一种细胞重编程诱导用组合物制造技术

本发明专利技术公开了一种细胞重编程诱导用组合物，其主要成分为：单个核细胞，基础培养基，L

【技术实现步骤摘要】
一种细胞重编程诱导用组合物


[0001]本专利技术涉及细胞诱导组合物
，具体为一种细胞重编程诱导用组合物。

技术介绍

[0002]树突状细胞(Dendritic Cells)也称DC细胞，其存在于外周血、淋巴器官及胸腺中，因其成熟时伸出许多树突样或伪足样突起而得名，是功能最强大的抗原递呈细胞，抗原递呈细胞是能摄取、加工处理抗原，并将抗原递呈给淋巴细胞的一类免疫细胞，在肿瘤的免疫治疗中发挥着不可替代的作用；
[0003]DC为异质性群体，分为传统型DC(cDC)、浆细胞样DC(pDC)、单核细胞来源DC(moDC)、朗格汉斯细胞(LNs)；
[0004]正常情况下DC处于未成熟和无功能状态，在外周组织中巡逻，利用先天免疫受体(包括Toll样受体)识别病原体，识别病原体后激活并迅速成熟，表现为共刺激分子CD80、CD86上调，促炎细胞因子TNF
‑
α、IL
‑
12上调；
[0005]成熟后的DC迁移能力增强，以趋化因子上调为特征，迁移至引流淋巴结，充当抗原提呈细胞，通过主要组织相容性复合物(MHC)将抗原提呈给T细胞；DC的激活和成熟是驱动初始T细胞启动和效应分化的至关重要的条件；
[0006]在DC活化不足的情况下，抗原呈递可能导致T细胞无反应并促进免疫耐受；因此，需要寻找合适的DC细胞重编程诱导用的组合物，使其充分分化成熟使激活机体适应免疫应答的第一步。

