一种重组酵母菌及其在发酵生产β-榄香烯中的应用制造技术

本发明专利技术涉及微生物技术领域，具体公开了一种重组酵母菌及其在发酵生产β‑榄香烯中的应用。本发明专利技术的重组酵母菌，与出发酵母菌株相比，表达法尼基二磷酸合酶ERG20、莴苣来源的倍半萜合酶LsLTC2和玫瑰来源的双功能法尼基二磷酸合酶RrFPS，并在过氧化物酶体中表达IDI1、ERG13、ERG8、ERG10、ERG12、MVD1和tHMGR。优选，使细胞基质内的鲨烯合酶ERG9的表达量进一步下调、过表达ERG10、ERG13和IDI1、并表达XFPK、PTA、POXB和ACS。本发明专利技术的重组酵母菌，其可高效生产β‑榄香烯，为β‑榄香烯的工业化生产提供了更有效的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物，具体地说，涉及一种重组酵母菌及其在发酵生产β-榄香烯中的应用。

技术介绍

1、β-榄香烯是中药温郁金的有效成分之一，具有抗炎、抗菌、抗肿瘤等药理活性。目前临床上广泛应用β-榄香烯注射液治疗肺癌、肝癌、食道癌、鼻咽癌等多种恶性肿瘤，具有毒副作用小，对正常细胞和周围白细胞影响较小的特点，且有助于化疗、放疗药物进入癌组织发挥作用。

2、随着β-榄香烯市场需求的不断增加，利用传统的提取分离方法从天然植物温郁金中获得β-榄香烯已无法满足市场需求，且通过提取分离得到的产品存在得率少、纯度低等问题，二次分离所需成本高。而通过化学合成的方法合成β-榄香烯，需要用到如二氯甲烷、氰化钠、甲苯等剧毒化学试剂，不利于环境保护；且化学合成的反应条件较难达到，而产品得率也很低。

3、随着生物技术的发展，合成生物学受到越来越多的关注。通过在微生物底盘细胞中重组天然化合物的生物合成途径，来快速、大量的获取天然产物及其中间体，为植物天然活性产物的开发与应用提供了新的方法。微生物具有生长速度快、发酵周期短、发酵成本低的优点，且相对于植物其遗传背景本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种重组酵母菌，其特征在于，与出发酵母菌株相比，表达法尼基二磷酸合酶ERG20、莴苣来源的倍半萜合酶LsLTC2和玫瑰来源的双功能法尼基二磷酸合酶RrFPS，并在过氧化物酶体中表达IDI1、ERG13、ERG8、ERG10、ERG12、MVD1和tHMGR。

2.根据权利要求1所述的重组酵母菌，其特征在于，与出发酵母菌菌株相比，在细胞基质内还包括以下变化中的一种或多种：

3.根据权利要求2所述的重组酵母菌，其特征在于，所述法尼基二磷酸合酶ERG20的GenBank登录号为NP_012368.1；所述莴苣来源的倍半萜合酶LsLTC2的编码基因的GenBank登录...

【技术特征摘要】

1.一种重组酵母菌，其特征在于，与出发酵母菌株相比，表达法尼基二磷酸合酶erg20、莴苣来源的倍半萜合酶lsltc2和玫瑰来源的双功能法尼基二磷酸合酶rrfps，并在过氧化物酶体中表达idi1、erg13、erg8、erg10、erg12、mvd1和thmgr。

2.根据权利要求1所述的重组酵母菌，其特征在于，与出发酵母菌菌株相比，在细胞基质内还包括以下变化中的一种或多种：

3.根据权利要求2所述的重组酵母菌，其特征在于，所述法尼基二磷酸合酶erg20的genbank登录号为np_012368.1；所述莴苣来源的倍半萜合酶lsltc2的编码基因的genbank登录号为af489964.1；所述玫瑰来源的双功能法尼基二磷酸合酶rrfps的编码基因的genbank登录号为kp768082.1；

4.一种构建生产β-榄香烯的重组酵母的方法，其特征在于，包括使出发酵母菌株表达法尼基二磷酸合酶erg20、...

【专利技术属性】
技术研发人员：王彩霞，陈士林，张悦，郝学密，侯康鑫，张烽，
申请(专利权)人：中国中医科学院中药研究所，
类型：发明
国别省市：