一株鼠李糖乳酪杆菌及其在预防或治疗龋齿和牙周病中的应用制造技术

本发明专利技术涉及益生菌筛选与应用技术领域，具体涉及一株鼠李糖乳酪杆菌及其在预防或治疗龋齿和牙周病中的应用。所述的鼠李糖乳酪杆菌的保藏编号为CCTCC NO：M2022171，对引起龋齿的变异链球菌和粘性放线菌，引起牙周疾病的半放线聚集杆菌、牙龈卟啉单胞菌和具核梭状杆菌等致病菌具有明显的抑制作用，可以作为口腔益生菌使用，有效预防和改善口腔疾病。所述鼠李糖乳酪杆菌的裂解液还能有效去除变异链球菌形成的生物膜以及抑制变异链球菌、牙龈卟啉单胞菌、具核梭状杆菌、粘性放线菌和半放线聚集杆菌的生长繁殖，可以添加到药品、保健品和牙齿护理产品中使用。齿护理产品中使用。齿护理产品中使用。

【技术实现步骤摘要】
一株鼠李糖乳酪杆菌及其在预防或治疗龋齿和牙周病中的应用


[0001]本专利技术属于益生菌筛选与应用
，具体涉及一株鼠李糖乳酪杆菌及其在预防或治疗龋齿和牙周病中的应用。

技术介绍

[0002]口腔内是一个复杂的生态系统，微生物群种类繁多，表面估计含有700多种细菌。这些口腔微生物分布在不同的口腔栖息地，例如舌头、牙齿、龈下沟、颊粘膜和扁桃体等。由于代谢活动、pH值、营养物质可用性、脱落/不脱落以及唾液和沟液等因素的影响，这些生境内特定微生物群的负荷有所不同。口腔微生物相互之间制衡，维持健康，一旦致病的微生物大量繁殖，就会导致各种口腔疾病，如龋病、牙周炎和口臭。
[0003]在口腔护理产品中，人们对益生菌的兴趣日益增加。通过摄取适当的量的益生菌，对食用者的身体健康能发挥有效作用。双歧杆菌属和乳酸菌属是最常见的益生菌，还有如芽孢杆菌、肠球菌和链球菌，以及酵母菌菌也被归类为益生菌。乳酸杆菌是天然的口腔微生物群，主要有干酪乳杆菌、拟干酪乳杆菌、植物乳杆菌、鼠李糖乳酪杆菌、发酵乳杆菌、嗜酸乳杆菌和唾液乳杆菌等。乳酸菌与变异链球菌相比，不会粘附在牙齿上和引起龋齿。乳酸菌还具有拮抗牙周病原菌的作用，如抑制放线菌聚集菌、中间普雷沃菌和牙龈卟啉单胞菌的生长。由此可见，乳酸菌在维持口腔健康中起重要作用，有助于维持口腔的微生态平衡。

