脆弱拟杆菌在改善和治疗腹泻中的应用制造技术

本发明专利技术提供了脆弱拟杆菌在改善和/或治疗腹泻中的应用。通过不同的小鼠腹泻模型试验证明，保藏编号为CGMCC No.10685的脆弱拟杆菌ZY

【技术实现步骤摘要】
脆弱拟杆菌在改善和治疗腹泻中的应用
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2022年01月25日提交的申请号为202210089886.6的中国专利技术专利申请的优先权和权益，其整体内容通过引用的方式纳入本文。


[0003]本专利技术涉及一种脆弱拟杆菌的应用，具体而言，涉及脆弱拟杆菌在改善和/或治疗腹泻中的应用。

技术介绍

[0004]腹泻是一种胃肠道疾病，其特征为较平常大量且频繁(每天排便多于3次)的水状或软性大便。在极端情况下，每天可损失超过20升的液体。同时也是危害机体健康的重要疾病之一，它看起来是一种小病，但其致死率却仅次于肿瘤、糖尿病等，在诸多疾病死亡率中均位居前列。世界卫生组织2018年发布的资料显示，腹泻病是造成全球5岁以下儿童死亡的第二大原因，每年约有52.5万名五岁以下儿童死于腹泻病。成人腹泻的流行情况也不容小觑，大多数成年人每年至少有过一次腹泻，肠道传染病流行时波及面广，由此造成的危害性更大。
[0005]腹泻不是一种独立的疾病，而是很多疾病的一个共同表现。腹泻的病因可分为感染性腹泻和非感染性腹泻。感染性腹泻多是由病毒、细菌、真菌和寄生虫感染所致，可伴有腹痛、发热及白细胞增多等症状；非感染性腹泻，包括食品、化学品中毒、药源性腹泻、食饵性腹泻、症状性腹泻、过敏性腹泻、及其他先天代谢性疾病腹泻等。
[0006]当前，临床对于腹泻的治疗主要在于药物对症治疗，如蒙脱石散、咯派丁胺、鞣酸蛋白、次碳酸铋、氢氧化铝凝胶等。根据症状的持续时间可区分急性腹泻和慢性腹泻，其症状分别持续不到两周及至少两周。治疗感染性急性腹泻首选抗生素(如氟哌酸、左氧氟沙星、莫西沙星、甲硝唑等)进行病因治疗，但仅仅使用抗生素进行治疗，会增加患者肠胃的副作用，严重时甚至会加重病情，因此需辅以止泻药进行对症治疗。而慢性腹泻的治疗多为长期间歇性治疗，通过饮食调整，辅以如蒙脱石散、次碳酸铋等无中枢反应药物，以及双歧杆菌活菌、地衣芽孢杆菌活菌等微生态调节剂。
[0007]共生细菌在肠道稳态中起着重要作用，并对肠道完整性具有一定的保护作用。因此，采用益生菌治疗腹泻成为近年来研究的热点。益生菌是通过定植在人体内，改变宿主某一部位菌群组成的一类对宿主有益的活性微生物。副益生菌被定义为“无活力的微生物细胞，如果口服或局部使用足够数量，即可为使用者带来好处”，该定义包括形态不完整的微生物细胞和形态完整的微生物细胞(参考Taverniti V,Guglielmetti S.The immunomodulatory properties of probiotic microorganisms beyond their viability(ghost probiotics:proposal of paraprobiotic concept)[J].Genes&Nutrition,2011,6(3):261
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274.))。主流研究观点认为，破碎的微生物细胞能够更好地释放功能分子，因此具有更好的效果；但对于完整的灭活微生物细胞，没有统一的观点能够说
明其在某些应用中优于活菌的原因。目前针对副益生菌的研究集中在乳杆菌、双歧杆菌等一代益生菌上，研究方向相对固定。因此，有必要开发新型副益生菌，扩展副益生菌的适应症范围。

