一种催化雷公藤乙素生物合成的酶制造技术

技术编号:46597948 阅读:0 留言:0更新日期:2025-10-10 21:30
本发明专利技术提供了一种催化雷公藤乙素生物合成酶,以及利用所述酶催化松香烷型二萜类化合物C‑2位羟化,所述酶为细胞色素P450氧化酶CYP71BE272,本发明专利技术还涉及编码所述酶的多核苷酸CYP71BE272,所述酶经催化实验证实具有催化雷公藤甲素C2位羟化形成雷公藤乙素的功能。利用酿酒酵母体系并借助简单的化合物富集分离可实现雷公藤乙素生物合成,本发明专利技术提供了绿色高效获取雷公藤乙素的方法,为缓解当前紧缺的市场需求和化合物进一步开发利用具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种松香烷型二萜天然产物雷公藤乙素的生物合成酶及雷公藤乙素的制备方法,以及该生物合成酶的编码基因,属于药用植物基因工程领域。


技术介绍

1、雷公藤乙素(tripdiolide)和雷公藤甲素(triptolide)是卫矛科植物雷公藤(tripterygium wilfordii hook.f.)的主要活性成分,具有显著的抗炎、抗肿瘤、免疫抑制等药理活性,是雷公藤多苷片和雷公藤总萜片的主要活性成分,临床常用于治疗类风湿性关节炎、慢性肾炎、红斑狼疮等难治性免疫功能亢进疾病。作为次生代谢产物,雷公藤乙素在源植物中的含量仅十万分之一,其获取仍依赖植物提取分离。然而雷公藤是多年生植物,生长周期长,获取所需雷公藤乙素易造成严重植物资源和土地资源破坏。

2、基于解析的雷公藤乙素生物合成途径,利用生物合成方式获取雷公藤乙素符合绿色环保的理念。从化学结构看,雷公藤乙素可由雷公藤甲素c-2位羟化形成,当前雷公藤甲素单体市场中获得较容易,而雷公藤乙素因产量极低无法得到。因此,挖掘雷公藤乙素生物合成中c-2位羟化酶,可实现雷公藤乙素由雷公藤甲素生物合成,在本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.分离的蛋白,所述蛋白为包含(1)SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列;或(2)SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列经取代、缺失或增加一个或多个氨基酸且功能相同的多肽。

2.编码权利要求1所述蛋白的多核苷酸。

3.表达载体,其包含启动子、权利要求2所示多核苷酸和转录终止子,其中所述启动子与所述多核苷酸可操作地连接,并且所述多核苷酸与所述转录终止子可操作地连接。

4.重组宿主细胞,其包含权利要求2所述多核苷酸分子、或权利要求3所述表达载体,所述细胞选自:细菌、酵母细胞、真菌细胞、昆虫细胞、哺乳动物细胞和植物细胞。

5.根据权利要求5所述...

【技术特征摘要】

1.分离的蛋白,所述蛋白为包含(1)seq id no:2所示的氨基酸序列;或(2)seq id no:2所示的氨基酸序列经取代、缺失或增加一个或多个氨基酸且功能相同的多肽。

2.编码权利要求1所述蛋白的多核苷酸。

3.表达载体,其包含启动子、权利要求2所示多核苷酸和转录终止子,其中所述启动子与所述多核苷酸可操作地连接,并且所述多核苷酸与所述转录终止子可操作地连接。

4.重组宿主细胞,其包含权利要求2所述多核苷酸分子、或权利要求3所述表达载体,所述细胞选自:细菌、酵母细胞、真菌细胞、昆虫细胞、哺乳动物细胞和植物细胞。

5.根据权利要求5所述的宿主细胞,其中所述酵母细胞为酿酒酵母细胞。

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【专利技术属性】
技术研发人员:黄璐琦高伟张逸风胡雅婷高杰袁仕君马林
申请(专利权)人:中国中医科学院中药研究所
类型:发明
国别省市:

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