一种外用跌打止痛膏的定量检测方法技术

本发明专利技术涉及一种外用跌打止痛膏的定量检测方法，所述检测方法通过合适的前处理方法对供试品进行处理，可有效将外用跌打止痛膏中的橡胶等杂质高效洗脱分离，从而更好地保护液相色谱柱，对色谱柱耐用性好，大大减少检验成本。同时对其有效成分栀子苷的检测方法中检测色谱条件等进行进一系列地研究优化，有效地实现了采用高效液相色谱法对外用跌打止痛膏中栀子苷定量检测，提出了一种专属性强并能够定量检测外用跌打止痛膏的方法，该方法检测准确度好、灵敏度高，检测结果峰型好，杂质少。从而能够更好地实现外用跌打止痛膏的质量控制，有利于药品安全性。于药品安全性。

【技术实现步骤摘要】
一种外用跌打止痛膏的定量检测方法


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，特别是涉及一种外用跌打止痛膏的定量检测方法。

技术介绍

[0002]外用跌打止痛膏为中药复方制剂，处方中主要成分包括：土鳖虫、续断、防风、龙骨、马钱子、血竭、栀子、蒲公英、黄芩、金银花、虎杖、大黄、没药、儿茶、红花、紫花地丁、芙蓉、骨碎补、薄荷脑、水杨酸甲酯、冰片、樟脑共22味药，功能主治：促进骨质愈合，活血化瘀，消肿，止痛。
[0003]作为一种重要的中药复方制剂，外用跌打止痛膏质量检测非常重要。但是目前对外用跌打止痛膏的质量检测标准仅为载于国家食品药品监督管理总局国家药品标准WS3
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B
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3796
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2016，并且该标准中仅有[性状]、[鉴别]、[挥发油]的项目检查，没有含量测定项。加之外用跌打止痛膏作为一种橡胶膏剂，其组成成分复杂，黏性大，难于分离和质量控制，特别是由于其含有大量的橡胶基质，该橡胶基质由橡胶、脂松香、凡士林、液体石蜡等物质组成，用常规的提取方法对其有效成分提取难度大，目前还不存在以其某有效成分含量对其进行质量控制的方案。
[0004]因此，亟待提供一种能够针对外用跌打止痛膏进行定量检测的方法。
[0005]基于此，专利技术人前期研究发现，君药龙骨、土鳖虫和臣药没药均无可进行有效成分检测的含量测定项，在对臣药红花的含量测定方法进行研究时发现，在对红花中的山奈素进行了含量测定的预试验时，试验结果也未能检测出山奈素。进而对处方中佐药儿茶进行含量测定进行研究发现，在测定儿茶素和表儿茶素含量时，试验结果中，成品中儿茶素的含量较高，但表儿茶素的含量很低，可能是二者在本品制备或在供试品溶液制备的过程中转化，在供试品的制备与浓度方面不能二者兼顾，且此方法的流动相不够稳定，故成品中儿茶的含量测定也无法作为能够定量检测外用跌打止痛膏的方法。

