一种罗沙司他合成工艺中使用的DBU的检测分析方法技术

本发明专利技术公开一种罗沙司合成工艺中使用的DBU的检测分析方法，本发明专利技术所述方法在高效液相色谱仪上进行，采用Zorbax Eclipse Plus C18色谱柱，以缓冲盐溶液和有机溶剂作为流动相。液相二极管阵列检测器(DAD)或紫外(UV)检测器进行梯度洗脱检测，有效检测出DBU的残留量。本发明专利技术所述的分析方法可全面控制罗沙司他中的DBU，提高药品安全性，为制定罗沙司他原料药的质量标准提供依据。药的质量标准提供依据。

【技术实现步骤摘要】
一种罗沙司他合成工艺中使用的DBU的检测分析方法


[0001]本专利技术涉及医药化工领域，更具体地是涉及一种罗沙司他合成工艺中使用的DBU的检测分析方法。

技术介绍

[0002]在罗沙司他合成工艺中使用了DBU(二氮杂二环)，故需对DBU进行控制。查阅DBU的MSDS可知LD50(经口
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大鼠
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215
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618mg/kg)、查阅罗沙司他胶囊的说明书可知最大日剂量为200mg，故DBU的限度为0.005％。DBU结构式如下：
[0003][0004]因DBU在采用GC或GC
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MS进行方法开发时，主峰拖尾严重，故需要对HPLC进行方法研究。

