一种工程菌及其构建方法和应用技术

本发明专利技术提供一种工程菌及其构建方法和应用。本发明专利技术第一方面提供一种工程菌，所述工程菌为过表达甲基化酶的大肠杆菌，所述甲基化酶用于对外源基因进行甲基化修饰；所述甲基化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3所示。本发明专利技术提供的工程菌能够对外源基因进行甲基化修饰，提高外源基因在须糖多孢菌内的转化效率，为须糖多孢菌的基因工程改造提供重要基础。础。础。

【技术实现步骤摘要】
一种工程菌及其构建方法和应用


[0001]本专利技术涉及一种工程菌及其构建方法和应用，涉及基因工程


技术介绍

[0002]外源DNA转化技术是基因工程和DNA克隆技术发展的基础和核心，是现代分子生物学中最重要的操作手段之一。常见的转化方法包括化学转化和电击转化，对于实验室标准菌株一般具备相对较高的转化效率，但是对于某些环境中筛选的菌株或者工业菌株，外源DNA的转化效率一般较低。
[0003]例如，丁烯基多杀菌素(butenyl
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spinosyns)是一种新型大环内酯类天然产物，具有高效生物杀虫活性，是理想的绿色生物杀虫剂。常见的生产方法是利用土壤放线菌须糖多孢菌(Saccharopolyspora pogona)的次级代谢产生，但是，野生型须糖多孢菌合成丁烯基多杀菌素的能力较弱、产量较低，需要利用基因工程技术改造须糖多孢菌以获得高产丁烯基多杀菌素的工程化菌株。但是，须糖多孢菌具有很强的限制性修饰系统，当外源基因进入细胞后会被快速降解，导致须糖多孢菌的遗传操作非常困难，限制了高产丁烯基多杀菌素工程菌株的构建。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种工程菌，其特征在于，所述工程菌为能够过表达甲基化酶的大肠杆菌，所述甲基化酶用于对外源基因进行甲基化修饰；所述甲基化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3所示。2.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述甲基化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。3.根据权利要求1或2所述的工程菌，其特征在于，所述大肠杆菌为ET12567。4.权利要求1
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3任一项所述工程菌的构建方法，其特征在于，包括：将编码所述甲基化酶的基因整合到大肠杆菌的基因组上，实现所述甲基化酶的过表达，得到所述工程菌；所述甲基化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3所示。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，将编码所述甲基化酶的基因、启动子J23119和核糖体结合位点B0034连接，构建得到甲基化酶的表达盒，并将所述表达盒转入大肠杆菌，筛选阳性转化子，得到所述工程菌。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，编码所述甲...

【专利技术属性】
技术研发人员：李春，庞建，王超，郭超，
申请(专利权)人：国家粮食和物资储备局科学研究院，
类型：发明
国别省市：