一种多突变的人原代肺癌细胞株及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种多突变的人原代肺癌细胞株，来源于临床肺腺癌手术切除样本，所述人原代肺癌细胞株命名Lu

【技术实现步骤摘要】
一种多突变的人原代肺癌细胞株及其应用


[0001]本专利技术涉及生物医药
，特别涉及一种多突变的人原代肺癌细胞株及其应用。

技术介绍

[0002]肺癌作为目前世界上最常见的癌症类型，是导致与癌症相关疾病死亡率升高的主要原因。严重威胁人类健康和生命。根据临床组织学类型，肺癌可被细分为鳞状上皮癌、腺癌、大细胞未分化癌和小细胞未分化癌这四种不同的类型，而在这四种不同的类型之中，小细胞肺癌无论是从疾病临床表现、中晚期转移程度还是临床治疗原则上，均与其他几种肿瘤类型有所区别，因此，我们将除小细胞肺癌外的这三种不同的肺癌类型总结起来归类统称为非小细胞肺癌。肺腺癌约占非小细胞肺癌的50％。患有肺腺癌的患者5年生存率非常低，大约有75％的患者在临床首次确诊为该疾病时肿瘤已经发展并进入了中晚期。
[0003]随着人们认识到肺癌不是突然的转变，而是遗传和遗传表观学逐渐变化的结果，对于肺腺癌相关基因，即驱动基因和抑癌基因的研究取得了一定的进展。比较重要的基因突变包括表皮生长因子(EGFR)基因突变、间变性淋巴瘤激酶(ALK)重排、c
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ros原癌基因1酪氨酸激酶(ROS1)基因重排和Kirsten大鼠肉瘤病毒基因同源物(KRAS)突变，这些生物标志物也被认为是目前必须检测的基因。其中ALK基因重排被认为是肺腺癌患者对奥西替尼产生耐药的关键机制。肺腺癌一旦明确基因突变的类型，其临床鉴别、诊断和后续治疗的选择会变得相对容易。因此，用具有EGFR和ALK基因突变的临床肺腺癌患者的肿瘤组织分离培养人原代肺癌细胞系，对研究肺腺癌发生发展和耐药机制以及筛选治疗肺腺癌的候选药物具有重要作用。
[0004]而中国人的肺癌基因图谱和西方人存在明显不同：高的EGFR突变率，低的KRAS突变率，HBV的合并感染多等等。而当前用来进行肺癌研究的细胞均来自外国细胞库，这些细胞已经被研究人员广泛投入研究中，开发出了多种肺癌靶向疗法的药物。但是针对具有中国人基因特征突变的肺癌和耐药性肺癌的治疗亟需具有中国人基因特征的肺癌细胞株。因此，建立具有中国人特征性基因改变的肺癌细胞株对于研究中国人肺癌发生发展机理及筛选个性化的人原代肺癌的候选药物具有必不可少的重要作用，同时，具有中国人基因特征的肺癌细胞可以作为精准化医疗的工具，提高中国肺癌患者的生存期。

技术实现思路

[0005]本专利技术要解决的技术问题是提供一株具有中国人基因特征的细胞株Lu
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1534，为研究病人体内肿瘤的发生、耐药机制及治疗提供良好的体内和体外模型，从而促进肺癌的基础研究、预防及临床治疗。
[0006]为解决上述技术问题，本专利技术提供一种多突变的人原代肺癌细胞株，来源于临床肺腺癌手术切除样本，所述人原代肺癌细胞株命名Lu
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1534，保藏编号为CCTCCNO：C2022167，保藏日期为2022年8月25日，保藏单位地址为中国武汉武汉大学,保藏单位为中
国典型培养物保藏中心。
[0007]具体的，所述Lu
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1534具有EGFR、L858R突变，RET扩增。
[0008]具体的，所述Lu
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1534具有RPS6KB2，MST1R，ARHGEF28，ALK，MAP3K14，GLI1，ERBB2，DOT1L，DNMT1，AURKA的原癌基因突变和FAT1，FANCA，TET，RECQL4，HNF1A，MAP3K1，ETAA1，BARD1，CIC，ANKRD11的抑癌基因突变。
[0009]本专利技术还提供了将权利要求1所述人原代肺癌细胞株Lu
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1534在构建肺腺癌动物模型中的应用。
[0010]本专利技术还提供了将权利要求1所述人原代肺癌细胞株Lu
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1534在构建肺腺癌微环境模型中的应用。
[0011]本专利技术还提供了将权利要求1所述人原代肺癌细胞株Lu
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1534在构建3D肿瘤培养体系和类器官体系模型中的应用。
[0012]本专利技术还提供了将权利要求1所述人原代肺癌细胞株Lu
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1534在构建肺腺癌微环境与肺腺癌进展关系模型中的应用。
[0013]本专利技术构建了一种多突变的人原代肺癌细胞株Lu
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1534，该细胞系的供体为临床肺腺癌患者，且基因证实具有EGFR、L858R突变，RET扩增。人原代肺癌细胞株Lu
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1534，可在培养基中进行体外培养，且体外培养生长快速稳定、能连续传代。该细胞系能够在免疫缺陷鼠皮下形成肿瘤，为研究体外和体内肺腺癌的发生、发展和耐药机制研究提供新的试验材料。
附图说明
[0014]为了更清楚地说明本专利技术的技术方案，下面对本专利技术所需要使用的附图作简单的介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0015]图1是显微镜下的人原代肺癌细胞株Lu
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1534细胞形态图(10X)；
[0016]图2是人原代肺癌细胞株Lu
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1534体外生长曲线；
[0017]图3是人原代肺癌细胞株Lu
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1534小鼠皮下肿瘤模型的生长曲线；
[0018]图4是人原代肺癌细胞株Lu
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1534全外显子测序(WES)原癌基因突变Top10；
[0019]图5是人原代肺癌细胞株Lu
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1534全外显子测序(WES)抑癌基因突变Top10；
[0020]图6是人原代肺癌细胞株Lu
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1534基于转录组测序的活跃信号通路及基因集分析。
具体实施方式
[0021]下面将结合附图，对本专利技术中的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所描述的实施例是本专利技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其它实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0022]实施例1.多突变的人原代肺腺癌细胞株Lu
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1534的建立
[0023]1.取材
[0024]从湖南肿瘤医院获得新鲜的临床肺腺癌手术切除样本(女，71岁，肺腺癌肿瘤，临
床分期IV期，基因诊断EGFR、L858R突变，RET重排(符合伦理学，以及经过患者同意))，立即在无菌条件下将肿本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多突变的人原代肺癌细胞株，其特征在于，来源于临床肺腺癌手术切除样本，所述人原代肺癌细胞株命名Lu
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1534，保藏编号为CCTCC NO：C2022167，保藏日期为2022年8月25日，保藏单位为中国典型培养物保藏中心。2.根据权利要求1所述的人原代肺癌细胞株，其特征在于，所述Lu
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1534具有EGFR、L858R突变，RET扩增。3.根据权利要求1所述的人原代肺癌细胞株，其特征在于，所述Lu
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1534具有RPS6KB2，MST1R，ARHGEF28，ALK，MAP3K14，GLI1，ERBB2，DOT1L，DNMT1，AURKA的原癌基因突变和F...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾亮，黄哲，秦浩越，陈阳倩，张永昌，杨农，许杰，李敏，
申请(专利权)人：中南大学，
类型：发明
国别省市：