用于病毒转导的半自动中空纤维系统技术方案

一种用于将载体引入的系统包括限定毛细管内空间和通过多孔膜与所述毛细管内空间隔开的毛细管外空间的过滤器模块。所述系统还包括一对毛细管内端口，其流体联接到所述毛细管内空间的相对端部并且各自接收转导介质、细胞和载体。所述系统还包括一对毛细管外端口，其联接到所述毛细管外空间的相对端部并与毛细管外介质源和废物容器流体连通。管外介质源和废物容器流体连通。管外介质源和废物容器流体连通。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于病毒转导的半自动中空纤维系统
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请根据35U.S.C.
§
119(e)要求于2020年6月10日提交的美国临时申请63/037,377的优先权。该在先申请的公开内容被认为是该申请的公开内容的一部分，并且通过引用将其全部内容结合于此。


[0003]本公开涉及使用中空纤维过滤器模块进行病毒转导的半自动方法和系统。

技术介绍

[0004]细胞疗法利用自然转导过程，使用经过安全性和功能性修饰的病毒颗粒作为递送媒介物(载体)将治疗性基因引入患者细胞中。病毒载体转导是目前细胞疗法制造中用于引入治疗性遗传物质的最常用方法。
[0005]目前的制造转导工艺是劳动密集型的并且在病毒载体的使用中效率低下，从而导致细胞疗法的制造成本高并且产生这些疗法所需要的时间延长。因此，现有技术在制造转导过程中存在显著的局限性。

