人员：单俊伟，王海华，台文静，邓德法，
申请(专利权)人：青岛海大生物集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：