技术实现思路

[0004]本专利技术为解决现有技术问题，提供了一株鼠李糖乳酪杆菌及其在预防或治疗龋齿和牙周病中的应用。该菌株是从发酵奶酪中筛选到的，能够显著抑制变异链球菌、牙龈卟啉单胞菌，半放线聚集杆菌等口腔病原菌的生长繁殖，并能在口腔内有效定植，有利于恢复菌群平衡，可广泛用于预防或治疗龋齿、牙周炎等口腔疾病。
[0005]本专利技术提供的鼠李糖乳酪杆菌，为鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14(Lacticaseibacillus rhamnosus VHProbi M14)株，于2022年3月1日保藏于中国武汉、武汉大学的中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO：M2022171。
[0006]所述的鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14株的16s rDNA序列为SEQ ID NO:1；其Riboprinter指纹图谱如图1所示，蛋白质谱如图2所示。
[0007]本专利技术的鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14株在制备具有清除DPPH自由基或清除羟基自由基功能的制品中的应用。
[0008]本专利技术的鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14株在制备具有抑制口腔致病菌功能的制品中的应用。
[0009]所述的口腔致病菌，包含变异链球菌、牙龈卟啉单胞菌、粘性放线菌、具核梭状杆菌或伴放线聚集杆菌。
[0010]本专利技术还一个方面是提供一种用于抑制口腔病原菌的制品，所述的制品中包含有
上述的鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14株的活菌；
[0011]更进一步的，所述的用于抑制口腔病原菌的制品，其中还可以包含有鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14株的裂解液。
[0012]所述制品，可以是药品或保健品。
[0013]所述的制品，可以是口腔护理产品，例如牙用凝胶、牙粉、牙膏、口香糖、牙线、牙齿清洁液、漱口剂、口喷剂或牙齿清洁泡沫。
[0014]有益效果
[0015]本专利技术所述鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14是从发酵奶酪中筛选出的一株对变异链球菌抑制作用最显著的菌株，其发酵菌液产生的抑菌圈直径达到23mm。该菌株还能有高效抑制牙龈卟啉单胞菌、粘性放线菌、具核梭状杆菌和伴放线聚集杆菌等口腔致病菌，抗菌谱较广。
[0016]鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14可在口腔中有效定植，并通过与口腔致病菌有效结合，阻止其粘附到牙齿上，显著减少口腔内致病菌的数量，进而达到减少致病菌在口腔内荷载的效果。其中，该菌株6h时的自凝集率达到43.05％，且对变异链球菌和半放线聚集杆菌的共凝集效果最好，6h时的共凝集率高达42.27％
‑
59.11％。
[0017]鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14能高效去除变异链球菌形成的生物膜，有效预防和治疗由龋齿。其中，菌悬液，即单纯的菌体对生物膜的去除率高达99.42％，而发酵液和裂解液的去除率达100％，取得了意料不到的技术效果。
[0018]鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14能够高效抑制变异链球菌的生长繁殖。对照组的变异链球菌在接种10h后开始快速增长，20h左右达到稳定期；而添加了鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14裂解液上清的实验组，变异链球菌在40h内几乎没有增长。
[0019]鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14对人正常牙龈上皮细胞没有毒性，且能够粘附在细胞上，在口腔内实现有效定植，有助于平衡口腔菌群。鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14能够显著抑制牙周致病菌(半放线聚集杆菌、牙龈卟啉单胞菌和具核梭状杆菌)在人正常牙龈上皮细胞上的粘附生长，有效预防和改善所述致病菌引起的牙周炎，牙龈出血等症状。
[0020]此外，鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14还具有较强的胃肠液耐受性和抗氧化性，对羟基自由基和DPPH自由基的清除率分别为18.1％和16.8％。
附图说明
[0021]图1为鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14的Riboprinter指纹图谱；
[0022]图2为鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14的蛋白质谱图；
[0023]图3为鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14与四株致病菌的凝集试验；其中，A为鼠李糖乳酪杆菌对照，B为鼠李糖乳酪杆菌+变异链球菌；C为鼠李糖乳酪杆菌+牙龈单胞卟啉菌；D为鼠李糖乳酪杆菌+具核梭状杆菌；E为鼠李糖乳酪杆菌+半放线聚集杆菌；
[0024]图4为鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14对变异链球菌的抑制粘附试验；其中，A为对照组，B为实验组；
[0025]图5为鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14对变异链球菌的抑制生长曲线；
[0026]图6为鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14抑制牙龈卟啉单胞菌粘附到人正常牙龈上皮细胞图片；其中，A为对照组，B为实验组；
[0027]图7为鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14抑制具核梭状杆菌粘附到人正常牙龈上皮细胞图片；其中，A为对照组，B为实验组；
[0028]图8为鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14抑制半放线聚集杆菌粘附到牙龈上皮细胞图片；其中，A为对照组，B为实验组。
具体实施方式
[0029]本专利技术提供的鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14(Lacticaseibacillus rhamnosus VHProbi M14)经多相分类学鉴定为一新型的乳杆菌，且满足食品安全的规定，可以作为一种食品原料来长期服用，而不会产生副作用。本专利技术提供的鼠李糖乳酪杆菌VHProbi M14能有效抑制常见的口腔病原菌，具有重要的应用价值。
[0030]申请人于2022年3月1日将所筛选的鼠李糖乳酪杆菌VHP本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鼠李糖乳酪杆菌，其特征在于，所述的鼠李糖乳酪杆菌的保藏编号为CCTCC NO：M2022171。2.如权利要求1所述的鼠李糖乳酪杆菌，其特征在于，所述的鼠李糖乳酪杆菌的16s rDNA序列为SEQ ID NO:1。3.如权利要求1所述的鼠李糖乳酪杆菌，其特征在于，所述的鼠李糖乳酪杆菌的Riboprinter指纹图谱如图1所示，蛋白质谱如图2所示。4.权利要求1所述的鼠李糖乳酪杆菌在制备具有清除DPPH自由基或清除羟基自由基功能的制品中的应用。5.权利要求1所述的鼠李糖乳酪杆菌在制备具有抑制口腔致病菌功能的制品中的应用。6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：张景燕，段治，吴松洁，崔洪昌，程淑敏，郭超群，
申请(专利权)人：青岛蔚蓝生物集团有限公司，
类型：发明
国别省市：