一株短小芽孢杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株短小芽孢杆菌(Bacilluspumilus)DX24菌株，保藏编号为CCTCCM20221933。短小芽孢杆菌DX24具有增强动物的免疫功能，提高日增重，耐酸、耐胆盐性能好等特点。本发明专利技术的短小芽孢杆菌可作为一种新型的益生菌添加剂，广泛应用于饲料中。广泛应用于饲料中。广泛应用于饲料中。

【技术实现步骤摘要】
一株短小芽孢杆菌及其应用


[0001]本专利技术属于微生物筛选、应用
，具体涉及一株短小芽孢杆菌及其应用。

技术介绍

[0002]机体环境与外界微生物群存在密切的联系，机体可通过呼吸道、消化道、皮肤等各种途径与外界环境中微生物进行交流，但同时致病性微生物可能通过这些途径侵入机体，并且体内的微生物在特殊条件下也能产生致病作用，多数情况下机体能够利用免疫系统清除病原菌，可一旦逃避过免疫系统，进入特定的位置，会对机体造成不同形式、程度的损伤，而目前主要的治疗方法是通过抗生素、中药以及饲料微生态制剂来拮抗病原菌的侵袭。
[0003]随着人们对抗生素饲料添加剂带来负面效应的意识不断提高，饲料微生态制剂是作为一种新型的抗生素替代品的添加剂，具有改善宿主微生态平衡、抑制病原菌生长、提高家畜生长性能、改善家畜免疫功能、无毒副作用、无耐药性、无残留、效果显著等诸多优点，受到了养殖业的欢迎。微生态制剂目前存在服用后益生菌到达肠道的活菌数受胃酸、肠液及菌种本身抗逆性质的影响，不同菌种之间差别很大的问题。饲用芽孢杆菌作为微生态制剂的一种，在家畜生产中较之其他微生态制剂具有其独特的优势，也因此被广泛应用在微生态制剂市场上并不少见，但鱼龙混杂；菌种功能突出且应用效果明显的产品也较为少见。
[0004]因此，获得新型具有益生特性的芽孢杆菌的研究具有重大意义。将短小芽孢杆菌作为饲料添加剂以代替抗生素，既可减少抗生素的使用带来的不利影响，又可带来可观的经济效益，在生产实际中有非常重要的意义。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一株具有广谱抑菌能力、耐酸、耐胆盐且能够提高动物日增重、对肠上皮的黏附能力的饲用短小芽孢杆菌及其应用。
[0006]为了实现本专利技术目的，本专利技术的短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)是从牦牛粪便中分离得到，命名为DX24。经16S RNA基因序列分析，该菌株DX24为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)。该菌株已于2022年12月12日保藏在中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)，地址：中国武汉，分类命名为Bacillus pumilus SMU5927，保藏号为CCTCC M 20221933。
[0007]短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)DX24的微生物学特性为：(0.6～0.7)μm
×
(2.0～3.0)μm，革兰氏阳性菌。
[0008]本专利技术提供含有前述的短小芽孢杆菌DX24的菌剂。
[0009]本专利技术还提供一株含有所述短小芽孢杆菌DX24在制备饲料添加剂或动物饲料中的应用。
[0010]在本专利技术中，所述饲料添加剂或动物饲料可广谱抗菌。
[0011]在本专利技术中，所述饲料添加剂或动物饲料为促进动物生长、调节动物机体免疫力的产品。
[0012]在本专利技术中，所述饲料添加剂或动物饲料为提高抗氧化能力、抑制炎性因子表达
的产品。
[0013]本专利技术通过动物实例证明了上述短小芽孢杆菌DX24可有效调节动物机体免疫力、提高机体抗氧化能力，改善动物的生长性能。
[0014]在本专利技术中，所述短小芽孢杆菌DX24的抑菌谱选自革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌。
[0015]在本专利技术中，所述革兰氏阴性菌为致病性大肠杆菌、肠炎沙门菌。
[0016]沙门氏菌属(Salmonella)是一种革兰氏阴性、兼性厌氧的胞内菌，广泛分布于自然界中，其成员可感染人和多种动物，大部分具有很强的致病性。其中，肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritis，SE)可使家禽和家畜出现肠炎、生产性能降低，甚至死亡，并且被该菌污染的动物产品能够进一步导致人的急性胃炎，严重危害人类康和公共生安全。
