一种类外泌体负载阿霉素在治疗神经母细胞瘤的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种类外泌体负载阿霉素在治疗神经母细胞瘤的应用，具体是一种骨髓间充质干细胞类外泌体负载阿霉素在治疗神经母细胞瘤的应用及新型生物纳米药物载体的制备方法。本发明专利技术通过连续挤压法制备类外泌体，并通过硫酸铵梯度法成功负载阿霉素，证明其是一种产率更高、肿瘤特异性更高、心脏毒性更低、抗肿瘤效果更好的新型生物纳米药物载体。值得注意的是，这种新型纳米载体的有效载荷将不局限于阿霉素，还可以扩展到其他传统化疗药物、小分子抑制剂，甚至核酸或蛋白质药物，为开发针对神经母细胞瘤或其他儿童肿瘤的新型精准药物带来希望。带来希望。带来希望。

【技术实现步骤摘要】
一种类外泌体负载阿霉素在治疗神经母细胞瘤的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，涉及类外泌体负载阿霉素在治疗神经母细胞瘤的应用，尤其是一种骨髓间充质干细胞类外泌体负载阿霉素在治疗神经母细胞瘤的应用及新型生物纳米药物载体的制备方法。。

技术介绍

[0002]神经母细胞瘤(NB)是儿童最常见的颅外实体瘤。在世界范围内，NB的发病率占所有儿童癌症的6％～10％。由于晚期NB患者易复发、远处转移和耐药，尽管积极治疗，NB患儿预后仍较差，5年总生存率小于50％。化疗是目前NB患儿综合治疗的重要组成部分。传统化疗药物虽然对肿瘤具有很高的致死率，但由于其对肿瘤的特异性较差，体内不良反应严重，成为NB治疗过程中的巨大障碍。开发靶向NB活性高、毒性低的新型药物纳米载体将是NB治疗的重大突破。
[0003]外泌体是一种几乎所有类型的细胞都积极分泌的细胞外囊泡(EV)，其大小相对均匀，直径在30nm～150nm之间，因此可以很容易地通过血液肿瘤屏障。此外，外泌体具有脂质双层膜结构，其较低的免疫原性使其能够有效地逃避免疫清除，因而可以延长血液循环时本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种类外泌体负载阿霉素在治疗神经母细胞瘤的应用，其特征是所述类外泌体为骨髓间充质干细胞类外泌体。2.一种新型生物纳米药物载体的制备方法，其特征在于包括如下步骤：1)细胞培养人成神经细胞瘤细胞株SH
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SY5Y和SK
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N
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DZ分别购自国家生物医学实验细胞资源库和美国型培养库；两种细胞系均在37℃和5％CO2条件下使用添加10％胎牛血清的Gibco DMEM高糖培养基培养；2)外泌体的分离利用超速离心法分离骨髓间充质干细胞来源的外泌体，收集培养72h以上的BMSCs上清，在4℃下依次经300
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g,10min；2000
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g,10min；10000
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g,30min进行粗离，去除细胞碎片或死细胞；然后收集上清液，在4℃下进行超速离心浓缩外泌体，所得外泌体沉淀用磷酸盐缓冲液洗涤后，再次超速离心纯化，所得纯化的外泌体沉淀用PBS重悬；最后，纯化后的外泌体经0.22μm无菌过滤器过滤后置于
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80℃保存；3)EM和负载阿霉素的EM的制备EM的制备：用PBS洗涤细胞1
‑
2...

【专利技术属性】
技术研发人员：何大维，李慕婕，王进奎，郭鹏，
申请(专利权)人：重庆医科大学附属儿童医院，
类型：发明
国别省市：