技术实现思路

[0005]本专利技术目的在于提供一种罗沙司他合成工艺中使用的DBU的检测分析方法。所述分析方法是在高效液相色谱仪上进行的，采用Zorbax Eclipse Plus C18色谱柱，以缓冲盐溶液和有机溶剂作为流动相。液相二极管阵列检测器(DAD)或紫外(UV)检测器进行梯度洗脱检测。
[0006]本专利技术所述的罗沙司他合成工艺中使用的DBU的检测分析方法，所述方法采用高效液相色谱法，色谱条件为：
[0007]供试品溶液的制备：取含有DBU的罗沙司他供试品用稀释液溶解，稀释到最终浓度为0.1mg/ml～20mg/ml；
[0008]对照溶液的制备：取DBU对照品，用稀释液稀释，得到最终浓度为0.1μg/ml～20μg/ml；
[0009]所述的稀释液为氢氧化钠溶液
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乙腈的混合液；氢氧化钠溶液与乙腈的体积比为(3～5)：所述氢氧化钠溶液的浓度为0.05mol/L～0.1mol/L；
[0010]色谱柱：十八烷基键合硅胶为填充剂的反相色谱柱；
[0011]流动相：流动相A为缓冲盐溶液，流动相B为有机相；
[0012]流速：每分钟0.8ml～1.2ml；
[0013]柱温：35℃～45℃；
[0014]检测波长：213nm～217nm；
[0015]流动相采用以下方式梯度洗脱(液相二极管阵列检测器(DAD)或紫外(UV)检测器进行梯度洗脱检测)：
[0016]0～8min，流动相A为85～95％，流动相B为5～15％；
[0017]8～12min，流动相A为75～85％，流动相B为15～25％；
[0018]12～15.1min，流动相A为15～25％，流动相B为75～85％；
[0019]15.1～25min，流动相A为85～95％，流动相B为5～15％。
[0020]本专利技术所述的时间和体积百分比表示在所述时间段内，流动相选择体积百分比中的某个值进行洗脱，例如0～8min时间段，流动相A为85～95％中某一值如为90％，流动相B为5～15％中某一值如为10％，而不是表示流动相A或者流动相B为动态变化过程。
[0021]在一种具体的实施例中，流动相采用以下方式梯度洗脱(液相二极管阵列检测器(DAD)或紫外(UV)检测器进行梯度洗脱检测)：
[0022][0023]本专利技术的检测操作可以按照常规操作，例如分别精密量取所述供试品溶液和对照溶液各10μl，注入色谱仪，记录色谱图。
[0024]在一种具体的实施例中，所述的稀释液中氢氧化钠溶液与乙腈的体积比4:1。
[0025]在一种具体的实施例中，所述的色谱柱为以十八烷基键合硅胶为填充剂的反相色谱柱，规格为250mm*4.6mm，5μm。
[0026]在一种具体的实施例中，所述的流动相A为pH3.0的磷酸盐缓冲液，所述的磷酸盐缓冲液包括10mM的KH2PO4和20mM的NaClO4。
[0027]在一种具体的实施例中，所述的流动相B为乙腈。
[0028]在一种具体的实施例中，所述的流速为每分钟1ml。
[0029]在一种具体的实施例中，所述的柱温为40℃
[0030]在一种具体的实施例中，所述的检测波长为215nm。
[0031]本专利技术相对于现有技术的优势：
[0032]本方法简便快速，可有效分离罗沙司与DBU，又可准确检测出DBU的残留量，峰的分离度好，无拖尾现象，为制定罗沙司他原料药质量标准提供依据。
[0033]本方法专属性强、耐用性好，所用仪器设备及试剂均为常规物品，试验参数也是常规参数，无苛刻条件，一般实验室均能实现。
附图说明
[0034]图1示全波长扫描色谱图。
[0035]图2示流动相A为pH6.8磷酸盐缓冲液的供试品溶液色谱图。
[0036]图3示流动相A为pH6.8磷酸盐缓冲液(10mM KH2PO4+10mM NaClO4)对照品溶液。
[0037]图4示流动相A为pH6.8磷酸盐缓冲液(10mM KH2PO4+10mM NaClO4)供试品溶液色谱图。
[0038]图5示流动相A为pH3.4磷酸盐缓冲液(10mM KH2PO4+10mM NaClO4)对照品溶液。
[0039]图6示流动相A为pH3.4磷酸盐缓冲液(10mM KH2PO4+10mM NaClO4)供试品溶液色谱图。
[0040]图7示流动相A为pH3.0磷酸盐缓冲液(10mM KH2PO4+10mM NaClO4)对照品溶液。
[0041]图8示流动相A为pH3.0磷酸盐缓冲液(10mM KH2PO4+10mM NaClO4)供试品溶液色谱图。
[0042]图9示流动相A为pH3.5磷酸盐缓冲液(10mM KH2PO4+10mM NaClO4)对照品溶液色谱图。
[0043]图10示流动相A为pH3.5磷酸盐缓冲液(10mM KH2PO4+10mM NaClO4)供试品溶液色谱图。
[0044]图11示流动相A为pH4.0磷酸盐缓冲液(10mM KH2PO4+10mM NaClO4)对照品溶液色谱图。
[0045]图12示流动相A为pH4.0磷酸盐缓冲液(10mM KH2PO4+10mM NaClO4)供试品溶液色谱图。
[0046]图13示使用溶剂(0.1M NaOH
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ACN(80:20))配制对照品溶液的色谱图。
[0047]图14示使用溶剂(0.05M NaOH
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ACN(80:20))配制对照品溶液的色谱图。
[0048]图15示使用溶剂(0.05M NaOH
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ACN(80:20))配制供试品溶液的色谱图。
具体实施方式
[0049]为了使本领域的技术人员更好地理解本专利技术的技术方案，以下通过具体实施方式的描述并参照附图对本专利技术作进一步说明。
[0050]若无特别说明，以下实施例中采用十八烷基键合硅胶为填充剂的反相色谱柱(250mm*4.6mm，5μm)，流速：每分钟1ml；柱温：40℃。
[0051]实施例1：波长的选择。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.罗沙司他合成工艺中使用的DBU的检测分析方法，其特征在于，所述方法采用高效液相色谱法，色谱条件为：供试品溶液的制备：取含有DBU的罗沙司他供试品用稀释液溶解，稀释到最终浓度为0.1mg/ml～20mg/ml；对照溶液的制备：取DBU对照品，用稀释液稀释，得到最终浓度为0.1μg/ml～20μg/ml；所述的稀释液为氢氧化钠溶液
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乙腈的混合液；氢氧化钠溶液与乙腈的体积比为(3～5)：所述氢氧化钠溶液的浓度为0.05mol/L～0.1mol/L；色谱柱：十八烷基键合硅胶为填充剂的反相色谱柱；流动相：流动相A为缓冲盐溶液，流动相B为有机相；流速：每分钟0.8ml～1.2ml；柱温：35℃～45℃；检测波长：213nm～217nm；流动相采用以下方式梯度洗脱：0～8min，流动相A为85～95％，流动相B为5～15％；8～12min，流动相A为75～85％，流动相B为15～25％；12～15.1min，流动相A为15～25％，流动相B为75～85％；15.1～25min，流动相A为85～95％，流动相B为5～15％。2.根据权利要求1所述罗沙司他合成工艺中使用的DBU的检测分析方法，其特征在于，流动相采用以下方式梯度洗脱：...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏青，刘跃跃，王克艳，
申请(专利权)人：江苏万邦生化医药集团有限责任公司，
类型：发明
国别省市：