一种用于克罗诺杆菌检测的试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种用于克罗诺杆菌检测的试剂盒及检测方法，所述试剂盒CRISPR/Cas12a引物、crDNA序列、crRNA转录试剂、核酸扩增试剂、探针和Cas12a酶；其中，所述CRISPR/Cas12a引物包括如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的序列，所述crDNA序列包括如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示的序列。本发明专利技术的试剂盒及其检测方法对于克罗诺杆菌的检测具有快速、特异性强和灵敏度高等优点、不需要特殊仪器,在疾病监测、临床诊断和食品安全监测等领域具有重要的应用价值。应用价值。应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种用于克罗诺杆菌检测的试剂盒及检测方法


[0001]本专利技术属于微生物学检测
，具体涉及一种用于克罗诺杆菌检测的试剂盒及检测方法。

技术介绍

[0002]克罗诺杆菌(Cronobacter spp.)最初发现时根据其能产生黄色素被命名为黄色阴沟肠杆菌，1980年更名为阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)，直到2007年利用多种现代分类技术将其划分为肠杆菌科克罗诺杆菌属。它是一种肠杆菌科的食源性致病菌，其感染能够导致脑膜炎，小肠结肠炎和败血症，致死率高达50％～80％。
[0003]克罗诺杆菌作为一种条件致病菌，在人、动物肠道以及水、土壤等自然环境中均有分布，可致使不同年龄段的人群发病，其主要感染人群为各个年龄的免疫低下人群，尤其是以低体重、出生不足月的新生儿为甚，严重时可引发脑膜炎、菌血症、坏死性小肠结肠炎以及神经系统损伤等病症，具有极高的致死率。克罗诺杆菌的感染能够招募大量树状细胞，并抑制其成熟，导致内脏上皮细胞受损。其毒力来源则是类似内毒素的成分，作用机理与脂多糖相似，能够介导Toll
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于检测克罗诺杆菌的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括CRISPR/Cas12a引物、crDNA序列、crRNA转录试剂、核酸扩增试剂、探针和Cas12a酶；所述CRISPR/Cas12a引物包括如SEQ ID NO.1所示序列的CRISPR/Cas12a上游引物，如SEQ ID NO.2所示序列的CRISPR/Cas12a下游引物；所述crDNA序列包括如SEQ ID NO.3所示序列的crDNA上游序列，如SEQ ID NO.4所示序列的crDNA下游序列。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述crRNA转录试剂包括缓冲液、NTP、T7 RNA聚合酶中的至少一种。3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述核酸扩增试剂为RPA或RAA扩增试剂。4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述探针的核苷酸序列为SEQ ID NO.5。5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述探针的两端分别连接荧光基团，所述荧光基团选自FAM、TAMRA、TET、HEX、Cy3、Cy5和ROX中的至少一种。6.一种用于检测克罗诺杆菌的方法，其特征在于，包括以下步骤...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨捷琳，申进玲，薛俊欣，蒋原，李健，
申请(专利权)人：上海海关动植物与食品检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：