一种复合载药的细胞外囊泡吸入制剂的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种复合载药的细胞外囊泡吸入制剂的制备方法，通过基因工程修饰产生细胞外囊泡的细胞，使其分泌表达膜结合抗癌蛋白

【技术实现步骤摘要】
一种复合载药的细胞外囊泡吸入制剂的制备方法


[0001]本专利技术涉及细胞制剂
，具体是一种复合载药的细胞外囊泡吸入制剂的制备方法。

技术介绍

[0002]细胞外囊泡(extracellularvesicle,EV)是一种天然的生物纳米载体，携带着从母细胞获得的脂质，糖蛋白，核酸等成分，在磷脂双分子膜层的保护作用下，其装载内容物可在血液循环系统中稳定存在；另一方面脂质双层膜的存在也使细胞外囊泡能够较为容易地穿透体内的天然屏障(如血脑屏障)将携带的内容物递送至受体细胞，参与调控细胞的信号传导。EV与化学合成的脂质体类纳米载体相比，具有其独特优点，诸如：1)天然生物纳米材料更好的安全性；2)更高的分子操作灵活性以及多类治疗分子搭载能力(比如膜表面携带抗癌蛋白，内部装载功能性核酸小分子)；3)EV输送的药物分子受到天然磷脂双层膜的保护，稳定性好；4)很强的组织渗透性(已有研究表明，EV可以通过血脑屏障，输送抗癌核酸分子到脑肿瘤中)；5)EV天然地具备一定的肿瘤靶向性；此外，通过基因工程修饰的方法，可以将肿瘤抗原融合到EV膜表面蛋白分子，增强其肿本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种复合载药的细胞外囊泡吸入制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：A.将表达重组蛋白的病毒转染产生细胞外囊泡的细胞，得到表达全长重组蛋白的细胞，B.培养所述步骤A得到的表达重组蛋白的细胞，收集细胞培养后的上清液，从上清液中分离得到表达重组蛋白的细胞外囊泡，用磷酸盐缓冲溶液重悬表达重组蛋白的细胞外囊泡，得到表达重组蛋白的细胞外囊泡重悬液，C.将小分子药物加入到所述步骤B中得到的表达重组蛋白的细胞外囊泡重悬液中，将小分子药物载入表达重组蛋白的细胞外囊泡，得到复合载药的细胞外囊泡重悬液，D.将所述步骤C中得到的复合载药的细胞外囊泡重悬液雾化，得到复合载药的细胞外囊泡吸入制剂。2.根据权利要求1所述的一种复合载药的细胞外囊泡吸入制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤A中病毒为慢病毒、逆转录病毒、腺病毒中的至少一种。3.根据权利要求1所述的一种复合载药的细胞外囊泡吸入制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤A中产生细胞外囊泡的细胞为脐带间充质干细胞、骨髓间充质干细胞、脂肪间充质干细胞，牙髓间充质干细胞、胎盘间充质干细胞、羊水间充质干细胞、羊膜间充质干细胞、人胚肾细胞293T、巨噬细胞、NK细胞、DC细胞、T细胞、肿瘤相关成纤维细胞中的至少一种。4.根据权利要求1所述的一...

【专利技术属性】
技术研发人员：王健，赵凯，
申请(专利权)人：山东杰凯生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：