一种赤潮生物标准样品及其制备方法技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，尤其是涉及一种赤潮生物标准样品及其制备方法。该方法包括以下步骤：采集赤潮生物候选标准样品，通过定性分析方法，按照评判原则对候选标准样品中的候选物藻种的组成、结构、特性进行评判，确定是否满足标准样品的制备要求；将步骤S1最终获得的赤潮生物候选标准样品过滤；对筛选后的赤潮生物候选标准样品倒入分样器，得多份样品；随机抽步骤S3中的多份样品进行均匀性检验、稳定性检验和定值。该方法明确了候选标准样品的选择原则、均匀性、稳定性评价方法和定值方法，解决了样品分装过程的均匀性问题，避免对样品中种类结构的破坏，最大限度地确保样品的原始状态和均匀性。和均匀性。和均匀性。

【技术实现步骤摘要】
一种赤潮生物标准样品及其制备方法


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其是涉及一种赤潮生物标准样品及其制备方法。

技术介绍

[0002]赤潮作为一种全球性的海洋灾害，不仅严重威胁多个沿海国家的海水养殖业，而且还对人们的健康甚至生命带来影响。多数赤潮种类具有毒性，这带来了更深层次的影响。因此，及时准确地鉴定赤潮生物种类，确定是否具备毒性，是采取有效应对措施的先决条件。
[0003]形态分类法是最传统和直接的赤潮分类鉴定方法，也是目前赤潮监测和预警业务化分析方法。这种分类鉴定方法主要以形态学特征为基础，由监测人员借助光学显微镜对赤潮生物进行鉴别。因此，监测人员的技术能力水平直接影响了赤潮鉴定结果的准确性，进而影响了赤潮监测、预警乃至后续的治理，如何客观地评价检测人员的技术水平是目前整个海洋行业面临的问题。
[0004]但是目前赤潮生物监测人员技术水平差别较大，同时缺乏赤潮生物鉴定较有效的质控手段，这严重制约了管理部门和监测机构对监测能力和监测数据的评价。
[0005]标准样品是具有准确量值的测量标准，它在化学测量、生物测量、工程测量与物理测量领域得到了广泛的应用。赤潮生物标准样品作为赤潮种类和数量已知的物质，可以用来研究和评价赤潮鉴定方法和监测人员鉴定能力，从而判断该方法或人员能力的准确度和重复性。但目前在海洋行业普遍缺乏包括赤潮生物在内的海洋生物鉴定类的标准样品及其制备方法。
[0006]因此，建立一个科学合理的赤潮生物标准样品的制备方法，并据此生产赤潮生物标准样品，将有助于管理部门和监测机构对赤潮监测能力和监测数据的评价，进而促进赤潮鉴定能力的进一步提升，从而更好地应对赤潮危害。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种赤潮生物标准样品及其制备方法。本专利技术依据现行的标准样品制备原则，提出了一种赤潮生物标准样品的制备方法，为量化评价赤潮生物检测人员的鉴定能力水平创造条件。
[0008]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：
[0009]本专利技术提供了一种赤潮生物标准样品的制备方法，包括以下步骤：
[0010]S1、采集赤潮生物候选标准样品，通过定性分析方法，按照评判原则对候选标准样品中的候选物藻种的组成、结构、特性进行评判，确定是否满足标准样品的制备要求；
[0011]S2、将步骤S1最终获得的赤潮生物候选标准样品过滤；
[0012]S3、对筛选后的赤潮生物候选标准样品倒入分样器，得多份样品；
[0013]S4、随机抽步骤S3中的多份样品进行均匀性检验、稳定性检验和定值。
[0014]人工培养的赤潮藻株与野生藻株(检测人员分析所接触的实际样品)在形态学上
具有明显差别，培养藻株不适合作为候选标准样品，因此需要采集自然样品(即野生藻株)作为本专利技术的赤潮生物候选标准样品。
[0015]但将野生藻株作为赤潮生物候选标准样品则面临三个较突出的问题，一是野外采集的样品中存在不同种类的野生藻株，如何确定野生藻株的种类，二是如何确定这些种类的数量，并给出测量不确定度，三是野外采集的样品中不同种类的数量级差别大，必然存在一些数量极少的种类，不管如何分装，必然影响这些种类在最小包装单元的标准物质样品的数量。
[0016]野外采集的候选样品不仅包含赤潮生物，还包含其他类型的生物和杂质，是一个综合样品，并且除赤潮生物外的这些生物和杂质对标准样品制备、分析和保存会产生影响。
[0017]本专利技术的专利技术人经过大量研究及试验发现，提供一种赤潮生物标准样品的制备方法，包括赤潮生物候选标准样品的采集、定性分析、去除杂质、混合、分装、均匀性检验、稳定性检验和定值，明确了候选标准样品的选择原则、均匀性、稳定性评价方法和定值方法，解决了样品分装过程的均匀性问题，避免对样品中种类结构的破坏，最大限度地确保样品的原始状态和均匀性。
[0018]本专利技术采用孔径约500μm的过滤器过滤步骤S1最终获得的赤潮生物候选标准样品可以在不损坏野生藻种结构的基础上去除大型浮游生物和其他杂质。
