一株贪铜菌BERC-1及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株贪铜菌Cupriavidussp.BERC

【技术实现步骤摘要】
一株贪铜菌BERC
‑
1及其应用


[0001]本专利技术涉及环境微生物治理
，具体涉及一株贪铜菌BERC
‑
1及其应用。

技术介绍

[0002]重金属污染问题也日益凸显，采矿、冶炼、电镀等重工业发展导致镉、铅、汞等重金属大量进入农田土壤，镉在土壤中的活性较强，容易被作物吸收，是目前危害农田最严重的重金属，长期摄入会导致骨软化症，甚至引起肺、前列腺和睾丸等的恶性肿瘤，已经成为制约我国社会经济可持续发展的主要问题之一因此，
[0003]近年来，利用微生物修复重金属污染已成为研究热点，其研究原理是将镉吸附性微生物添加到污染土壤中，利用这些微生物对重金属的胞外络合、胞内积累、沉淀和氧化还原反应等作用，降低土壤中重金属的生物可利用率，进而降低农作物、农产品、土壤以及废水中镉的含量重金属污染，微生物治理和修复是目前环境领域研究的热点，微生物对土壤中重金属活性的影响主要体现在生物吸附、溶解与生物转化。微生物资源是微生物修复的基础，研究者都聚焦于菌株的吸附机理，而菌株资源的筛选易被忽视。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一株具有高镉耐受性，同时具有纤维素酶活性的贪铜菌，为解决重金属污染尤其是镉污染环境的修复效率低效果差等问题，可应用于环境修复及生活垃圾处理。
[0005]为了达到上述目的，本专利技术提供了一株贪铜菌BERC
‑
1，该菌株于2022年7月29日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为GDMCC NO：62670。该贪铜菌BERC
‑
1具有纤维素酶活性，其可耐受镉、砷、铅、铬、汞中的任意一种或两种以上，其中，镉耐受最高浓度为260mg/L。
[0006]本专利技术还提供了一种菌剂，该菌剂包含上述的贪铜菌BERC
‑
1，该菌剂可被用于重金属污染土壤和污染废水的处理。
[0007]本专利技术还提供了一种上述菌剂的制备方法，包含如下步骤：
[0008]步骤一：培养上述的贪铜菌BERC
‑
1至菌液浓度不低于1.2*10
10
CFU/mL；
[0009]步骤二：离心步骤一所得的菌液，得到菌沉淀；
[0010]步骤三：将步骤二中所得的菌沉淀与无菌的甘油混合制备成菌悬液；
[0011]步骤四：以麸皮加硅藻土作为烘干载体，并与步骤三中所得的菌悬液以2:3的比例混合后，于50℃烘干，制得菌剂。
[0012]优选地，上述制备方法中的菌悬液，其是以菌沉淀与无菌的浓度为6％(v/v)的保护剂甘油以质量体积比为1:6(g:mL)的比例制成。
[0013]优选地，上述制备方法中的步骤四中，麸皮和硅藻土的比例为质量比为3:2。
[0014]优选地，上述制备方法中的步骤四中，烘干温度为50℃。
[0015]优选地，上述制备方法中的步骤一中培养，其培养条件为pH＝7、温度为30℃，培养
基为如下的物质与水配制后灭菌所得；
[0016]其中，上述的物质包含15g/L的玉米淀粉、5g/L的葡萄糖、1g/L的MgSO4·
7H2O、0.5g/L的K2HPO4、0.5g/L的Ca(NO3)2和1g/L的NaCl，其中，各浓度均为终浓度。
[0017]优选地，上述步骤一中培养的培养基为将15g的玉米淀粉、5g的葡萄糖、1g的MgSO4·
7H2O、0.5g的K2HPO4、0.5g的Ca(NO3)2和1g的NaCl溶于1LH2O中灭菌制备而成。
[0018]本专利技术提供的贪铜菌BERC
‑
1可被应用于重金属污染环境的处理，该重金属包括镉、砷、铅、铬、汞中的任意一种或两种以上，尤其可用于镉污染土壤和镉污染废水的处理。
