一种高产β-丙氨酸的工程菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种高产β

【技术实现步骤摘要】
一种高产
β
‑
丙氨酸的工程菌及其应用
(一)

[0001]本专利技术涉及一种高产高耐受β
‑
丙氨酸的工程菌、构建方法以及该工程菌在微生物发酵制备β
‑
丙氨酸中的应用。
(二)
技术介绍

[0002]β
‑
丙氨酸是自然界中唯一存在的β型氨基酸，存在于某些植物和细菌中。动物的生理功能及代谢也需要其发挥作用，它是人和哺乳动物内源咪唑二肽合成的限制性氨基酸，具有增加肌肉中咪唑二肽含量，提高抗氧化能力以及抗疲劳等作用。在养殖畜牧业方面，β
‑
丙氨酸可提高动物生产性能，调控肌肉生长和肌源活性肽含量，改善肉品质量。在医药方面，β
‑
丙氨酸可用于合成泛酸、泛酸钙、肌肽、帕米膦酸钠和巴柳氮等。在化工方面应用于电镀、铅中毒解毒剂及合成甜味剂。在环境应用方面可合成絮凝剂，用于水的净化。β
‑
丙氨酸主要通过化学法、酶法和发酵法合成。其中，化学法包括丙烯腈法、琥珀酰亚胺降解法、β
‑
氨基丙腈法等，但存在工艺条件苛刻、副产物本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高产β
‑
丙氨酸的工程菌，其特征在于，所述工程菌是以益生菌E.coliNissle 1917为底盘菌，敲除基因组中cycA基因、fumB1基因、aspC基因或pyk基因中的一种或多种，和/或过表达panD突变基因、aspB基因、aspA基因或ppC基因中的一种或多种构建获得的；所述panD突变基因是将panD基因编码蛋白第43位的赖氨酸突变为酪氨酸获得的编码基因。2.如权利要求1所述的高产β
‑
丙氨酸的工程菌，其特征在于，cycA基因核苷酸序列如SEQ ID NO.4中1007
‑
2419bp所示，fumB1基因核苷酸序列如SEQ ID NO.5中1004
‑
2650bp所示，aspC基因核苷酸序列如SEQ ID NO.6中1022
‑
2212bp所示，pyk基因核苷酸序列如SEQ ID NO.7中987
‑
2429bp所示，所述panD突变基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；aspB基因核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示，aspA基因核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示；ppC基因核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示。3.如权利要求2所述的高产β
‑
丙氨酸的工程菌，其特征在于，所述panD突变基因、aspB基因、aspA基因或ppC基因采用启动子P
J23100
表达，所述启动子P
J23100
核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。4.如权利要求3所述的高产β
‑
丙氨酸的工程菌，其特征在于，所述panD突变基因、aspB基因采用质粒pGLO进行过表达；所述aspA基因或ppC基因采用质粒pSU19进行过表达。5.如权利要求1
‑
4之一所述的高产β
‑
丙氨酸的工程菌，其特征在于，所述工程菌为下列之一：(1)以E.coli Nissle 1917为底盘菌，采用质粒pGLO和启动子P
J23100
过表达panD突变基因，即工程菌ECN
‑
1；(2)以E.coli Nissle 1917为底盘菌，敲除基因组中cycA基因，采用质粒pGLO和启动子P
J23100
过表达panD突变基因，即工程菌ECN
‑
2；(3)以E.coli Nissle 1917为底盘菌，敲除基因组中cycA基因和fumB1基因，采用质粒pGLO和启动子P
J23100
过表达panD突变基因，同时采用质粒pSU19和启动子P
J23100
过表达aspA基因，即工程菌ECN
‑
3；(4)以E.coli Nissle 1917为底盘菌，敲除基因组中cycA基因、fumB1基因和aspC基因，采用质粒pGLO和启动子P
J23100
过表达panD突变基因和aspB基因，同时采用质粒pSU19和启动子P
J23100
过表达aspA基因，即工程菌ECN
‑
4；(5)以E.coli Nissle 1917为底盘菌，敲除基因组中cycA基因、fumB1基因、aspC基因和pyk基因，采用质粒pGLO和启动子P
J23100
过表达panD突变基因和aspB基因，采用...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙东昌，胡诗龙，陈德刚，张萍，费明月，付贝贝，黄海婵，
申请(专利权)人：黑龙江华瑞生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：