[0017]在本专利技术中，所述饲料添加剂或动物饲料中短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)DX24的活菌数为1
×
10
9～2×
10
10
CFU/mL；进一步地，所述活菌数为1
×
10
10
CFU/mL。
[0018]本专利技术还提供一种含有前述的短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)DX24的药物。
[0019]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0020](1)本专利技术通过动物试验鉴定了短小芽孢杆菌DX24的益生效果，结果表明，短小芽孢杆菌DX24能够耐酸、酸胆盐，能抵抗胃肠道的内环境；疏水性为80.69％，自聚集性为5h时为61.37％，25h达到84.46％，证明本专利技术短小芽孢杆菌DX24具有较好的肠道粘附力，具备益生菌的潜力。
[0021](2)本专利技术验证了短小芽孢杆菌DX24可有效调节动物机体免疫力、提高机体抗氧化能力以及溶菌酶含量和碱性磷酸酶活力、提高日增重，最终改善动物的生长性能。
[0022](3)由于抗生素的长期使用导致了肠炎沙门氏菌的多重耐药性，所以只能寻找抗生素替代品来减少肠炎沙门氏菌对家畜和家禽的损伤，本专利技术验证了短小芽孢杆菌DX24对体内感染沙门菌所致的炎性因子IL
‑
6、TNF
‑
α、IFN
‑
γ、TLR2、TLR4的mRNA表达具有抑制作用，对粘附因子ZO
‑
1、OCLN、Caudin
‑
1的表达具有促进作用，能够避免机体受到致病微生物的侵害。
附图说明
[0023]此处所说明的附图用来提供对本专利技术的进一步理解，构成本专利技术的一部分，本专利技术的示意性实施例及其说明用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的不当限定。在附图中：
[0024]图1是本专利技术短小芽孢杆菌DX24染色镜检结果(10
×
100μm)；
[0025]图2是系统发育树；
[0026]图3为抑菌结果，kb为仅有营养肉汤的空白对照；
[0027]图4为耐人工胃肠液和自聚集、疏水性结果；A：耐人工胃肠液，B：自聚集，C：疏水性；
[0028]图5为脏器指数结果；
[0029]图6为日增重结果；
[0030]图7小鼠血液中IgG和空肠中sIgA含量；A：血液中IgG含量；B：空肠中sIgA含量；
[0031]图8病理组织切片和肠绒毛、隐窝、V/C比；A：病理组织切片(100
×
)，a1对照组空肠组织，a2低剂量组空肠组织，a3高剂量组空肠组织，b1对照组回肠组织，b2低剂量组回肠组
织，b3高剂量组回肠组织，c1对照组结肠组织，c2低剂量组结肠组织。c3高剂量组结肠组织；B：肠绒毛长度、隐窝深度和V/C比；a:肠绒毛长度，b：隐窝深度，c：V/C比；
[0032]图9病理组织切片；A～C：肝脏组织；A:对照组；B：沙门菌组；C：保护组；D～F：脾脏组织；D:对照组；E：沙门菌组；F：保护组；G～I：十二指肠组织；G:对照组；H：沙门菌组；I：保护组；J～L：空肠组本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株短小芽孢杆菌(Bacilluspumilus)DX24菌株，其保藏编号为CCTCC M20221933。2.含有权利要求1所述的短小芽孢杆菌DX24的菌剂。3.权权利要求1所述的短小芽孢杆菌DX24在制备饲料添加剂或动物饲料中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述饲料添加剂或动物饲料可广谱抗菌。5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述饲料添加剂或动物饲料为促进动物生长、调节动物机体免疫力的产品。6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述饲料添加剂或动物饲料为提高抗氧化能力、抑制炎性因子表达的产品。7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述短小芽孢杆菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈德纯，杨发龙，汤承，雷江英，
申请(专利权)人：西南民族大学，
类型：发明
国别省市：