耐高温木聚糖酶突变体制造技术

本发明专利技术涉及基因工程与蛋白质改造技术领域，具体涉及一种耐高温木聚糖酶突变体及其应用。本发明专利技术以野生型木聚糖酶PT为基础，提供了包含选自I24T，G25N，V27Y，T41V，S65N/Q，N160A/M/R所述突变位点的突变体。所述木聚糖酶突变体的耐热性得到显著提高，在95℃条件下处理5min后，酶活残留率比野生型提高了13.1%‑23.2%；其中，含S65N单点突变的木聚糖酶单点突变体的耐热性最强，酶活残留率高达82.9%，取得了意料不到的技术效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程和蛋白质工程，具体涉及一种耐高温酸性木聚糖酶突变体及其应用。

技术介绍

1、木聚糖（xylan）是一种多聚五碳糖，是植物半纤维素的重要组分，它占植物碳水化合物总量的三分之一，在自然界中是继纤维素之后含量第二丰富的可再生物质资源。它存在于植物的细胞壁中以及几乎所有部位。

2、木聚糖酶是可将木聚糖降解成低聚糖或木糖的一类酶的总称。一个木聚糖分子的完全酶解需要几步酶促反应，作用于主链的有两种酶：β-1，4-木聚糖酶（l，4-β-d-xylanohydrolase: ec3.1.2.8）和β-木糖苷酶（1，4-β-d-xylanxylohydrolase:ec3.2.1.37）。一般而言，前者从主链内部作用于木糖苷键，将木聚糖分解成低聚糖，而后者则作用于低聚木糖的末端，释放出木糖。

3、许多微生物可产生木聚糖酶。木聚糖酶的生物化学性质的获得主要来自于细菌和真菌木聚糖酶的研究。细菌所产木聚糖酶可大体分为两类：高分子量的耐酸木聚糖酶，低分子量的耐碱木聚糖酶。但在真菌中却没有这种差别，不过，低分子量木聚糖酶的耐碱性却是共同的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种木聚糖酶突变体，其特征在于，所述突变体是氨基酸序列为SEQ ID NO:1的木聚糖酶包含第65位氨基酸的取代：S65Q。

2.如权利要求1所述的木聚糖酶突变体，其特征在于，所述突变体还包含下组中至少一个氨基酸的取代：I24T，G25N，V27Y，T41V，N160A/M/R。

3.如权利要求2所述的木聚糖酶突变体，其特征在于，所述突变体包含下组中至少一个氨基酸的取代组合：

4.编码权利要求1-3任一所述木聚糖酶突变体的DNA分子。

5.包含权利要求4所述DNA分子的重组表达质粒。

6.一种宿主细胞，其特征在于，所述的宿主...

【技术特征摘要】

1.一种木聚糖酶突变体，其特征在于，所述突变体是氨基酸序列为seq id no:1的木聚糖酶包含第65位氨基酸的取代：s65q。

2.如权利要求1所述的木聚糖酶突变体，其特征在于，所述突变体还包含下组中至少一个氨基酸的取代：i24t，g25n，v27y，t41v，n160a/m/r。

3.如权利要求2所述的木聚糖酶突变体，其特征在于，所述突变体包含下组中至少一个氨基酸的取代组合：

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【专利技术属性】
技术研发人员：李馨培，吴秀秀，陈刚，
申请(专利权)人：青岛蔚蓝生物集团有限公司，
类型：发明
国别省市：