一种用于雾化吸入脂质纳米粒的通用型处方制造技术

本发明专利技术公开了一种用于雾化吸入脂质纳米粒的通用型处方，属于生物医药领域，处方包括：脂质纳米粒(LNP)分散体系和加入在所述LNP分散体系中的表面张力下降调节剂；LNP的粒度范围为70～160nm；表面张力下降调节剂在LNP分散体系的质量体积百分比在0.01～30％；本发明专利技术意外的发现在LNP分散体系中加入表面张力下降调节剂能增加LNP雾化剪切的耐受能力，解决了雾化的剪切力使得LNP在雾化前后粒度、分散度(PDI)和包封率(EE)稳定性差的问题，确保雾化吸入减轻病人痛苦的同时，实现高效递送。实现高效递送。实现高效递送。

【技术实现步骤摘要】
一种用于雾化吸入脂质纳米粒的通用型处方


[0001]本专利技术涉及核酸递送领域，特别是一种用于雾化吸入脂质纳米粒的通用型处方。

技术介绍

[0002]核酸药物通过调节目标基因的表达，达到预防和治疗疾病的目的。核酸药物具有高特异性、高效性的优势，并有望攻克现有靶点的成药局限性，具备治疗“不可靶向”、“不可成药”疾病的巨大潜力。然而，要想实现核酸药物的巨大潜能，高效安全的递送载体技术必不可少，尤其是需要解决针对器官/细胞特异性递送核酸治疗分子的关键技术难题，在提高核酸药物稳定性的同时，改善核酸药物的生物利用度和体内药代动力学性质。
[0003]目前，最有效的核酸药物递送载体是脂质纳米粒(LNP)，由可离子化脂质化合物、中性助脂质、结构脂质和PEG脂质等自组装形成，其中起关键作用的是可离子化脂质，其pKa一般介于5.5～6.8之间，这个特性让它在血清的环境中表面电荷基本为中性，有利于细胞将带有核酸片段的LNP整个吞进细胞内，形成胞内体(endosome)。一旦进入细胞后，胞内体的酸性环境使可离子化脂质的头部质子化并带正电荷，从而与胞内体的内膜融合，使目标核酸药物从胞内体中逃逸出来，进而通过表达目的蛋白或抑制靶基因的表达来发挥药效。
[0004]目前，已有多款核酸药物使用LNP作为递送载体获批并上市，其中包括：用于递送siRNA 的Onpattro，通过静脉注射给药，LNP富集于肝部进行RNAi治疗；通过肌肉注射给药，预防新型冠状病毒SARS
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2的mRNA疫苗等。核酸药物正为新一代药物研发带来变革。面对全球肆虐的新冠病毒感染，人们逐步认识到研发针对呼吸道疾病的有效防治手段(尤其是核酸变革性药物的研发)的重要性和必要性。然而，由于目前的核酸药物缺乏肺组织特异性的递送系统，针对肺部的疾病，包括肺纤维化、肺癌、哮喘、支气管疾病等，还没有可有效递送到肺部的核酸药物上市。此外，研究发现，对于类似于新冠这样的呼吸道传播疾病，采用模拟病毒感染的给药路径，即肺部吸入给药，不仅可以形成有效的系统免疫(产生lgG抗体)，而且还可以形成局部粘膜免疫(产生lgA抗体)，形成联合交叉保护效力。因此，吸入式核酸递送载体对于研发针对呼吸系统疾病的疫苗和药物显得尤为重要。
[0005]吸入式雾化制剂可以将药物直接递送到肺部，可以大大提高药物在肺部的富集浓度并减少系统毒性，是呼吸系统给药的先天优势。然而，吸入制剂研发特别是吸入式核酸LNP制剂，面临着可雾化性差的挑战，即因无法耐受雾化过程中的剪切破坏作用而导致雾化时核酸药物泄露、雾化后粒度和分散度(PDI)明显增加、雾化后转染效率明显下降等，因此，研发雾化吸入型LNP核酸药物的首要关键是克服雾化过程对LNP的破坏作用。无论哪种雾化形式，包括压缩式雾化、超声波雾化、网式雾化、软雾剂和压力定量气雾剂等，雾化过程中，LNP均要经历剪切力的破坏作用，该剪切破坏作用会导致LNP粒度增大、PDI增大和因核酸分子泄露而引起的包封率(EE)下降，最终影响其转染效果。目前关于雾化吸入型LNP核酸药物的专利和文献寥寥无几，而且大部分的报道是通过改变LNP的四个组分配比，以筛选出雾化前后粒度、PDI和EE变化较小的处方。但他们筛选出的最佳处方中，雾化后的粒度通常都会增加至少一倍以上，EE至少下降一倍，结果并不理想。如何保证LNP可以耐受雾化时的剪切
作用，实现雾化前后其结构的一致性和完整性，是市场急需解决的技术问题。
[0006]本专利技术通过提供一种通用型的处方，实现制备得到的LNP能够耐受雾化剪切力，可以使得LNP在雾化前后粒度、PDI和EE保持不变，突破了市场雾化吸入LNP无法耐受雾化剪切力，稳定性差的技术壁垒。且本处方适用于不同种类的LNP及不同配比的LNP，是一种通用型的方法。通过体内小鼠成像实验验证，使用该处方的LNP核酸药物相比于未使用该处方的 LNP而言，可以实现肺部的有效沉积，使肺部基因转染效率提高了多个数量级。

