一种口服重组融合鱼生长素及其PEG化的制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种口服重组融合鱼生长素及其PEG化的制备方法和应用，涉及基因重组技术领域及药剂领域，本发明专利技术中的融合鱼生长素的氨基酸序列包括转导蛋白结构域序列、linker蛋白序列和通用鱼生长素氨基酸序列，本发明专利技术采用鱼诺达病毒(Piscinenodavirus，PNV)转导结构域序列、草鱼呼肠孤病毒(Reovirusofgrasscarp，GCRV)转导结构域序列，蛋白激酶受体2(Proteaseactivatedreceptor2，Par2)TMhelix1作为细胞穿膜肽引导生长素进入细胞，提高蛋白转导率，同时采用mPEG

【技术实现步骤摘要】
一种口服重组融合鱼生长素及其PEG化的制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及基因重组
及药剂领域，具体涉及一种口服重组融合鱼生长素及PEG化重组融合鱼生长素，还涉及一种重组融合鱼生长素及PEG化重组融合鱼生长素制备方法及其在促进鱼类生长中的应用。

技术介绍

[0002]生长素(Growth Hormone，GH)广泛存在于各种脊椎动物中。它是一种具有广泛生理功能的生长调节素，能影响几乎所有的组织类型和细胞，具有促进骨骼生长，氮保留和加速蛋白质合成，并影响葡萄糖和脂类的代谢的功能。由于生长素具有以上功能，人们便利用基因工程技术大量生产重组生长素，将外源生长素注射或作为添加剂投喂动物促进生长。在鱼类养殖业上具有广泛的前景，具有明显的经济效益和社会效益。
[0003]原核表达是蛋白重组的一种方法类别，是指通过基因克隆技术，将外源目的基因，通过构建表达载体并导入原核类表达菌株的方法，使其在特定原核生物或细胞内表达。原核表达的优点在于能够短时间内获得基因表达产物，而且所需的成本相对比较低廉。方法也比较简单，可以表达的蛋白也比较多，适合大本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种口服重组融合鱼生长素，其特征在于：所述融合鱼生长素的氨基酸序列由转导蛋白结构域序列、linker蛋白序列和通用鱼生长素氨基酸序列构成，所述转导蛋白结构域序列包括PNV转导蛋白结构域、GCRV转导蛋白结构域和Par2转导蛋白结构域。2.根据权利要求1所述的一种口服重组融合鱼生长素，其特征在于：所述PNV转导蛋白结构域氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示，所述GCRV转导蛋白结构域氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示，所述Par2转导蛋白结构域氨基酸序列如SEQ ID NO.14所示，所述linker蛋白序列如SEQ ID NO.9所示，所述通用鱼生长素氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。3.一种如权利要求1
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2任一所述口服重组融合鱼生长素的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)融合鱼生长素基因序列的获得；(2)工程菌构建；(3)发酵纯化后获得融合鱼生长素。4.根据权利要求3所述的一种口服重组融合鱼生长素的制备方法，其特征在于：所述融合鱼生长素基因序列的获得具体包括以下步骤：(1)获取转导蛋白结构域序列；(2)获取通用鱼生长素氨基酸序列；(3)使用柔性linker蛋白序列将转导蛋白结构域序列和通用鱼生长素氨基酸序列进行连接，得到融合鱼生长素的氨基酸序列；(4)使用DNAMAN软件，结合BL21密码子偏好优化，做反向翻译并于上游添加酶切位点NCOⅠ，下游添加酶切位点XhoⅠ，得融合鱼生长素基因序列。5.根据权利要求4所述的一种口服重组融合鱼生长素的制备方法，其特征在于：所述通用鱼生长素氨基酸序列通过去除信号肽序列、膜内序列和穿膜序列，分别获得鲤鱼生长素序列、...

【专利技术属性】
技术研发人员：符修乐，王雅婷，李晨溪，姜纪，陈洪超，卞紫昱，卞康胤，汪李天择，汪露露，徐前明，杨聪山，刘光清，卞传忠，
申请(专利权)人：安徽中起生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：