基于CRISPR/Cas12a方法检测志贺氏菌的试剂盒及其使用方法技术

本发明专利技术公开了基于CRISPR/Cas12a方法检测志贺氏菌的试剂盒及其使用方法，本发明专利技术所述的试剂盒包括CRISPR/Cas12a引物、crRNA或crRNA制备试剂、核酸扩增试剂、探针和Cas12a酶；所述CRISPR/Cas12a引物包括如SEQ ID NO.1所示序列的CRISPR/Cas12a上游引物，如SEQ ID NO.2所示序列的CRISPR/Cas12a下游引物。本发明专利技术的试剂盒及其使用方法对于志贺氏菌的检测具有快速、特异性强和灵敏度高等优点，其检测过程不需要特殊仪器,在疾病监测、临床诊断和食品安全监测等领域具有重要的应用价值。全监测等领域具有重要的应用价值。全监测等领域具有重要的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
基于CRISPR/Cas12a方法检测志贺氏菌的试剂盒及其使用方法


[0001]本专利技术属于分子生物学检测
，具体涉及基于CRISPR/Cas12a方法检测志贺氏菌的试剂盒及其使用方法。

技术介绍

[0002]志贺氏菌(Shigella spp.)在分类学上属于肠杆菌科(Enterobacteriaceae)，是一类具有高度传染性的革兰氏阴性菌，在自然界中有广泛的宿主，是引起人类肠道疾病的主要致病菌之一，具有很强的感染力和致病力，严重危害人们的身体健康。志贺氏菌主要存在于乳制品、肉制品以及蔬菜瓜果中，被志贺氏菌感染后会产生腹泻、发热、呕吐以及脱水等临床症状，严重可导致死亡。
[0003]1958年国际微生物学会将志贺氏菌分为A、B、C、D共四群48个血清型(包括亚型)。A群：痢疾志贺氏菌(S.dysenteriae)或志贺氏痢疾杆菌，该群志贺菌不发酵甘露醇，有13个血清型；B群：福氏志贺氏菌(S.flexneri)，该群志贺菌发酵甘露醇，该群抗原构造复杂，有群抗原和型抗原之分，根据型抗原的不同，分为6型，又根据群抗原的不同将型分本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于CRISPR/Cas12a方法检测志贺氏菌的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括CRISPR/Cas12a引物、crRNA或crRNA制备试剂、核酸扩增试剂、探针和Cas12a酶；所述CRISPR/Cas12a引物包括如SEQ ID NO.1所示序列的CRISPR/Cas12a上游引物，如SEQ ID NO.2所示序列的CRISPR/Cas12a下游引物。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述crRNA制备试剂包括crDNA序列和crRNA转录试剂，所述crRNA制备试剂用于制备所述crRNA；所述crDNA序列包括如SEQ ID NO.3所示序列的crDNA上游序列，如SEQ ID NO.4所示序列的crDNA下游序列。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述crRNA转录试剂包括缓冲液、NTP、T7 RNA聚合酶中的至少一种。4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述核酸扩增试剂为RPA或RAA扩增试剂。5.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述探针的核苷酸序列为SEQ ID NO.5。6.权利要求1所述的试剂盒的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、提取待检测样本的DNA；S2、使用所述CRISPR/Cas12a引物和核酸扩增试剂所述对...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋原，郭德华，徐之雯，李健，熊炜，
申请(专利权)人：上海海关动植物与食品检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：