[0019]本专利技术提供的贪铜菌BERC
‑
1还可被应用于重金属污染环境中纤维素物质的处理。
[0020]本专利技术的贪铜菌BERC
‑
1及其应用，解决了镉污染环境的修复效率低效果差等问题，具有以下优点：
[0021]本专利技术提供的贪铜菌BERC
‑
1，具备镉、砷、铅、铬、汞的高耐受特性，尤其对镉离子的最高耐受浓度达到260mg/L，同时还具备纤维素降解的特性，该菌在滤纸酶活达到0.12U
·
mL
‑1、CMC酶活达到0.5U
·
mL
‑1，纤维二糖酶活达到0.01U
·
mL
‑1，既可以在生活垃圾处理及重金属污染环境修复中发挥作用，也可以在木质纤维素预处理过程中发挥作用，具有很好的应用前景。
附图说明
[0022]图1为本专利技术中贪铜菌BERC
‑
1的刚果红染色结果图。
[0023]图2为本专利技术中贪铜菌BERC
‑
1在显微镜下的细胞形态图。
[0024]图3为本专利技术中贪铜菌BERC
‑
1的镉离子耐受试验结果。
具体实施方式
[0025]下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0026]说明：实施例中所用到的方法，未见特殊说明的均为常规方法，未见特殊说明的试剂均为常规试剂。
[0027]其中，所用到的培养基包含：
[0028]基础牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏5g/L、蛋白胨10g/L、氯化钠5g/L、加蒸馏水至1000mL；调节pH值至7.0～7.2；1
×
105Pa灭菌20min所得。如配置固体培养基则在现有培养基基础上加2％的琼脂。
[0029]选择培养基：将配置好的镉母液加入基础牛肉膏蛋白胨培养基中，调节镉离子至相应浓度即为选择培养基。其中，镉母液为称取氯化镉溶于超纯水，用容量瓶定容至100mL，配置成的终浓度为100g/L。
[0030]CMC发酵产酶培养基：CMCNa 10g、蛋白胨5g，酵母粉1.0g添加琼脂18g常规制成固体培养基。
[0031]赫奇逊无机盐培养基(HM)：KH2PO41.0g、NaCl 0.1g、MgSO4·
7H2O 0.3g、NaNO32.5g、FeCl30.01g、CaCl20.1g、CMC
‑
Na 5g溶于蒸馏水中并定容于1L。
[0032]菌株培养用培养基：15g的玉米淀粉、5g的葡萄糖、1g的MgSO4·
7H2O、0.5g的K2HPO4、0.5g的Ca(NO3)2和1g的NaCl溶于1L H2O中灭菌制备而成。
[0033]实验例1：菌株的分离、鉴定及分析
[0034]1.菌株分离
[0035]本专利技术是从蚯蚓肠道中分离菌株，将本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株贪铜菌BERC
‑
1，其特征在于，该菌株于2022年7月29日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为GDMCC NO：62670。2.根据权利要求1所述的贪铜菌BERC
‑
1，其特征在于，所述贪铜菌BERC
‑
1具有纤维素酶活性。3.根据权利要求1所述的贪铜菌BERC
‑
1，其特征在于，所述贪铜菌BERC
‑
1耐受镉、砷、铅、铬、汞中的任意一种或两种以上。4.一种菌剂，其特征在于，所述菌剂包含如权利要求1所述的贪铜菌BERC
‑
1。5.一种如权利要求4所述菌剂的制备方法，其特征在于，包含如下步骤：步骤一：培养如权利要求1所述的贪铜菌BERC
‑
1至菌液浓度不低于1.2*10
10
CFU/mL；步...

【专利技术属性】
技术研发人员：王彦伟，何明雄，高立洪，刘科，韦秀丽，祝其丽，吴波，胡国全，
申请(专利权)人：重庆市农业科学院，
类型：发明
国别省市：