用于检测Sf9细胞DNA片段大小分布的引物对及检测方法技术

技术编号:37059513 阅读:28 留言:0更新日期:2023-03-29 19:36
本发明专利技术涉及生物检测领域,尤其涉及用于检测Sf9细胞DNA片段大小分布的引物对及检测方法。所述引物对至少包含4组引物对;各引物对中的正向引物和反向引物分别特异性结合于Sf9细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示区段;各组引物对扩增获得的扩增产物的长度分别为100bp以下、100

【技术实现步骤摘要】
用于检测Sf9细胞DNA片段大小分布的引物对及检测方法


[0001]本专利技术涉及生物检测领域,尤其涉及用于检测Sf9细胞DNA片段大小分布的引物对及检测方法。

技术介绍

[0002]在基因治疗领域,人胚胎肾细胞(HEK293)和杆状病毒表达载体(Baculovirus expression vectors,BEVs)/草地贪夜蛾卵巢细胞(Spodoptera frugiperda cell,Sf9)表达系统(BEV

Sf9)是用于生产基因治疗生物制品最主要的两个表达系统。尽管使用HEK293是该行业金标准,但由于哺乳动物需贴壁生长导致放大生产困难。
[0003]昆虫细胞是新兴的生物制品生产基质,其中BEV

Sf9是最常用的昆虫细胞表达系统,该系统是以杆状病毒作为外源基因载体,以昆虫细胞作为宿主进行基因组自我扩增与目的蛋白表达。相较于HEK293,Sf9昆虫细胞可以在大规模反应器中高密度悬浮培养,而杆状病毒对于哺乳动物和植物是非致病性的,所以BEV

Sf9表达系统具有易于规模化本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于检测Sf9细胞DNA片段大小分布的引物对,其特征在于,至少包含4组引物对;其中:各引物对中的正向引物和反向引物分别特异性结合于Sf9细胞基因组DNA 上SEQ ID NO:1所示区段;各组引物对扩增获得的扩增产物的长度分别为100bp以下、100

199bp、200

499bp以及499bp以上。2.根据权利要求1所述用于检测Sf9细胞DNA片段大小分布的引物对,其特征在于,所述引物对选自以下引物对:第一引物对,其中的正向引物结合于Sf9细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第241

280位;所述反向引物结合于Sf9细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第308

347位,并且所述引物对所扩增获得的扩增产物的长度为77

97bp;第二引物对,其中的正向引物结合于Sf9细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第210

247位;所述反向引物结合于Sf9细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第308

347位,并且所述引物对所扩增获得的扩增产物的长度为108

128bp;第三引物对,其中的正向引物结合于Sf9细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第238

279位;所述反向引物结合于Sf9细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第442

482位,并且所述引物对所扩增获得的扩增产物的长度为215

235bp;第四引物对,其中的正向引物结合于Sf9细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第2

38位;所述反向引物结合于Sf9细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第479

520位,并且所述引物对所扩增获得的扩增产物的长度为490

510bp。3.根据权利要求1或2所述用于检测Sf9细胞DNA片段大小分布的引物对,其特征在于,所述引物对选自以下引物对:第一引物对,其中的正向引物结合于Sf9细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第251

270位;所述反向引物结合于Sf9细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第318

337位,并且所述引物对所扩增获得的扩增产物的长度为87bp;第...

【专利技术属性】
技术研发人员:吴婉欣杨志行袁小铃詹蓉
申请(专利权)人:湖州申科生物技术股份有限公司
类型:发明
国别省市:

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