内含肽进化系统和方法、对应的突变质粒和报告质粒技术方案

本发明专利技术公开了一种内含肽进化体系，包括：包含切口酶和低保真DNA聚合酶的表达基因，以及由两个短肽组成的二聚化短肽体系的表达基因的突变质粒；包含抗生素抗性蛋白

【技术实现步骤摘要】
内含肽进化系统和方法、对应的突变质粒和报告质粒


[0001]本专利技术涉及一种内含肽进化系统和方法、对应的突变质粒和报告质粒。

技术介绍

[0002]内含肽是一种位于蛋白质前体中可以催化自身从前体中切割分离的氨基酸序列，因其机制类似于真核生物内含子的剪接，因此被命名为内含肽。内含肽类似于蛋白酶，具有切割肽键的活性。因此，内含肽是生命科学领域具有广泛的应用。尤其在蛋白表达、纯化和标签切除上，内含肽具有促进表达、切割方便和成本廉价等显著的优势，因此内含肽具有重要的商业价值。但是，内含肽仍存在明显的局限性，如催化活性低和偏好性严重，这严重的影响了内含肽的应用和推广。提高内含肽的催化活性和降低内含肽的偏好性，是亟待解决的问题。
[0003]定向进化是近些年来兴起的生物技术，利用实验室规模的进化系统，可以在数月的时间内获得自然界中需要数十亿年的进化结果，是一项使用的蛋白或RNA改造技术。如何通过定向进化技术获得高活性的内含肽，是行业内关注的重点。

技术实现思路

[0004]本专利技术公开了一种突变质粒，所述质粒中包含切口酶和低保真本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种突变质粒，其特征在于：所述质粒中包含位点特异性切口酶和低保真DNA聚合酶的表达基因，以及由两个短肽组成的二聚化短肽体系的表达基因，其中二聚化短肽体系中的一个短肽与切口酶形成融合蛋白，该短肽位于切口酶的N端或C端，二聚化短肽中的另一个短肽与低保真DNA聚合酶形成融合蛋白，该短肽位于低保真DNA聚合酶的N端或C端。2.根据权利要求1所述的突变质粒，其特征在于：所述质粒的序列如SEQ ID No.1所示。3.一种报告质粒，其特征在于：所述报告质粒中包含抗生素抗性蛋白
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N和内含肽
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N基因的融合蛋白表达基因，以及内含肽
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C和抗生素抗性蛋白
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C基因的融合蛋白表达基因。4.根据权利要求3所述的报告质粒，其特征在于：所述报告质粒中还包含切口酶识别位点，在每个融合表达基因的上游或下游设有切口酶识别位点。5.根据权利要求3或4所述的报告质粒，其特征在于：所述报告...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘丽花，张志乾，吴嵩，陈西朋，何茜，江翱，吴奕瑞，王帆，杨敏，
申请(专利权)人：广州市乾相生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：