靶向性γδT细胞及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种γδT细胞及其制备方法和应用，靶向性γδT细胞的制备方法包括如下步骤：提供总γδT细胞，用第一液体培养基重悬所述总γδT细胞，得到总γδT细胞悬液；按照体积百分比向所述总γδT细胞悬液中添加8％～12％的灭活血浆，接着送入CO2培养箱中进行细胞培养；细胞培养3天～7天后加入混合多肽抗原和20μg/mL～200μg/mL的DU145细胞裂解物抗原；继续培养2天～10天后，得到所需要的靶向性γδT细胞。结合测试例，本发明专利技术的靶向性γδT细胞的制备方法制得的靶向性γδT细胞对于泌尿及男性生殖系统肿瘤细胞具有靶向杀伤活性，并且本发明专利技术的靶向性γδT细胞的制备方法可以大量制备靶向性γδT细胞。可以大量制备靶向性γδT细胞。可以大量制备靶向性γδT细胞。

【技术实现步骤摘要】
靶向性
γδ
T细胞及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其是涉及一种靶向性γδT细胞及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]泌尿及男性生殖系统肿瘤是泌尿外科最常见的疾病，其发病率和死亡率有逐年增长趋势。泌尿及男性生殖系统各部位均可发生肿瘤，最常见的是膀胱癌、肾癌和前列腺癌等。随着我国生活水平的提高、习惯的改变、社会的老龄化及环境污染等因素，前列腺癌发病率明显增长。目前对这些肿瘤尚缺少确实可行的预防手段，治疗仍以手术为主。一旦发现较晚或术后复发将很难治疗。因此，开发新型有效的泌尿系统肿瘤防治技术是促进社会进步的迫切需求。
[0003]γδT细胞是一种既能杀伤癌细胞、肿瘤干细胞，又能识别癌抗原的免疫细胞，是介于天然免疫和获得性免疫之间的特殊免疫类型的细胞，具有抗原特异性识别功能而无MHC限制性。γδT细胞主要分布于皮肤和黏膜组织，一般不超过T细胞总数的5％。当机体受到病毒或者肿瘤细胞的侵袭时，γδT细胞起到第一道防线作业而进行免疫监视。但是由于γδT细胞在外周血和肿瘤组织中含量和杀伤特异性并不高本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种靶向性γδT细胞的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一、提供总γδT细胞，用第一液体培养基重悬所述总γδT细胞，得到总γδT细胞悬液，所述第一液体培养基为含有0.5μg/mL～5μg/mL的磷酸抗原、50U/mL～500U/mL的rhIL
‑
2因子和5ng/mL～20ng/mL的rhIL
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21的细胞培养基；步骤二、按照体积百分比向所述总γδT细胞悬液中添加8％～12％的灭活血浆，接着送入CO2培养箱中进行细胞培养；步骤三、细胞培养3天～7天后加入终浓度为5μg/L
×
106个～20μg/L
×
106个细胞的混合多肽抗原和终浓度为20μg/mL～200μg/mL的DU145细胞裂解物抗原；步骤四、继续培养2天～10天后，得到所需要的靶向性γδT细胞。2.根据权利要求1所述的靶向性γδT细胞的制备方法，其特征在于，所述提供总γδT细胞的操作为：采集健康人或前列腺癌患者的外周血，依次通过密度梯度离心法和免疫磁珠分选法，得到所述总γδT细胞。3.根据权利要求2所述的靶向性γδT细胞的制备方法，其特征在于，所述混合多肽为PSMA抗原肽，所述混合多肽选自第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的至少一种；所述第一多肽具有如SEQ ID NO.1所示序列，所述第二多肽具有如SEQ ID NO.2所示序列，所述第三多肽具有如SEQ ID NO.3所示序列，所述第四多肽具有如SEQ ID NO.4所示序列，所述第五多肽具有如SEQ ID NO.5所示序列。4.根据权利要求3所述的靶向性γδT细胞的制备方法，其特征在于，所述混合多肽...

【专利技术属性】
技术研发人员：王宇环，罗晓玲，
申请(专利权)人：深圳市合一康生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：