苦参子提取物及有效部位的制备方法及其防治抑郁症的用途技术

本发明专利技术公开了一种苦参子提取物的制备方法，该方法包括以下步骤：(1)称取适量的苦参子粉末，加入一定量的溶剂，提取，离心，得第一上清液；(2)滤渣加入一定量的溶剂，重复上述操作，得到第二上清液；(3)合并该第一上清液和该第二上清液，得到苦参子提取液；以及(4)将该苦参子提取液浓缩并干燥，得到苦参子提取物。该制备方法工艺简单、节能环保、重现性好、所获得的苦参子提取物五种单体成分含量高，具有工业大生产的可行性，并且通过脂多糖注射建立小鼠抑郁样动物模型，表明该苦参子提取物对小鼠抑郁样行为具有改善作用。郁样行为具有改善作用。郁样行为具有改善作用。

【技术实现步骤摘要】
苦参子提取物及有效部位的制备方法及其防治抑郁症的用途


[0001]本专利技术涉及医药
，具体涉及一种苦参子提取物和有效部位的制备方法及其防治抑郁症的用途。

技术介绍

[0002]苦参子为豆科植物苦参(Sophora flavescens Ait.)的种子。苦参子中含有如氧化苦参碱、氧化槐果碱等具有独特药理活性的生物碱类成分，同时前期研究得到苦参子还含有两个含量较高的非生物碱类成分，γ
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谷氨酰
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酪氨酸和番石榴酸。因此，可考虑将苦参子用于酸性和碱性成分的分离原料。
[0003]抑郁症又称抑郁障碍(major depressive disorder，MDD)，是最常见的精神障碍之一，其临床特征为显著而持久的心境低落。常病程迁延、反复发作，每次发作大多数可以缓解，部分可有残留症状或转为慢性，可造成严重的社会功能损害。抑郁症发病机制目前尚未阐明，大量研究表明，炎症因子会侵袭中枢神经系统，导致神经系统功能紊乱，神经炎症与抑郁症的发展密切相关。脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)可引起海马体神经炎症状态，脑内促炎细胞因子增加，并诱导抑郁样行为，LPS腹腔注射诱导的抑郁样小鼠模型是目前被广泛认可，并能有效探讨抗抑郁作用的动物模型抑郁。
[0004]现有技术中未见苦参子提取物和有效部位的分离制备方法及其抗抑郁作用的报道。

