用于治疗TDP-43蛋白病的组合物和方法技术

公开了一类新型融合蛋白来募集细胞的先天伴侣机制，特别是Hsp70介导的系统，以特异性减少TDP

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗TDP
‑
43蛋白病的组合物和方法
[0001]相关申请的交叉引用本申请根据35 U.S.C.
ꢀ§ꢀ
119 (e)要求于2020年4月28日提交的美国临时专利申请63/016,707，以及于2020年6月5日提交的美国临时专利申请63/035,437的优先权。上述申请的全部内容在此通过引用以其整体并入。

技术介绍

[0002]细胞内表达的所有蛋白质都需要正确折叠成其预期结构，以便正常发挥功能。越来越多的疾病和病症显示与蛋白质的不适当折叠和/或蛋白质和脂蛋白以及传染性蛋白质物质的不适当沉积和聚集相关。也称为构象疾病或蛋白质构象病，由错误折叠引起的疾病的实例包括阿尔茨海默氏病(AD)、肌萎缩侧索硬化(ALS)和额颞叶痴呆(FTLD)。突变蛋白在细胞中聚集，导致典型的细胞毒性细胞包涵体。
[0003]各种各样的神经退行性疾病的病理学特征在于由淀粉样原纤维构成的细胞内或细胞外蛋白质聚集物的积累(Forman等人，(2004) Nat Med. 10:1055
–
1063)。例如，阿尔茨海默氏病(AD)的病理学通过分别由β
‑
淀粉样蛋白和微管相关蛋白tau构成的老年斑和神经原纤维缠结进行限定，而由α
‑
突触核蛋白构成的路易体是帕金森病的定义疾病的病变。直到最近，具有泛素包涵体的额颞叶变性(FTLD
‑
U) (Kumar
‑
Singh & Van (2007) Brain Pathol.，17:104
–
114) (与FTLD综合征相关的最常见表型)以及肌萎缩侧索硬化(ALS) (Xiao等人，(2006) Biochim Biophys Acta，1762:1001
–
1012)两者的神经病理学通过非淀粉样蛋白原性泛素化包涵体(UBI)进行定义。
[0004]FTLD，第二常见的早老性痴呆形式，指具有共同的行为和/或语言功能障碍的一组异质性神经退行性病症(Kumar
‑
Singh & Van，同上)。一些受累个体表现出运动障碍，例如帕金森症或运动神经元病(MND)。虽然指名FTLD反映了突出的额叶和颞叶退化，但在这些患者中鉴定了多重神经病理学异常(Cairns等人，(2007) Acta Neuropathol.，1145:5
–
22)。FTLD的两大病理学细分是公认的：具有tau阳性包涵体的脑(即tau蛋白病)，以及具有未被针对tau、α
‑
突触核蛋白和β
‑
淀粉样蛋白的抗体检测到的UBI的脑(即FTLD
‑
U)。高达40%的FTLD显示了家族遗传模式，具有与FTLD
‑
U病理学相关的三种不同遗传异常，包括颗粒蛋白前体(PGRN)和含缬酪肽蛋白(VCP)中的突变、以及与染色体9p上的新型基因座的连锁。
[0005]肌萎缩侧索硬化(ALS)，也称为运动神经元病或卢伽雷氏病，是一种神经退行性疾病，其特征在于脑干和脊髓中的上下运动神经元的进行性退化，导致进行性肌萎缩和无力(Al
‑
Chalabi等人，(2016) Amyotrophic lateral sclerosis.，15 (11):1182
‑
1194；Robberecht & Philips，(2013) Nat Rev Neurosci.，14 (4):248
‑
264；Talbot等人，(2018) Nucleic Acids Res.，37 (8):e64)。ALS具有对于54
‑
67岁的中位发病年龄，每100,000人约5.4例的中位患病率，其中与女性相比，男性处于略微更高的风险中(Chio等人，(2009) Amyotroph Lateral Scler.，10 (5
‑
6):310
‑
323；Chio等人，(2013) Neuroepidemiology，41 (2):118
‑
130；McCombe & Henderson，(2010) Gend Med.，7 (6):557
‑
570)。ALS是一种破坏性的神经退行性疾病，没有任何有效的治疗，并且患者通常在发
病后2
‑
4年内死亡，主要是由于呼吸衰竭和吞咽问题(Chio等人，(2009) Amyotroph Lateral Scler.，10 (5
‑
6):310
‑
323；del Aguila等人，(2003) Neurology，60 (5):813
‑
819；Tabata等人，(2009) Nucleic Acids Res.，7 (8):e64)。
[0006]大多数ALS病例是原因不明散发性的(sALS)，而仅~10%的病例涉及称为家族性ALS (fALS)的家族性基因突变的孟德尔遗传模式(Renton等人，(2014) Nat Neurosci.，17 (1):17
‑
23；Taylor等人，(2016) Nature，539 (7628):197
‑
206；Turner等人，(2017) J Neurol Neurosurg Psychiatry，88 (12):1042
‑
1044)。迄今为止，多达30种基因被描述为ALS的单基因原因，其中最频繁的是C9orf72、SOD1、FUS和TARDBP/TDP43 (Chia等人，(2018) Lancet Neurol.，17 (1):94
‑
102；Nicolas等人，(2018) Neuron，97 (6):1268
‑
1283；Volk等人，(2018) Med Genet.，30 (2):252
‑