技术实现思路

[0006]本公开的一个方面提供了一种用于将载体导入细胞中的系统。所述系统包括限定毛细管内空间和通过多孔膜与所述毛细管内空间隔开的毛细管外空间的过滤器模块。所述系统还包括一对毛细管内端口，其流体联接到所述毛细管内空间的相对端部并且各自接收转导介质、细胞和载体。所述系统还包括一对毛细管外端口，其联接到所述毛细管外空间的相对端部并与毛细管外介质源和废物容器流体连通。
[0007]本公开的该方面可包括以下任选特征中的一个或多个。在一些实例中，所述系统包括与所述毛细管内端口中的至少一者流体连通的收获容器。在一些实施方式中，所述系统包括毛细管内泵，其可操作以向所述毛细管内端口中的至少一者提供所述转导介质、所述细胞和所述载体中的每一者的流。任选地，所述毛细管内泵可在第一状态下操作以在第一时间段期间向所述毛细管内端口提供所述细胞和所述载体，并且可在第二状态下操作以在第二时间段期间向所述毛细管内端口提供所述转导介质。
[0008]在一些实例中，所述系统包括通过所述毛细管外端口中的至少一者与所述毛细管外空间连通的废物容器。在一些实施方式中，所述系统包括可操作以向所述毛细管外端口中的每一者提供所述毛细管外介质流的毛细管外泵。在一些构型中，系统包括可操作以提供从所述毛细管外端口到所述废物容器的废物流体流的毛细管外泵。
[0009]在一些实施方式中，多孔膜是圆柱形的。在一些实例中，多孔膜包括孔，所述孔允许尺寸小于约50kDa的颗粒从所述毛细管内空间穿过所述孔。在一些构型中，毛细管内空间限定转导区。
[0010]本公开的另一方面提供了一种用于将病毒或非病毒载体引入细胞中的系统。所述
系统包括限定从第一端部延伸至第二端部的毛细管内空间的中空纤维。所述系统还包括外壳，其封闭一根或多根中空纤维以在所述中空纤维和所述外壳之间从所述第一端部到所述第二端部限定毛细管外空间，所述外壳包括与邻近所述第一端部的所述毛细管内空间流体连通的第一端口和与邻近所述第二端部的所述毛细管内空间流体连通的第二端口。所述系统还包括转导介质源，其通过所述第一端口和所述第二端口中的每一者与所述毛细管内空间流体连通。所述系统还包括细胞源，其包括细胞并通过所述第一端口和所述第二端口中的每一者与所述毛细管内空间流体连通。所述系统还包括病毒源，其包括病毒或非病毒载体并通过所述第一端口和所述第二端口中的每一者与所述毛细管内空间流体连通。
[0011]本公开的该方面可包括以下任选特征中的一个或多个。在一些实例中，所述系统包括通过所述第一端口和所述第二端口中的至少一者与所述毛细管内空间流体连通的收获容器。在一些实施方式中，所述系统包括毛细管内泵，所述毛细管内泵包括与所述转导介质源、所述细胞源和所述病毒源中的每一者流体连通的入口。在一些实例中，所述毛细管内泵包括通过所述第一端口与所述毛细管内空间流体连通的第一出口和通过所述第二端口与所述毛细管内空间流体连通的第二出口。
[0012]在一些构型中，外壳包括与毛细管外空间连通的第三端口，并且系统还包括通过第三端口与毛细管外空间连通的废物容器。在一些实例中，所述系统包括通过所述第三端口与所述毛细管外空间流体连通的毛细管外介质源。在一些构型中，所述第三端口邻近所述毛细管内空间的所述第一端部安置，并且所述系统还包括与所述毛细管外空间流体连通并且邻近所述毛细管内空间的所述第二端部安置的第四端口。在一些实例中，所述废物容器和所述毛细管外介质源中的每一者通过所述第三端口和所述第四端口中的每一个与所述毛细管外空间连通。
[0013]在一些构型中，中空纤维包括多根中空纤维。在一些实施方式中，中空纤维包括孔，所述孔允许尺寸小于约50kDa的颗粒从所述毛细管内空间穿过所述孔。
[0014]本公开的又一方面提供了一种使用中空纤维将病毒或非病毒载体引入细胞中的方法，所述中空纤维限定从第一端部延伸至第二端部的毛细管内空间和从所述第一端部至所述第二端部围绕所述毛细管内空间的毛细管外空间。所述方法包括将病毒或非病毒载体装载到所述中空纤维的所述毛细管内空间中以及将细胞装载到所述中空纤维的所述毛细管内空间中。
[0015]本公开的该方面可包括以下任选特征中的一个或多个。在一些实例中，将所述病毒或非病毒载体装载到所述毛细管内空间中包括从所述毛细管内空间的所述第一端部和所述第二端部中的至少一者装载所述病毒或非病毒载体。在一些实施方式中，将所述病毒或非病毒载体装载到所述毛细管内空间中包括从所述毛细管内空间的所述第一端部和所述第二端部中的每一者装载所述病毒或非病毒载体。在一些构型中，将所述细胞装载到所述毛细管内空间中包括从所述毛细管内空间的所述第一端部和所述第二端部中的至少一者装载所述细胞。
[0016]在一些实例中，将所述细胞装载到所述毛细管内空间中包括从所述毛细管内空间的所述第一端部和所述第二端部中的每一者装载所述细胞。任选地，所述方法还可包括转导所述中空纤维的所述毛细管内空间内的细胞以及从所述中空纤维的所述毛细管内空间收获所转导的细胞。在一些实例中，从所述毛细管内空间收获所转导的细胞包括将冲洗流
体装载到所述中空纤维的所述毛细管外空间中。在一些实施方式中，从所述毛细管内空间收获所转导的细胞包括从所述第一端部或所述第二端部中的一者将冲洗流体装载到所述毛细管内空间中。
[0017]在一些实例中，该方法包括从毛细管外空间收集废物。在一些实施方式中，细胞和病毒或非病毒载体被同时装载。在一些构型中，细胞和病毒或非病毒载体被单独装载。在一些实施方式中，在病毒或非病毒载体之前装载细胞。在一些构型中，在细胞之前装载病毒或非病毒载体。
[0018]在一些实例中，以1
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103至1
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1010个细胞/ml范围内的浓度装载细胞。在一些实施方式中，装载所述细胞包括以作为所述中空纤维的内表面积的尺寸的函数的速率装载细胞。在一些构型中，病毒或非病毒载体作为病毒颗粒装载。在一些实例中，病毒或非病毒载体作为核酸载体装载。