技术实现思路

[0005]本专利技术的主要目的是提供一种工艺简单、重现性好、具备工业化应用前景的苦参子提取物和有效部位的制备分离方法及其抗抑郁作用，以解决现有技术中缺少相关制备分离方法及缺少相关抗抑郁作用研究的问题。
[0006]为了实现上述目的，根据本专利技术的一个方面，提供了一种苦参子提取物的制备方法，该方法包括以下步骤：(1)称取适量的苦参子粉末，加入一定量的溶剂，提取，离心，得到第一上清液；(2)滤渣加入一定量的溶剂，重复上述操作，得到第二上清液；(3)合并该第一上清液和该第二上清液，得到苦参子提取液；以及(4)将该苦参子提取液浓缩并干燥，得到苦参子提取物。
[0007]根据本专利技术的另一个方面，提供了一种苦参子提取物的有效部位的制备方法，该方法包括以下步骤：(1)称取适量的苦参子粉末，加入一定量的溶剂，提取，离心，得到第一上清液；(2)滤渣加入一定量的溶剂，重复上述操作，得到第二上清液；(3)合并该第一上清液和该第二上清液，得到苦参子提取液；以及(4)通过阳离子交换树脂柱层析法、大孔吸附树脂柱层析法或醇沉法对该苦参子提取液中的有效部位进行纯化。
[0008]进一步地，该有效部位包含生物碱部位和/或非生物碱部位。
[0009]进一步地，该生物碱部位包含以下成分中的一种或多种：N
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甲基金雀花碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱。
[0010]进一步地，该非生物碱部位包含以下成分中的一种或多种：γ
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谷氨酰
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酪氨酸和番石榴酸。
[0011]进一步地，所述有效部位包含以下成分中的一种或多种：N
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甲基金雀花碱、氧化槐果碱、氧化苦参碱、γ
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谷氨酰
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酪氨酸和番石榴酸。
[0012]进一步地，该阳离子交换树脂柱层析法包括以下步骤：(1)取适量的该苦参子提取液，加酸调pH至2.0～4.0，3000～5000r/min离心5～15min，取上清液，添加至阳离子交换树脂柱中，流速为0.05～0.15柱体积(BV)/min，其中上样过程中未吸附的部分为未吸附流分；(2)使用3～5BV的水进行洗脱，流速为0.05～0.15BV/min，得到水洗脱流分；(3)使用1～3倍量(溶液体积∶树脂质量，mL/g)的3％～10％氨水乙醇溶液将水进行洗脱之后的阳离子交换树脂进行回流提取1～3h，回流1～2次，得到3～10％氨水乙醇洗脱流分；以及(4)将该未吸附流分和该水洗脱流分合并后，浓缩干燥，得到该非生物碱部位；将该3～10％氨水乙醇洗脱流分浓缩干燥，得到该生物碱部位。
[0013]进一步地，该阳离子交换树脂柱层析法包括以下步骤：(1)取适量的该苦参子提取液，加酸调pH至2.5～3.5，3500～4500r/min离心8～12min，取上清液，添加至阳离子交换树脂柱中，流速为0.08～0.12BV/min，其中上样过程中未吸附的部分为未吸附流分；(2)使用3.5～4.5BV的水进行洗脱，流速为0.08～0.12BV/min，得到水洗脱流分；(3)使用1.5～2.5倍量(溶液体积∶树脂质量，mL/g)的4％～8％氨水乙醇溶液将水进行洗脱之后的阳离子交换树脂进行回流提取1.5～2.5h，回流2次，得到4～8％氨水乙醇洗脱流分；以及(4)将该未吸附流分和该水洗脱流分合并后，浓缩干燥，得到该非生物碱部位；将该4～8％氨水乙醇洗脱流分浓缩干燥，得到该生物碱部位。
[0014]进一步地，该阳离子交换树脂柱层析法包括以下步骤：(1)取适量的该苦参子提取液，加酸调pH至约3.0，约4000r/min离心约10min，取上清液，添加至阳离子交换树脂柱中，流速为约0.10BV/min，其中上样过程中未吸附的部分为未吸附流分；(2)使用约4BV的水洗脱，流速为约0.10BV/min，得到水洗脱流分；(3)使用约2倍量(溶液体积∶树脂质量，mL/g)的约5％氨水乙醇溶液将水进行洗脱之后的阳离子交换树脂进行回流提取约2h，回流2次，得到约5％氨水乙醇洗脱流分；以及(4)将该未吸附流分和该水洗脱流分合并后，浓缩干燥，得到该非生物碱部位；将约5％氨水乙醇洗脱流分浓缩干燥，得到该生物碱部位。
[0015]进一步地，该酸为盐酸。
[0016]进一步地，该阳离子交换树脂柱为732型阳离子交换树脂柱。
[0017]其中，732型树脂是强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂，利用离子树脂作为固定相与目标成分结合，除去多余杂质，实现物质分离，其有洗脱效果好，提取效率高的优点。具体而言，采用732型阳离子树脂对苦参子中的生物碱和非生物碱成分进行分离和纯化，其原理是：以732型阳离子交换树脂作为固定相，加酸后的苦参子提取液流过阳离子交换柱时，生物碱能以阳离子的形式与树脂上的基团发生离子交换，被吸附到阳离子交换柱上，其余非生物碱成分则流出，吸附完成后选择适当的洗脱剂洗脱生物碱，实现分离和纯化。
[0018]进一步地，该阳离子交换树脂柱的径高比为1:6～1:10，例如约1:8。
[0019]进一步地，该大孔吸附树脂柱层析法包括以下步骤：(1)取适量的该苦参子提取液，添加至大孔树脂柱中，流速为0.05～0.15BV/min，其中上样过程中未吸附的部分为未吸附流分；(2)依次使用3～7BV的水和3～7BV的20～40％乙醇进行洗脱，流速为0.05～