258)。
[0007]ALS的患病率中的可变性以及大量基因中的基因突变鉴定提示了，多重因素例如多基因组分和环境因素可以是疾病易感性的基础。事实上，已提出了细胞途径的组合可以导致ALS中的神经毒性结果，所述细胞途径例如蛋白质错误折叠/聚集(Ross & Poirier，(2004) Nat Med.，10Suppl:S10
‑
17)、谷氨酸介导的兴奋性毒性(Blasco等人，(2014) Curr Med Chem.，21 (31):3551
‑
3575)、线粒体动态异常(Cappello & Francolini，(2017) Int J Mol Sci.，18 (10)；Delic等人，(2018) J Neurosci Res.，96 (8):1353
‑
1366；Onesto等人，(2016)本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.因此，在第一个方面，本文公开的是分离的融合蛋白，其包含J蛋白的J结构域和TDP
‑
43结合结构域。2.权利要求1的融合蛋白，其中所述J蛋白的J结构域是真核起源的。3.权利要求1或权利要求2中任一项的融合蛋白，其中所述J蛋白的J结构域是人起源的。4.权利要求1
‑
3中任一项的融合蛋白，其中所述J蛋白的J结构域是胞质定位的。5.权利要求1
‑
4中任一项的融合蛋白，其中所述J蛋白的J结构域选自SEQ ID NO: 1
‑
50。6.权利要求1
‑
5中任一项的融合蛋白，其中所述J结构域包含选自SEQ ID NO: 1、5、6、10、16、24、25、31和49的序列。7.权利要求1
‑
6中任一项的融合蛋白，其中所述J结构域包含SEQ ID NO: 5的序列。8.权利要求1
‑
6中任一项的融合蛋白，其中所述J结构域包含SEQ ID NO: 10的序列。9.权利要求1
‑
6中任一项的融合蛋白，其中所述J结构域包含SEQ ID NO: 16的序列。10.权利要求1
‑
6中任一项的融合蛋白，其中所述J结构域包含SEQ ID NO: 25的序列。11.权利要求1
‑
6中任一项的融合蛋白，其中所述J结构域包含SEQ ID NO: 31的序列。12.权利要求1
‑
11中任一项的融合蛋白，其中例如当使用ELISA测定进行测量时，所述TDP
‑
43结合结构域对于TDP
‑
43 (例如，使用包含TDP
‑
43的C末端207个氨基酸的报告子构建体)具有1 μM或更小，例如300 nM或更小、100 nM或更小、30 nM或更小、10 nM或更小的K
D
。13.权利要求1
‑
12中任一项的融合蛋白，其中所述TDP
‑
43结合结构域包含选自SEQ ID NO: 51
‑
55的序列。14.权利要求1
‑
13中任一项的融合蛋白，其中所述TDP
‑
43结合结构域包含SEQ ID NO:51
‑
53的序列。15.权利要求1
‑
13中任一项的融合蛋白，其中所述TDP
‑
43结合结构域包含SEQ ID NO:51的序列。16.权利要求1
‑
13中任一项的融合蛋白，其中所述TDP
‑
43结合结构域包含SEQ ID NO:53的序列。17.权利要求1
‑
16中任一项的融合蛋白，其包含多个TDP
‑
43结合结构域。18.权利要求1
‑
17中任一项的融合蛋白，其由两个TDP
‑
43结合结构域组成。19.权利要求1
‑
18中任一项的融合蛋白，其由三个TDP
‑
43结合结构域组成。20.权利要求1
‑
19中任一项的融合蛋白，其包含下述构建体之一：a. DNAJ
‑
X
‑
T，b. DNAJ
‑
X
‑
T
‑
X
‑
T，c. DNAJ
‑
X
‑
T
‑
X
‑
T
‑
X
‑
T，d. T
‑
X
‑
DNAJ，e. T
‑
X
‑
T
‑
X
‑
DNAJ，f. T
‑
X
‑
T
‑
X
‑
T
‑
X
‑
DNAJ，g. T
‑
X
‑
DNAJ
‑
X
‑
T，h. T
‑
X
‑
DNAJ
‑
X
‑
T
‑
X
‑
T，i. TDNAJ
‑
X
‑
TTTTTDNAJ
‑
X
‑
T,
j. T
‑
X
‑
T
‑
X
‑
DNAJ
‑
X
‑
TT，k. TTDNAJ
‑
X
‑
T
‑
X
‑
TTTTTDNAJ
‑
X
‑
T,l. T
‑
X
‑
T
‑
X
‑
DNAJ
‑
X
‑
T
‑
X
‑
T
‑
X
‑
T，m. T
‑
X
‑
T
‑
X
‑
T
‑
X
‑
DNAJ
‑
X
‑
T，n. T
‑
X
‑
T
‑
X
‑
T
‑
X
‑
DNAJ
‑
X
‑
T
‑
X
‑
T，o. T
‑
X
‑
T
‑
X
‑
T
‑
X
‑
DNAJ
‑
X
‑
T
‑
X
‑
T
‑
X
‑
T，p. DnaJ
‑
X
‑
DnaJ
‑
X
‑
T
‑
X
‑
T，q. T
‑
X
‑
DnaJ
‑
X
‑
DnaJ，r. T
‑
X
‑
T
‑
X
‑
DnaJ
‑
X
‑
DnaJ，和s. T
‑
X
‑
TDnaJ
‑
X
‑
TDnaJ
‑
X
‑
TTTT其中，T是TDP
‑
43结合结构域，DNAJ是J蛋白的J结构域，和X是任选的接头。21.权利要求1
‑
20中任一项的融合蛋白，其中所述融合蛋白包含SEQ ID NO: 5的J结构域序列和SEQ ID NO: 51的TDP
‑
43结合结构域序列。22.权利要求1
‑
21中任一项的融合蛋白，其中所述融合蛋白包含SEQ ID NO: 5的J结构域序列和两个拷贝的SEQ ID N...

【专利技术属性】
技术研发人员：菱谷彰德，圭三古屋，
申请(专利权)人：索拉生物科学有限公司，
类型：发明
国别省市：