[0019]本专利技术还关注标准样品保存过程中藻种形态和细胞结构的变化，避免了标准样品在使用过程中产生其他衍生问题。
[0020]作为本专利技术所述赤潮生物标准样品的制备方法的优选实施方式，所述评判原则为候选标准样品的主要种类是否有形态分类上争议、藻种的组成是否合理、分装是否会破坏藻种结构及是否保存要求。
[0021]优选地，定性分析方法为种类定性分析方法，更优选地，按照《海洋监测规范第7部分：近海污染生态调查与生物监测》(GB 17378.7
‑
2007)浮游植物样品的处理与分析的要求，进行种类定性分析。
[0022]作为本专利技术所述赤潮生物标准样品的制备方法的优选实施方式，按照《赤潮监测技术规程》(HY/T 069
‑
2005)采集赤潮生物候选标准样品。
[0023]作为本专利技术所述赤潮生物标准样品的制备方法的优选实施方式，所述过滤器为柔性过滤器，柔性过滤器优选为筛绢。
[0024]作为本专利技术所述赤潮生物标准样品的制备方法的优选实施方式，所述方法还包括一种混合原则，对于特别用途或目的的赤潮生物标准样品的制备，选取多个单种类赤潮生物候选标准样品进行混合，但要考虑混合对种类结构、密度产生的影响，同属种类容易产生混淆的种类不混合。在一些实施例中，混合是为了一些特殊目的，实现多种目标藻种在一个标准样品中存在。
[0025]作为本专利技术所述赤潮生物标准样品的制备方法的优选实施方式，所述分样器包括圆柱形的分样器壳体和管状分离器，所述分样器壳体的内部可活动的套接有所述分离器，所述分样器壳体的内部设置有与所述分离器的内径相契合的圆台，所述圆台四周的分样器壳体上环向等间距的设置有12个分样口，能够实现1分2、1分3、1分4、1分6、1分12的分样形式，分样器壳体的底座装有磁力搅拌装置、水平仪和水平调节装置。
[0026]所述分样器为ZL 202122013100.6公开的浮游生物分样器。
[0027]传统的采用移液枪来分装样品的方式会严重影响样品的均匀性，采用本专利技术的分样器对筛选后的赤潮生物候选标准样品进行分装，既保证了赤潮藻类结构，又保证样品的均匀性，解决了样品分装过程的均匀性问题。
[0028]作为本专利技术所述赤潮生物标准样品的制备方法的优选实施方式，随机抽步骤S3中的多份样品进行分析，将获得的细胞数量进行对数转换后，采用单因子方差分析法或SS≤0.3σ准则进行均匀性检验。
[0029]本专利技术通过对显著优势种类细胞数量或样品总细胞数量进行均匀性检验，降低了标准样品制备难度，但又不影响样品的制备效果。
[0030]作为本专利技术所述赤潮生物标准样品的制备方法的优选实施方式，随机抽步骤S3中的多份样品进行分析，将获得的细胞数量进行对数转换后，采用t检验法或准则法进行稳定性检验。
[0031]稳定性检验可以通过检验藻种形态、结构及数量来本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种赤潮生物标准样品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、采集赤潮生物候选标准样品，通过定性分析方法，按照评判原则对候选标准样品中的候选物藻种的组成、结构、特性进行评判，确定是否满足标准样品的制备要求；S2、将步骤S1最终获得的赤潮生物候选标准样品过滤；S3、对筛选后的赤潮生物候选标准样品倒入分样器，得多份样品；S4、随机抽步骤S3中的多份样品进行均匀性检验、稳定性检验和定值。2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述评判原则为候选标准样品的主要种类是否有形态分类上争议、藻种的组成是否合理、分装是否会破坏藻种结构及是否保存要求。3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，按照《赤潮监测技术规程》(HY/T 069
‑
2005)采集赤潮生物候选标准样品。4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述过滤器为柔性过滤器，柔性过滤器优选为筛绢。5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述方法还包括一种混合原则，对于特别用途或目的的赤潮生物标准样品的制备，选取多个赤潮生物候选标准样品进行混合，但要考虑混合对种类结构、密度产生的影响...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖瑜璋，易斌，陈斌，董燕红，王亚涛，于惠莉，王欣睿，杨振雄，陈凯彪，郑承志，庄泽彬，贾后磊，上官茂森，姜重臣，吴梅桂，黄颖华，钟煜宏，田秀蕾，刘梦南，江志华，胡希声，
申请(专利权)人：国家海洋局南海环境监测中心中国海监南海区检验鉴定中心，
类型：发明
国别省市：