技术实现思路

[0008]针对上述问题，本专利技术提供了脆弱拟杆菌在改善和/或治疗腹泻中的应用。
[0009]为了更好地解决上述问题，本专利技术采用如下技术方案：
[0010]第一方面，本专利技术提供了脆弱拟杆菌在制备改善和/或治疗腹泻的组合物中的应用，所述脆弱拟杆菌为活菌或灭活菌。
[0011]在本专利技术的实施方案中，脆弱拟杆菌选自保藏编号为CGMCC No.10685的脆弱拟杆菌ZY
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312。
[0012]根据本专利技术的实施方案，所述腹泻为感染性腹泻或非感染性腹泻。
[0013]优选的，所述感染性腹泻为病毒感染性腹泻、细菌/真菌感染性腹泻和寄生虫感染性腹泻中的一种或多种；和/或，所述非感染性腹泻为非感染性炎症腹泻、肿瘤性腹泻、吸收不良性腹泻、运动性腹泻、肠道菌群失调相关性腹泻和药物相关性腹泻中的一种或多种。
[0014]优选的，所述病毒感染性腹泻为诺如病毒、轮状病毒、札如病毒、星状病毒及腺病毒、肠道病毒、冠状病毒等中的一种或多种；细菌感染为沙门菌属、志贺菌属、弯曲杆菌属、小肠结肠炎耶尔森氏菌、霍乱弧菌、产毒性大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、致泻性大肠埃希菌等中的一种或多种；真菌感染为念珠菌、毛霉菌和曲霉菌等；寄生虫感染为蓝贾第鞭毛虫(贾第虫)、溶组织内阿米巴、隐孢子虫、环孢子虫、人芽囊原虫、旋毛虫和血吸虫等；所述吸收不良性腹泻为继发性小肠吸收不良性腹泻，优选的，所述继发性小肠吸收不良性腹泻为消化不良性腹泻，进一步优选的，所述消化不良性腹泻为乳糖吸收不良性腹泻；和/或，所述肠道菌群失调相关腹泻为艰难梭菌失调相关性腹泻；和/或，所述药物相关性腹泻中的药物为泻药(酚酞、番泻叶、蓖麻油等)、高渗性药(硫酸镁、硫酸钠等)、抗生素(青霉素类、头孢菌素类、林可霉素、克林霉素等)、化疗药(表柔比星、多西他赛、氟尿嘧啶、羟基喜树碱等)、抗高血压药(普萘洛尔、利血平、甲基多巴等)、抗心律失常药(强心苷类、奎尼丁等)、利尿药(呋塞米、依他尼酸等)、降脂药(氯贝丁酯、考来烯胺等)中的一种或多种，进一步优选的，所述药物为泻药、高渗性药和抗生素中的一种或多种。
[0015]优选的，所述脆弱拟杆菌为灭活菌，进一步优选的，所述脆弱拟杆菌为形态完整的灭活菌和/或形态不完整的灭活菌。
[0016]优选的，上述脆弱拟杆菌是通过干热、湿热、过滤、有机溶剂、化学试剂、紫外或红外射线、发酵、冻干、基因重组、基因修饰或改造的方法中的任意一种或多种灭活的。
[0017]优选的，所述脆弱拟杆菌为脆弱拟杆菌活菌粉或灭活菌粉，所述脆弱拟杆菌灭活菌粉经过发酵培养、氯化钠水溶液洗涤与离心、加入赋形剂重悬、灭活和干燥步骤制备得到。
[0018]进一步优选的，所述脆弱拟杆菌灭活菌粉通过以下方法制备获得，包括以下步骤：
[0019](1)取脆弱拟杆菌发酵培养；
[0020](2)发酵培养结束后，对发酵液进行离心，收集菌体，按菌体与氯化钠水溶液的重量体积比为1g:(10～30)mL加入氯化钠水溶液洗涤、离心，得到洗涤后菌体；
[0021](3)向洗涤后菌体中加入第一赋形剂溶液混合重悬得到菌体溶液，再进行灭活处理，离心，收集灭活菌泥；
[0022](4)向步骤(3)获得的灭活菌泥中加入第二赋形剂溶液，得灭活菌原液；
[0023](5)将步骤(4)获得的灭活菌原液干燥至残留水分低于5wt％，即得脆弱拟杆菌灭活菌粉。
[0024]根据本专利技术的实施方案，步骤(2)中，发酵液的菌数达到108CFU/mL以上。
[0025]根据本专利技术的实施方案，步骤(2)中，所述氯化钠水溶液的质量浓度为0.6
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.脆弱拟杆菌在制备改善和/或治疗腹泻的组合物中的应用，其特征在于，所述脆弱拟杆菌为活菌或灭活菌或裂解液。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述脆弱拟杆菌选自保藏编号为CGMCCNo.10685的脆弱拟杆菌ZY
