一种鉴别胃癌前病变和胃癌及诊断胃癌的试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种鉴别胃癌前病变和胃癌及诊断胃癌的试剂盒。本发明专利技术基于由RP11

【技术实现步骤摘要】
一种鉴别胃癌前病变和胃癌及诊断胃癌的试剂盒


[0001]本专利技术属于生物医药
更具体地，涉及一种鉴别胃癌前病变和胃癌及诊断胃癌的试剂盒。

技术介绍

[0002]随着群众卫生意识的增强和社会医疗条件的提高，近年来胃癌的发生率总体有所下降，但其死亡率仍居高不下，其中的一个原因在于群众对胃癌的早筛意识不强或不愿通过胃镜等有创检查手段进行筛查。此外，胃癌是一个多步骤癌变的过程，其从正常胃黏膜上皮发展成胃癌的过程中会出现慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、胃溃疡、胃息肉等表现，这些都是胃癌前病变的范畴。但目前可用于鉴别胃癌前病变和胃癌的标志物并不多，缺乏无创鉴别胃癌前病变和胃癌的方法，且胃癌前病变和胃癌早期的病症表现差别不明显，致使大多数患者早期不重视，没有针对胃癌早期进行正确的治疗，等到确诊时已是进展期胃癌，而进展期胃癌患者的治疗效果不佳。因此，提供可鉴别胃癌前病变和胃癌，以及可进行胃癌早期诊断的标志物具有重要价值，有利于胃癌的早筛查以及患者的正确治疗。
[0003]液体活检是一种非侵入性的检测手段，可以通过对血液及其他体液中的循环肿瘤细胞、循环游离肿瘤DNA、循环游离肿瘤RNA和细胞外囊泡等对癌症进行早期发现和治疗分层。外泌体是细胞(包括癌细胞)释放到周围生物液体中的小泡，其具有拷贝数多、更易检测的优势；同时，外泌体在血浆和尿液等生物液体中非常稳定，即使在疾病的早期阶段也可以分离出来进行临床评估。因此，以外泌体为基础的生物标志物已迅速应用于临床领域，可通过检测外泌体中所含有肿瘤衍生物质，如DNA、RNA(包括长链非编码RNA(lncRNA)和环状RNA(circRNA))、蛋白质和脂质进行癌症诊断。
[0004]现已公开的以外泌体为基础的胃癌生物标志物中，长链非编码RNA和环状RNA均有，但是鲜有将两者结合起来对胃癌进行判断的报道。且多数胃癌生物标志物仅能用于诊断受试者是否已经患有胃癌，对于如何区分早期胃癌和正常人、胃癌和胃癌前病变的研究不够深入，不利于患者的正确治疗。