技术实现思路

[0007]为解决现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种用于雾化吸入脂质纳米粒(LNP) 的通用型处方，使得LNP可以耐受雾化过程中的剪切破坏作用，提高LNP在雾化过程中的稳定性，实现高效递送。
[0008]为了实现上述目标，本专利技术采用如下的技术方案：
[0009]一种用于雾化吸入LNP的通用型处方，在LNP分散体系中加入表面张力下降调节剂能增强LNP对雾化剪切的耐受能力。需要说明的是：只要是将表面张力下降调节剂加入LNP分散体系中用于增加LNP雾化剪切耐受能力，提高雾化前后粒度、PDI和EE一致性的化合物或组合物均在本专利技术的保护范围内，且都受本专利技术的启发。
[0010]前述的一种用于雾化吸入LNP的通用型处方，作为一种优选，包括：LNP分散体系和加入在所述LNP分散体系中的表面张力下降调节剂；所述LNP的粒度范围为70～160nm；所述表面张力下降调节剂在LNP分散体系中的质量体积百分比范围为0.01％～30％；需要说明的是：粒度分布在70～160nm之间的LNP可以更好的耐受雾化过程的破坏作用。
[0011]前述的一种用于雾化吸入LNP的通用型处方，LNP分散体系包括：LNP、体系溶液；所述LNP在其分散体系中的质量体积百分比范围为0.0025％～10％，所述体系溶液的浓度范围为0～1000mM。
[0012]前述的一种用于雾化吸入LNP的通用型处方，所述LNP分散体系包括：LNP、体系溶液、冻存保护剂；所述LNP在其分散体系中的质量体积百分比范围为0.0025％～10％，所述体系溶液的浓度范围为0～1000mM，所述冻存保护剂的质量体积百分比浓度范围为0％～20％；需要说明的是：LNP分散体系中可以包含冻存保护剂也可以不包含冻存保护剂。
[0013]前述的一种用于雾化吸入LNP的通用型处方，所述LNP按照摩尔比包括：可离子化脂质化合物：助脂质：结构脂质：聚合物缀合脂质＝30～60：5～40：20～40：0.1～15。需要说明的是：本专利技术的纳米粒子可以克服肺部递送所面临的生物学屏障和细胞内屏障，大量积累在肺部；其中聚合物缀合脂质的含量对LNP渗透到肺部细胞内部具有更深的研究价值，基于本专利技术的处方做的研究也都受本专利技术的启发。生物学屏障指：气管及肺泡组织上皮细胞的黏液层、黏膜纤毛和肺泡的表面活性物质等；细胞内屏障指由核酸自身的高负电性和较大的相对分子质量所造成的细胞摄取困难和溶酶体逃逸不足。
[0014]前述的一种用于雾化吸入LNP的通用型处方，作为一种优选，体系溶液包括：生理盐水、 4
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羟乙基哌嗪乙磺酸HEPEs缓冲液、三羟甲基氨基甲烷Tris缓冲液、Tris
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EDTA缓冲液、磷酸PB和磷酸盐PBS缓冲液、Dulbecco's磷酸盐DPBS缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、硫酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、含吐温的Tris缓冲液TBST、含EDTA及其钠盐的缓冲液中的一种或几种的组合；需要说明的是此处的体系溶液并非穷举，只是一种优本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于雾化吸入脂质纳米粒的通用型处方，其特征在于，在脂质纳米粒分散体系中加入表面张力下降调节剂能增加脂质纳米粒耐受雾化剪切的能力。2.根据权利要求1所述的一种用于雾化吸入脂质纳米粒的通用型处方，其特征在于，包括：脂质纳米粒分散体系和加入在所述脂质纳米粒分散体系中的表面张力下降调节剂；所述脂质纳米粒的粒度范围为70～160nm；所述表面张力下降调节剂在脂质纳米粒分散体系中的质量体积百分比范围为0.01％～30％。3.根据权利要求2所述的一种用于雾化吸入脂质纳米粒的通用型处方，其特征在于，所述脂质纳米粒分散体系包括：脂质纳米粒、体系溶液；所述脂质纳米粒在分散体系中的质量体积百分比范围为0.0025％～10％，所述体系溶液的浓度范围为0～1000mM。4.根据权利要求3所述的一种用于雾化吸入脂质纳米粒的通用型处方，其特征在于，所述脂质纳米粒分散体系包括：脂质纳米粒、体系溶液、冻存保护剂；所述脂质纳米粒在分散体系中的质量体积百分比范围为0.0025％～10％，所述体系溶液的浓度范围为0～1000mM，所述冻存保护剂的质量体积百分比范围为0％～20％。5.根据权利要求3所述的一种用于雾化吸入脂质纳米粒的通用型处方，其特征在于，所述脂质纳米粒按照摩尔比包括：可离子化脂质化合物：助脂质：结构脂质：聚合物缀合脂质＝30～60：5～40：20～40：0.1～15。6.根据权利要求3所述的一种用于雾化吸入脂质纳米粒的通用型处方，其特征在于，所述体系溶液包括：生理盐水、4
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羟乙基哌嗪乙磺酸HEPEs缓冲液、三羟甲基氨基甲烷Tris缓冲液、Tris
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EDTA缓冲液、磷酸PB和磷酸盐PBS缓冲液、Dulbecco's磷酸盐DPBS缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、硫酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、含吐温的Tris缓冲液TBST、含EDTA及其钠盐的缓冲液，及上述中的一种或几种的组合。7.根据权利要求1所述的一种用于雾化吸入脂质纳米粒的通用型处方，其特征在于，所述表面张力下降调节剂包...

【专利技术属性】
技术研发人员：章雪晴，陈起静，
申请(专利权)人：荣灿生物医药技术上海有限公司，
类型：发明
国别省市：