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312。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述腹泻为感染性腹泻或非感染性腹泻；优选的，所述感染性腹泻包括病毒感染性腹泻、细菌感染性腹泻、真菌感染性腹泻和寄生虫感染性腹泻中的一种或多种；和/或，所述非感染性腹泻包括非感染性炎症腹泻、肿瘤性腹泻、吸收不良性腹泻、运动性腹泻、肠道菌群失调相关性腹泻和药物相关性腹泻中的一种或多种；进一步优选的，所述病毒感染性腹泻包括诺如病毒、轮状病毒、札如病毒、星状病毒及腺病毒、肠道病毒、冠状病毒中的一种或多种；优选的，所述病毒性腹泻为诺如病毒或轮状病毒感染导致的腹泻；所述细菌感染包括沙门菌属、志贺菌属、弯曲杆菌属、小肠结肠炎耶尔森氏菌、霍乱弧菌、产毒性大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、致泻性大肠埃希菌中的一种或多种；所述真菌感染包括念珠菌、毛霉菌和曲霉菌中的一种或多种；所述寄生虫感染包括蓝贾第鞭毛虫(贾第虫)、溶组织内阿米巴、隐孢子虫、环孢子虫、人芽囊原虫、旋毛虫和血吸虫中的一种或多种；所述吸收不良性腹泻为继发性小肠吸收不良性腹泻；更进一步优选的，所述继发性小肠吸收不良性腹泻为消化不良性腹泻，更进一步优选的，所述消化不良性腹泻为乳糖吸收不良性腹泻；所述肠道菌群失调相关腹泻为艰难梭菌失调相关性腹泻；所述药物相关性腹泻中的药物为泻药(酚酞、番泻叶、蓖麻油等)、高渗性药(硫酸镁、硫酸钠等)、抗生素(青霉素类、头孢菌素类、林可霉素、克林霉素等)、化疗药(表柔比星、多西他赛、氟尿嘧啶、羟基喜树碱等)、抗高血压药(普萘洛尔、利血平、甲基多巴等)、抗心律失常药(强心苷类、奎尼丁等)、利尿药(呋塞米、依他尼酸等)、降脂药(氯贝丁酯、考来烯胺等)中的一种或多种；更进一步优选的，所述药物为泻药、高渗性药和抗生素中的一种或多种。4.根据权利要求1
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3任一项所述的应用，其特征在于，所述脆弱拟杆菌为活菌或者形态完整的灭活菌和/或形态不完整的灭活菌或裂解液。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述脆弱拟杆菌是通过干热、湿热、过滤、有机溶剂、化学试剂、紫外或红外射线、发酵、冻干、基因重组、基因修饰或改造的方法中的任意一种或多种灭活的。6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述脆弱拟杆菌为脆弱拟杆菌活菌液或灭活菌粉，所述脆弱拟杆菌灭活菌粉经过发酵培养、氯化钠水溶液洗涤与离心、加入赋形剂重悬、灭活和干燥步骤制备得到；优选的，所述脆弱拟杆菌灭活菌粉通过以下方法制备获得，包括以下步骤：(1)取脆弱拟杆菌发酵培养；(2)发酵培养结束后，对发酵液进行离心，收集菌体，按菌体与氯化钠水溶液的重量体积比为1g:(10～30)mL加入氯化钠水溶液洗涤、离心，得到洗涤后菌体；
(3)向洗涤后菌体中加入第一赋形剂溶液混合重悬得到菌体溶液，再进行灭活处理，离心，收集灭活菌泥；(4)向步骤(3)获得的灭活菌泥中加入第二赋形剂溶液，得灭活菌原液；(5)将步骤(4)获得的灭活菌原液干燥至残留水分低于5wt％，即得脆弱拟杆菌灭活菌粉；根据本发明的实施方案，步骤(2)中，发酵液的菌数达到108CFU/mL以上；根据本发明的实施方案，步骤(2)中，所述氯化钠水溶液...

【专利技术属性】
技术研发人员：常秀娟，郑丽君，梅云飞，王晔，智发朝，刘洋洋，李平，
申请(专利权)人：广州知易生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：