[0019]在一些实例中，所述方法包括以约5
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于将载体引入细胞中的系统，所述系统包括：过滤器模块，其限定毛细管内空间和通过多孔膜与所述毛细管内空间隔开的毛细管外空间；一对毛细管内端口，其流体联接到所述毛细管内空间的相对端部并且各自接收转导介质、细胞和载体；以及一对毛细管外端口，其联接到所述毛细管外空间的相对端部并与毛细管外介质源和废物容器流体连通。2.如权利要求1所述的系统，其还包括与所述毛细管内端口中的至少一者流体连通的收获容器。3.如权利要求1或2所述的系统，其还包括毛细管内泵，所述毛细管内泵能够操作以向所述毛细管内端口中的至少一者提供所述转导介质、所述细胞和所述载体中的每一者的流。4.如权利要求3所述的系统，其中所述毛细管内泵能够在第一状态下操作以在第一时间段期间向所述毛细管内端口提供所述细胞和所述载体，并且能够在第二状态下操作以在第二时间段期间向所述毛细管内端口提供所述转导介质。5.如权利要求1至4中任一项所述的系统，其还包括废物容器，所述废物容器通过所述毛细管外端口中的至少一者与所述毛细管外空间连通。6.如权利要求1至5中任一项所述的系统，其还包括毛细管外泵，所述毛细管外泵能够操作以向所述毛细管外端口中的每一者提供所述毛细管外介质的流。7.如权利要求1至6中任一项所述的系统，其还包括毛细管外泵，所述毛细管外泵能够操作以提供从所述毛细管外端口到所述废物容器的废物流体流。8.如权利要求1至7中任一项所述的系统，其中所述多孔膜是圆柱形的。9.如权利要求1至8中任一项所述的系统，其中所述多孔膜包括孔，所述孔允许尺寸小于约50kDa的颗粒从所述毛细管内空间穿过所述孔。10.如权利要求1至9中任一项所述的系统，其中所述毛细管内空间限定转导区。11.一种用于将病毒或非病毒载体引入细胞中的系统，所述系统包括：中空纤维，其限定从第一端部延伸至第二端部的毛细管内空间；以及外壳，其封闭一根或多根所述中空纤维以在所述中空纤维和所述外壳之间从所述第一端部到所述第二端部限定毛细管外空间，所述外壳包括与邻近所述第一端部的所述毛细管内空间流体连通的第一端口和与邻近所述第二端部的所述毛细管内空间流体连通的第二端口；转导介质源，其通过所述第一端口和所述第二端口中的每一者与所述毛细管内空间流体连通；细胞源，其包括细胞并通过所述第一端口和所述第二端口中的每一者与所述毛细管内空间流体连通；以及病毒源，其包括病毒或非病毒载体并通过所述第一端口和所述第二端口中的每一者与所述毛细管内空间流体连通。12.如权利要求11所述的系统，其还包括通过所述第一端口和所述第二端口中的至少一者与所述毛细管内空间流体连通的收获容器。
13.如权利要求11或12所述的系统，其还包括毛细管内泵，所述毛细管内泵包括与所述转导介质源、所述细胞源和所述病毒源中的每一者流体连通的入口。14.如权利要求13所述的系统，其中所述毛细管内泵包括通过所述第一端口与所述毛细管内空间流体连通的第一出口和通过所述第二端口与所述毛细管内空间流体连通的第二出口。15.如权利要求11至14中任一项所述的系统，其中所述外壳包括与所述毛细管外空间连通的第三端口，并且所述系统还包括：废物容器，其通过所述第三端口与所述毛细管外空间连通。16.如权利要求15所述的系统，其还包括通过所述第三端口与所述毛细管外空间流体连通的毛细管外介质源。17.如权利要求16所述的系统，其中所述第三端口邻近所述毛细管内空间的所述第一端部设置，并且所述系统还包括与所述毛细管外空间流体连通并且邻近所述毛细管内空间的所述第二端部设置的第四端口。18.如权利要求17所述的系统，其中所述废物容器和所述毛细管外介质源中的每一者通过所述第三端口和所述第四端口中的每一者与所述毛细管外空间连通。19.如权利要求11至18中任一项所述的系统，其中所述中空纤维包括多根中空纤维。20.如权利要求11至19中任一项所述的系统，其中所述中空纤维包括孔，所述孔允许尺寸小于约50kDa的颗粒从所述毛细管内空间穿过所述孔。21.一种使用中空纤维将病毒或非病毒载体引入细胞中的方法，所述中空纤维限定从第一端部延伸至第二端部的毛细管内空间和从所述第一端部至所述第二端部围绕所述毛细管内空间的毛细管外空间，所述方法包括以下步骤：将病毒或非病毒载体装载到所述中空纤维的所述毛细管内空间中；以及将细胞装载到所述中空纤维的所述毛细管内空间中。22.如权利要求21所述的方法，其中将所述病毒或非病毒载体装载到所述毛细管内空间中包括从所述毛细管内空间的所述第一端部和所述第二端部中的至少一者装载所述病毒或非病毒载体。23.如权利要求21或22所述的方法，其中将所述病毒或非病毒载体装载到所述毛细管内空间中包括从所述毛细管内空间的所述第一端部和所述第二端部中的每一者装载所述病毒或非病毒载体。24.如权利要求21至23中任一项所述的方法，其中将所述细胞装载到所述毛细管内空间中包括从所述毛细管内空间的所述第一端部和所述第二端部中的至少一者装载所述细胞。25.如权利要求21至23中任一项所述的方法，其中将所述细胞装载到所述毛细管内空间中包括从所述毛细管内空间的所述第一端部和所述第二端部中的每一者装载所述细胞。26.如权利要求21至25中任一项所述的方法，其还包括以下步骤：转导所述中空纤维的所述毛细管内空间内的所述细胞；以及从所述中空纤维的所述毛细管内空间收获所转导的细胞。27.如权利要求26所述的方法，其中从所述毛细管内空间收获所转导的细胞包括将冲洗流体装载到所述中空纤维的所述毛细管外空间中。
28.如权利要求26或27所述的方法，其中从所述毛细...

【专利技术属性】
技术研发人员：N，
申请(专利权)人：武田药品工业株式会社，
类型：发明
国别省市：