技术实现思路

[0007]鉴于现有技术中所存在的问题，本专利技术公开了一种细胞重编程诱导用组合物，采用的技术方案是，其主要成分及重量份配比为：用的技术方案是，其主要成分及重量份配比为：
[0008]作为本专利技术的一种优选技术方案，一种细胞重编程诱导用组合物，其主要成分及重量份配比为：
[0009]作为本专利技术的一种细胞重编程诱导用组合物优选技术方案，所述单个核细胞采用使用血细胞分离机对外周血进行分离得到。
[0010]作为本专利技术的一种细胞重编程诱导用组合物优选技术方案，所述外周血单个核细胞浓度为8
×
104‑6/ml。
[0011]作为本专利技术的一种细胞重编程诱导用组合物优选技术方案，所述基础培养基由92％ RPMI
‑
1640、无血清培养液5％和前列腺素E2 3％组成。
[0012]作为本专利技术的一种细胞重编程诱导用组合物优选技术方案，所述重组人粒细胞
‑
巨噬细胞集落刺激因子的浓度为50
‑
100u/ml，重组人白细胞介素4的浓度为25
‑
100u/ml。
[0013]作为本专利技术的一种细胞重编程诱导用组合物优选技术方案，所述干扰素β的浓度为0.2
×
102‑5U/ml。
[0014]L
‑
谷氨酰胺：是一种有机物，分子式为C5H10N2O3，分子量为146.15，谷氨酰胺可促使淋巴细胞、巨噬细胞的有丝分裂和分化增殖，增加细胞因子TNF、IL
‑
1等的产生和磷脂的mRNA合成。
[0015]聚肌胞苷酸：为人工合成的核苷酸二聚物，为一种高效干扰素诱生剂，干扰正常细胞产生抗病毒因子，从而干扰病毒繁殖，保护未受感染的细胞免遭病毒感染，能高效诱导干扰素的作用，抑制已感染的病毒的复制，另外还能加强吞噬细胞活性及改善机体免疫功能。
[0016]重组人粒细胞
‑
巨噬细胞集落刺激因子：GM
‑
CSF(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子)是一种造血生长因子，在体外可刺激中性粒细胞和巨噬细胞集落的形成，并具有促进早期红巨核细胞、嗜酸性祖细胞增殖和发育的功能，促进单核细胞向大巨噬样细胞分化，增强细胞的抗原递呈功能，增强DC的存活。
[0017]重组人白细胞介素4：IL
‑
4(白细胞介素
‑
4)在由单核细胞诱导成DC的过程中发挥的作用是抑制巨噬细胞的过度生长，从而引导单核细胞向DC方向分化。
[0018]干扰素β：干扰素β具有重要的免疫调节活性，干扰素与细胞表面的特异性受体结合后可引起一系列的细胞效应，诱导酶的合成、抑制细胞增殖、增强免疫活性，包括提高巨噬细胞的吞噬功能和加强T淋巴的特异性毒性作用；
[0019]前列腺素E2：PGE2(前列腺素E2)是炎性介质，可由TNF
‑
α，IL
‑
1β和LPS(脂多糖)等炎症信号诱导产生，在TNF
‑
α，IL
‑
1β和IL
‑
6成熟诱导组合中添加PGE2，可进一步提高DC的产量、成熟度、迁移能力和免疫激活能力，使诱导成熟的DC因表面趋化因子受体的高表达。
[0020]本专利技术的有益效果：本专利技术由单个核细胞、L
‑
谷氨酰胺、聚肌胞苷酸、重组人粒细胞
‑
巨噬细胞集落刺激因子、重组人白细胞介素、胰岛素和干扰素β以及RPMI
‑
1640、无血清培养液和前列腺素E经配比培养的组合物，可增强细胞的抗原递呈功能，增强DC的存活，提高DC的产量、成熟度、迁移能力和免疫激活能力，促进细胞重编程诱导，获得较高功能性的
DC，可作为DC激活成熟和驱动初始T细胞启动和效应分化的组合物。
具体实施方式
[0021]实施例1
[0022]本专利技术公开了一种细胞重编程诱导用组合物，采用的技术方案是，其主要成分及重量份配比为：所述单个核细胞采用使用血细胞分离机对外周血进行分离得到，所述外周血单个核细胞浓度为8
×
104/ml，所述基础培养基由92％ RPMI
‑
1640、无血清培养液5％和前列腺素E2 3％组成，所述重组人粒细胞
‑
巨噬细胞集落刺激因子的浓度为50u/ml，重组人白细胞介素4的浓度为25u/ml，所述干扰素β的浓度为0.2
×
102U/ml。
[0023]实施例2
[0024]本专利技术公开了一种细胞重编程诱导用组合物，采用的技术方案是，其主要成分及重量份配比为：所述单个核细胞采用使用血细胞分离机对外周血进行分离得到，所述外周血单个核细胞浓度为8
×
105/ml，所述基础培养基由92％ RPMI
‑
1640、无血清培养液5％和前列腺素E2 3％组成，所述重组人粒细胞
‑
巨噬细胞集落刺激因子的浓度为80u/ml，重组人白细胞介素4的浓度为75u/ml，所述干扰素β的浓度为0.2
×
103U/ml。
[0025]实施例3
[0026]本专利技术公开了一种细胞重编程诱导用组合物，采用的技术方案是，其主要成分及重量份配比为：
所述单个核细胞采用使用血细胞分离机对外周血进行分离得到，所述外周血单个核细胞浓度为8
×
10
5.5
/ml，所述基础培养基由92本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种细胞重编程诱导用组合物，其特征在于，其主要成分及重量份配比为：单个核细胞1.25
‑
4.15份，基础培养基3
‑
6份，L
‑
谷氨酰胺0.28
‑
1.32份，聚肌胞苷酸0.2
‑
0.69份，重组人粒细胞
‑
巨噬细胞集落刺激因子0.1
‑
0.45份，重组人白细胞介素4 0.34
‑
0.88份，胰岛素1.5
‑
3.86份，干扰素β0.03
‑
0.15份。2.根据权利要求1所述的一种细胞重编程诱导用组合物，其特征在于：由单个核细胞1.25份，基础培养基3份，L
‑
谷氨酰胺0.28份，聚肌胞苷酸0.2份，重组人粒细胞
‑
巨噬细胞集落刺激因子0.1份，重组人白细胞介素4 0.34份，胰岛素1.5份，干扰素β0.03份。3.根据权利要求1所述的一种细胞重编程诱导用组合物，其特征在于：由单个核细胞2.68份，基础培养基4.8份，L
‑
谷氨酰胺0.86份，聚肌胞苷酸0.52份，重组人粒细胞
‑
巨噬细胞集落刺激因子0.33份，重组人白细胞介素4 0.69份，胰岛素2.73...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐子恩，弗莱德，
申请(专利权)人：贝美缇上海健康科技有限公司，
类型：发明
国别省市：