一种用于生产帕妥珠单抗的细胞培养方法技术

本披露属于生物制药领域，其公开了一种用于生产帕妥珠单抗的细胞培养方法，解决了目前帕妥珠单抗的生物类似药存在的生产表达量低，质控差异大等问题，为该抗体的工业化生产提供了有力支持。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于抗体生产领域，具体涉及一种用于生产帕妥珠单抗的细胞培养方法。

技术介绍

1、帕妥珠单抗(商品)是一种重组人源化igg1κ单克隆抗体，由罗氏(roche)旗下基因泰克(genentech)研发，于2012年获fda批准上市，用于治疗her2阳性早期乳腺癌和转移性乳腺癌。帕妥珠单抗通过靶向her2受体的二聚化结构域(亚结构域ii)，阻断her2与其他her家族成员(如her3、her4和egfr)的生成配体依赖型异源二聚体，通过促分裂原活化蛋白(map)激酶和磷脂酰肌醇3激酶(pi3k)信号通路抑制配体启动的细胞内信号转导，抑制这些信号通路可导致细胞生长停滞和细胞凋亡。帕妥珠单抗还可介导抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(adcc)。

2、目前帕妥珠单抗的生物类似药存在生产工艺复杂，表达量低，质控不稳定等问题。针对常规单抗项目，细胞株的选择和培养基的优化是决定蛋白产量与质量的两个最重要的因素。当细胞株确定后，需根据细胞株自身特性和目标产品的质量要求，开发与之匹配的专属培养基。并通过培养工艺优化(如补料策略或灌流培养)提高表达量，同时也需要确本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种生产帕妥珠单抗的细胞培养方法，所述方法包括种子培养阶段和生产培养阶段，所述生产培养阶段包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的细胞培养方法，其中，所述的补料培养基1选自Eden F602aS或CellTurbo Feed 7A，补料培养基2为Eden F600bS；

3.根据权利要求1所述的细胞培养方法，其中所述二价锰离子来源于四水合氯化锰、硫酸锰或氯化锰；优选地，所述二价锰离子的浓度为0.03mg/L～0.07mg/L；更优选地，所述基础培养基包含0.05mg/L四水合氯化锰。

4.根据权利要求2所述的细胞培养方法，其中所述的Eden F60...

【技术特征摘要】

1.一种生产帕妥珠单抗的细胞培养方法，所述方法包括种子培养阶段和生产培养阶段，所述生产培养阶段包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的细胞培养方法，其中，所述的补料培养基1选自eden f602as或cellturbo feed 7a，补料培养基2为eden f600bs；

3.根据权利要求1所述的细胞培养方法，其中所述二价锰离子来源于四水合氯化锰、硫酸锰或氯化锰；优选地，所述二价锰离子的浓度为0.03mg/l～0.07mg/l；更优选地，所述基础培养基包含0.05mg/l四水合氯化锰。

4.根据权利要求2所述的细胞培养方法，其中所述的eden f602as中包含糖型调节剂，所述糖型调节剂为半乳糖；优选地，所述半乳糖的浓度为1.0g/l～2.0g/l；更优选地，所述半乳糖的浓度为1.464g/l。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的细胞培养方法，其中，流加补料培养基1的体积为初始培养体积的6～10％(v/v)，以及流加补料...

【专利技术属性】
技术研发人员：高栋，孙龑，焦静雨，苟金霞，罗国秀，肖婧泓，王海彬，
申请(专利权)人：杭州博之锐生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：