技术实现思路

[0005]本专利技术要解决的技术问题是如何丰富可用于胃癌前病变及胃癌早期诊断的生物标志物，提供一种用于诊断胃癌或用于鉴别胃癌和胃癌前病变的试剂盒。
[0006]本专利技术的第一个目的是提供一种用于鉴别胃癌前病变和胃癌或用于胃癌诊断的标志物组合。
[0007]本专利技术的第二个目的是提供检测所述标志物组合表达量的试剂在制备用于胃癌诊断的产品中的应用。
[0008]本专利技术的第三个目的是提供检测所述标志物组合表达量的试剂在制备用于鉴别胃癌和胃癌前病变的产品中的应用。
[0009]本专利技术的第四个目的是提供一种鉴别胃癌前病变和胃癌及诊断胃癌的试剂盒。
[0010]本专利技术的第五个目的是提供一种鉴别胃癌前病变和胃癌及诊断胃癌的的综合诊断模型。
[0011]本专利技术的第六个目的是提供一种鉴别胃癌前病变和胃癌及诊断胃癌的的综合诊断系统。
[0012]本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：
[0013]本专利技术提供了一种用于鉴别胃癌前病变和胃癌或用于胃癌诊断的标志物组合，包括7个lncRNA和1个circRNA。
[0014]具体地，所述标志物组合由RP11
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556O9.4、RP11
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417E7.1、RPS3AP23、RP11
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559M23.1、CTD
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2339L15.3、DGCR9、LINC00567和hsa_circ_0047880组成，其cDNA序列依次如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.8所示；其中，RP11
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556O9.4、RP11
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417E7.1、RPS3AP23、RP11
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559M23.1、CTD
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2339L15.3、DGCR9和LINC00567为lncRNA，hsa_circ_0047880为circRNA。
[0015]本专利技术通过分别检测胃癌患者和健康人血清外泌体，以及胃癌组织和癌旁组织中的标志物组合，即通过检测上述样本中的RP11
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556O9.4、RP11
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417E7.1、RPS3AP23、RP11
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559M23.1、CTD
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2339L15.3、DGCR9、LINC00567和hsa_circ_0047880的表达量并进行对比发现，上述标志物在胃癌患者血清外泌体中的表达量显著高于健康人，在胃癌组织中的表达量也显著高于癌旁组织。
[0016]同时，本专利技术以所述标志物组合，即以RP11
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556O9.4、RP11
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417E7.1、RPS3AP23、RP11
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559M23.1、CTD
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2339L15.3、DGCR9、LINC00567和hsa_circ_0047880为目标标志物建立了一个综合诊断模型，对所述模型的诊断效能进行分析发现，利用该模型可诊断胃癌，将胃癌患者与健康人区分开；即使是受试者处于胃癌早期阶段，也可以将其与健康人区分开，表明可通过检测本专利技术所述标志物组合的表达量进行胃癌诊断，进行胃癌的早期大规模筛查。除用于诊断胃癌外，本专利技术还发现利用所述综合诊断模型可鉴别胃癌和胃癌前病变。
[0017]因此，本专利技术请求保护检测所述标志物组合表达量的试剂在制备用于胃癌诊断的产品中的应用。
[0018]本专利技术还请求保护检测所述标志物组合表达量的试剂在制备用于鉴别胃癌和胃癌前病变的产品中的应用。
[0019]具体地，所述标志物组合为RP11
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556O9.4、RP11
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417E7.1、RPS3AP23、RP11
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559M23.1、CTD
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2339L15.3、DGCR9、LINC00567和hsa_circ_0047880。
[0020]在所述标志物组合的基础上，本专利技术还提供了一种鉴别胃癌前病变和胃癌及诊断胃癌的试剂盒，所述试剂盒中含有检测所述标志物组合表达量的试剂。
[0021]在本专利技术所公开的所述标志物组合的序列的基础上，可通过荧光定量PCR等方法对其进行定量检测。
[0022]具体地，本专利技术所述试剂盒中含有检测所述标志物组合表达量的荧光定量PCR引物。
[0023]作为一种可选择的实施方式，所述用于检测RP11
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556O9.4的荧光定量PCR引物的序列如SEQ ID NO.9～10所示；用于检测RP11
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417E7.1的荧光定量PCR引物的序列如SEQ ID NO.11～12所示；用于检测RPS3AP23的荧光定量PCR引物的序列如SEQ ID NO.13～14所示；用于检测RP11
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559M23.1的荧光定量PCR引物的序列如SEQ ID NO.15～16所示；用本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于鉴别胃癌和胃癌前病变或用于胃癌诊断的标志物组合，其特征在于，所述标志物组合由RP11
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556O9.4、RP11
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417E7.1、RPS3AP23、RP11
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559M23.1、CTD
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2339L15.3、DGCR9、LINC00567和hsa_circ_0047880组成。2.检测权利要求1所述标志物组合表达量的试剂在制备用于胃癌诊断的产品中的应用。3.检测权利要求1所述标志物组合表达量的试剂在制备用于鉴别胃癌和胃癌前病变的产品中的应用。4.一种鉴别胃癌前病变和胃癌及诊断胃癌的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中含有检测权利要求1所述标志物组合表达量的试剂。5.根据权利要求4所述试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中含有检测权利要求1所述标志物组合表达量的荧光定量PCR引物。6.根据权利要求5所述试剂盒，其特征在于，所述用于检测RP11
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556O9.4的荧光定量PCR引物的序列如SEQ ID NO.9～10所示；用于检测RP11
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417E7.1的荧光定量PCR引物的序列如SEQ ID NO.11～12所示；用于检测RPS3AP23的荧光定量PCR引物的序列如SEQ ID NO.13～14所示；用于检测RP11
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559M23.1的荧光定量PCR引物的序列如SEQ ID NO.15～16所示；用于检测CTD
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2339L15.3的荧光定量PCR引物的序列如SEQ ID NO.17～18所示；用于检测DGCR9的荧光定量PCR引物的序列如SEQ ID NO.19～20所示；用于检测LINC00567的荧光定量PCR引物的序列如SEQ ID NO.21～22所示；用于检测hsa_circ_0047880的荧光定量PCR引物的序列如SEQ ID NO.23～24所示。7.一种鉴别胃癌前病变和胃癌及诊断胃癌的综合诊断模型，其特征在于，所述模型是以权利要求1所述标志物组合为目标标志物。8.根据权利要求7所述综合诊断模型，其特征在于，所述模型采用如下方程式计算综合诊断指数，即cd
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score：cd
‑
score＝
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2.31858+0.11316*has_circ_47880表达量+3.15386*DGCR9表达量+1.485...

【专利技术属性】
技术研发人员：鞠怀强，蔡泽荣，郑永强，
申请(专利权)人：中山大学肿瘤防治中心中山大学附属肿瘤医院，中山大学肿瘤研究所，
类型：发明
国别省市：