技术实现思路

[0006]基于此，本专利技术的目的之一在于提供一种外用跌打止痛膏的定量检测方法。
[0007]包括如下技术方案：
[0008]一种外用跌打止痛膏的定量检测方法，采用高效液相色谱法对经前处理得到的外用跌打止痛膏供试品溶液进行检测；
[0009]所述外用跌打止痛膏的前处理为：取外用跌打止痛膏，除去盖衬、剪成条状、混匀后，得到混匀后的外用跌打止痛膏，加入乙醇提取，加热回流处理60min～180min，用乙醇补足减失的重量，摇匀，过滤，得到续滤液。
[0010]本专利技术为了找到一种能够定量检测外用跌打止痛膏的方法，经过对外用跌打止痛膏中的多种成分进行检测并根据外用跌打止痛膏的剂型特点，发现在外用跌打止痛膏的供试品溶液制备中，采用合适的前处理方法对供试品进行处理，可以有效将外用跌打止痛膏中的橡胶等杂质高效洗脱分离，从而更好地保护液相色谱柱，对色谱柱耐用性好；而且，发
明人发现，当采用乙腈
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水(11∶89)时，供试品溶液色谱图中栀子苷峰与杂质峰可以很好的分离，当整个检测方法，有序地配合，从而有效地实现了采用高效液相色谱法对外用跌打止痛膏中栀子苷定量检测，达到了专属性强并能够定量检测外用跌打止痛膏的方法。
附图说明
[0011]图1为实施例3中采用I号色谱柱进行高效液相检测的结果图，其中A为栀子苷对照品，B为供试品(批号：XC006)，C为缺栀子的阴性对照品。
[0012]图2为实施例3中采用II号色谱柱进行高效液相检测的结果图，其中A为栀子苷对照品，B为供试品(批号：XC006)，C为缺栀子的阴性对照品。
[0013]图3为实施例3中采用III号色谱柱进行高效液相检测的结果图，其中A为栀子苷对照品，B为供试品(批号：XC006)，C为缺栀子的阴性对照品。
[0014]图4为实施例4中采用本专利技术实施例1的检测方法进行专属性验证检测结果，其中A为栀子苷对照品，B为供试品(批号：XC006)，C为缺栀子的阴性对照品。
[0015]图5为实施例4中采用本专利技术实施例1的检测方法进行线性检测结果标准曲线图。
[0016]图6为按照实施例1的检测方法，当乙腈
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水的比例为15∶85时的检测结果。
[0017]图7为实施例2中不同洗脱溶剂的对比结果示意图，其中，1是栀子苷对照溶液，2是供试液1、3是供试液2、4是供试液3、5是供试液4。
具体实施方式
[0018]下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，例如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册(New York:Cold Spring Harbor Laboratory Press,1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。实施例中所用到的各种常用化学试剂，均为市售产品。
[0019]除非另有定义，本专利技术所使用的所有的技术和科学术语与属于本专利技术的
的技术人员通常理解的含义相同。本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不用于限制本专利技术。本专利技术所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
[0020]在整个说明书和权利要求书中，以下术语具有与本文明确相关的含义，除非上下文另有明确规定。在本专利技术中使用的短语“在一个实施方案中”不一定指代相同的实施方案，尽管其可能是。此外，在本专利技术中使用的短语“在另一实施方案中”不一定指代不同的实施方案，尽管其可能是。因此，如下所述，可以容易地组合本专利技术的各个实施方案，而不脱离本专利技术的范围或精神。
[0021]本专利技术的技术人员在深入研究外用跌打止痛膏的检测方法时，发现紧紧围绕着栀子苷的回收率做对供试品溶液制备优化和色谱条件优化时，获得的方法检测准确度好、灵敏度高，检测结果峰型好，杂质少，能够更好地实现外用跌打止痛膏的质量控制，有利于药品安全性。
[0022]本专利技术的一些实施例提供了一种外用跌打止痛膏的定量检测方法，其采用高效液相色谱法对经前处理得到的外用跌打止痛膏供试品溶液进行检测；所述外用跌打止痛膏的前处理为：取外用跌打止痛膏，除去盖衬、剪成条状、混匀后，加入提取液提取，过滤，得到续
滤液。所述提取液包括乙醇，所述提取方式为将外用跌打止痛膏进行加热回流处理30min～300min，更优选为，60min～180min。
[0023]该检测方法专属性好，灵敏度高，能更好地实现外用跌打止痛膏的质量控制，有利于药品安全性。
[0024]在其中一些实施例中，上述续滤液的制备步骤为制：取外用跌打止痛膏数片，除去盖衬、剪成条状、混匀，精密称定，作为供试品；加入精密称定的乙醇，经加热回流后，取出放冷，并用乙醇补足减失的重量，摇匀，用干燥滤纸滤过，即得。
[0025]在其中一些实施例中，上述外用跌打止痛膏是指适用于促进骨质愈合，活血化瘀，消炎，消肿，止痛。用于闭合性骨折，扭挫伤等骨科病症及风湿关节炎的外用膏药，进一步地，指含有栀子苷作为药效成分的外用膏药，优选为五羊牌跌打止痛膏。<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种外用跌打止痛膏的定量检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱法对经前处理得到的外用跌打止痛膏供试品溶液进行检测；所述外用跌打止痛膏的前处理为：取外用跌打止痛膏，除去盖衬、剪成条状、混匀后，得到混匀后的外用跌打止痛膏，加入乙醇提取，加热回流处理60min～180min，用乙醇补足减失的重量，摇匀，过滤，得到续滤液。2.根据权利要求1所述定量检测方法，其特征在于，加入的乙醇与混匀后的外用跌打止痛膏的比例为50ml：2g
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3g，优选为50ml：2.g—2.6g，更优选为50ml：2.5g。3.根据权利要求1所述定量检测方法，其特征在于，使用乙醇对外用跌打止痛膏进行加热回流处理90min～140min。4.根据权利要求1所述定量检测方法，其特征在于，所述外用跌打止痛膏供试品溶液的制备还包括通过氧化铝柱富集纯化。5.根据权利要求4所述定量检测方法，其特征在于，所述氧化铝柱富集纯化包括：将续滤液10ml上样于氧化铝层析柱中，用乙醚25
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35ml、乙醇45
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55ml、20
±
1％乙醇45
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55ml依次洗脱，收集20
±
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【专利技术属性】
技术研发人员：罗双辉，吴志红，孙秀玲，陈贤安，陈溪，黄芷茵，
申请(专利权)人：广州白云山医药集团股份有限公司白云山何济公制药厂，
类型：发明
国别省市：