一种检测毛霉菌的多重液滴数字PCR试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种检测毛霉菌的多重液滴数字PCR试剂盒。所述试剂盒包括盒体和盒盖；所述盒体内设有用于检测毛霉菌的液滴数字PCR反应液和质控品；所述液滴数字PCR反应液中含有用于检测米根霉、微小根毛霉和伞枝横梗霉的特异性正反向引物和探针；所述探针两端标记有荧光基团。此外，所述试剂盒不仅在容纳腔顶端设置有容纳腔盖，所述容纳腔盖通过锁扣与锁栓的配套使用可防止试剂管在容纳腔内随意移动，保证运输安全，而且其对毛霉菌的检测特异性高，检测的假阴性率和假阳性率低，有效提高了毛霉菌检测灵敏度。菌检测灵敏度。菌检测灵敏度。

【技术实现步骤摘要】
一种检测毛霉菌的多重液滴数字PCR试剂盒


[0001]本专利技术涉及病原微生物检测领域，具体地说，涉及一种检测毛霉菌的多重液滴数字PCR试剂盒。

技术介绍

[0002]毛霉菌又名黑霉或长毛霉，为腐生性真菌，具有蛋白质分解能力，常引起食物霉变。其普遍发现于土壤、粪便、禾草及空气等环境中，以孢囊孢子和接合孢子等形式繁殖，是一种条件致病性真菌，在人体免疫力低下时可能会引起人体致毛霉菌病 。一般来说，毛霉菌病症状首先发生在鼻和耳部，随着毛霉菌通过鼻腔和呼吸道进入患者体内，会引起颌窦和眼眶的坏死性炎症和肉芽肿；一旦毛霉菌经血流侵人脑部，引起脑膜炎；与此同时，毛霉菌还可能扩散至肺、胃肠道等。但是，由于毛霉病发病急，病情进展快，诊断困难，所以死亡率高。
[0003]目前，毛霉菌病的一般临床检测方法有痰培养、病理活检、影像学检测。但是，由于检出率和特异性均不高，极易误诊为其他病原体导致的感染，因此不足以在毛霉菌病及时精确诊断、毛霉菌病暴发和感染溯源等辅助诊断方面做出快速反应。鉴于这些因素，迫切需要开发辅助毛霉菌病快速诊断的产品。r/>[0004]因本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测毛霉菌的多重液滴数字PCR试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括盒体和盒盖；所述盒体内设有用于检测毛霉菌的液滴数字PCR反应液和质控品；所述液滴数字PCR反应液中含有用于检测米根霉、微小根毛霉和伞枝横梗霉的特异性正反向引物和探针；所述探针两端标记有荧光基团。2.根据权利要求1所述的一种检测毛霉菌的多重液滴数字PCR试剂盒，其特征在于，所述盒盖与盒体铰连连接。3.根据权利要求1所述的一种检测毛霉菌的多重液滴数字PCR试剂盒，其特征在于，所述盒体内设有圆桶状容纳腔；所述容纳腔设置为能容纳装有液滴数字PCR反应液，包括用于检测米根霉、微小根毛霉和伞枝横梗霉的特异性正反向引物，探针，阴性质控品(灭菌无核酸酶水)，阳性质控品（米根霉DNA溶液, 微小根毛霉DNA溶液和伞枝横梗霉的DNA溶液）的试剂管。4.根据权利要求1所述的一种检测毛霉菌的多重液滴数字PCR试剂盒，其特征在于，所述检测米根霉的正向引物序列如SEQ ID 1所示，反向引物序列如SEQ ID 2所示，所述探针序列如SEQ ID 3所示：正向引物：5
´‑
TCAGTGACGCGATTTTAGAGATG
‑3´ꢀ
SEQ ID 1,反向引物：5
´‑
GAATGACCTATGACGCTATATAG
‑3´ꢀ
SEQ ID 2,检测探针：5
´‑
TAACAACAGCGTCCGCTACTGCA
‑3´ꢀ
SEQ ID 3；所述SEQ ID 3所示核苷酸序列的5
’
端标记的荧光基团为荧光报告基团Cy5，3
’
标记的荧光基团为荧光淬灭基团BHQ2。5.根据权利要求1所述的一种检测毛霉菌的多重液滴数字PCR试剂盒，其特征在于，所述检测微小根毛霉的正向引物序列如SEQ ID 4所示，反向引物序列如SEQ ID 5所示，所述探针序列如SEQ ID 6所示：正向引物：5
´‑
TGTAAGACCGCAGACGCGTCC
‑3´ꢀ
SEQ ID 4,反向引物：5
´‑
GAGTGACGCGATTTAGAGAAG
‑3´ꢀ
SEQ ID 5,检测探针：5
´‑
TGGACCGTCCACATTACCGTA
‑3´ꢀ

【专利技术属性】
技术研发人员：童云广，向红菊，
申请(专利权)人：杭州奥明医学检验实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：