0.15BV/min，分别获得水洗脱流分和2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种苦参子提取物的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)称取适量的苦参子粉末，加入一定量的溶剂，提取，离心，得到第一上清液；(2)滤渣加入一定量的溶剂，重复上述操作，得到第二上清液；(3)合并所述第一上清液和所述第二上清液，得到苦参子提取液；以及(4)将所述苦参子提取液浓缩并干燥，得到苦参子提取物。2.一种苦参子提取物的有效部位的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)称取适量的苦参子粉末，加入一定量的溶剂，提取，离心，得到第一上清液；(2)滤渣加入一定量的溶剂，重复上述操作，得到第二上清液；(3)合并所述第一上清液和所述第二上清液，得到苦参子提取液；以及(4)通过阳离子交换树脂柱层析法、大孔吸附树脂柱层析法或醇沉法对所述苦参子提取液中的有效部位进行纯化。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述有效部位包含生物碱部位和/或非生物碱部位；优选地，所述生物碱部位包含以下成分中的一种或多种：N
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甲基金雀花碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱；优选地，所述非生物碱部位包含以下成分中的一种或多种：γ
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酪氨酸和番石榴酸；优选地，所述有效部位包含以下成分中的一种或多种：N
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甲基金雀花碱、氧化槐果碱、氧化苦参碱、γ
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酪氨酸和番石榴酸。4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述阳离子交换树脂柱层析法包括以下步骤：(1)取适量的所述苦参子提取液，加酸调pH至2.0～4.0，3000～5000r/min离心5～15min，取上清液，添加至阳离子交换树脂柱中，流速为0.05～0.15柱体积(BV)/min，其中上样过程中未吸附的部分为未吸附流分；(2)使用3～5BV的水进行洗脱，流速为0.05～0.15BV/min，得到水洗脱流分；(3)使用1～3倍量(溶液体积∶树脂质量，mL/g)的3％～10％氨水乙醇溶液将水进行洗脱之后的阳离子交换树脂进行回流提取1～3h，回流1～2次，得到3～10％氨水乙醇洗脱流分；以及(4)将所述未吸附流分和所述水洗脱流分合并后，浓缩干燥，得到所述非生物碱部位；将所述3～10％氨水乙醇洗脱流分浓缩干燥，得到所述生物碱部位；优选地，所述阳离子交换树脂柱层析法包括以下步骤：(1)取适量的所述苦参子提取液，加酸调pH至2.5～3.5，3500～4500r/min离心8～12min，取上清液，添加至阳离子交换树脂柱中，流速为0.08～0.12BV/min，其中上样过程中未吸附的部分为未吸附流分；(2)使用3.5～4.5BV的水进行洗脱，流速为0.08～0.12BV/min，得到水洗脱流分；(3)使用1.5～2.5倍量(溶液体积∶树脂质量，mL/g)的4％～8％氨水乙醇溶液将水进行洗脱之后的阳离子交换树脂进行回流提取1.5～2.5h，回流2次，得到4～8％氨水乙醇洗脱流分；以及(4)将所述未吸附流分和所述水洗脱流分合并后，浓缩干燥，得到所述非生物碱部位；
将所述4～8％氨水乙醇洗脱流分浓缩干燥，得到所述生物碱部位；更优选地，所述阳离子交换树脂柱层析法包括以下步骤：(1)取适量的所述苦参子提取液，加酸调pH至约3.0，约4000r/min离心约10min，取上清液，添加至阳离子交换树脂柱中，流速为约0.10BV/min，其中上样过程中未吸附的部分为未吸附流分；(2)使用约4BV的水洗脱，流速为约0.10BV/min，得到水洗脱流分；(3)使用约2倍量(溶液体积∶树脂质量，mL/g)的约5％氨水乙醇溶液将水进行洗脱之后的阳离子交换树脂进行回流提取约2h，回流2次，得到约5％氨水乙醇洗脱流分；以及(4)将所述未吸附流分和所述水洗脱流分合并后，浓缩干燥，得到所述非生物碱部位；将约5％氨水乙醇洗脱流分浓缩干燥，得到所述生物碱部位；又优选地，所述酸为盐酸；又优选地，所述阳离子交换树脂柱为732型阳离子交换树脂柱；又优选地，所述阳离子交换树脂柱的径高比为1:6～1:10，例如约1:8。5.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述大孔吸附树脂柱层析法包括以下步骤：(1)取适量的所述苦参子提取液，添加至大孔树脂柱中，流速为0.05～0.15BV/min，其中上样过程中未吸附的部分为未吸附流分；(2)依次使用3～7BV的水和3～7BV的20～40％乙醇进行洗脱，流速为0.05～0.15BV/min，分别获得水洗脱流分和20～40％乙醇洗脱流分；以及(3)将所述未吸附流分和所述水洗脱流分合并后，浓缩干燥，得到所述非生物碱部位；将所述20～40％乙醇洗脱流分浓缩干燥，得到所述生物碱部位；优选地，所述大孔吸附树脂柱层析法包括以下步骤：(1)取适量的所述苦参子提取液，...

【专利技术属性】
技术研发人员：高慧敏，王智民，陈两绵，田盼，刘晓谦，郭建友，朱天，
申请(专利权)人：中国中医科学院中药研究所，
类型：发明
国别省市：