用于合成含硫醚肽的方法技术

本发明专利技术涉及在碘处理下固相肽合成中在色氨酸与半胱氨酸之间形成硫桥的方法。本发明专利技术还涉及所述方法得到的化合物及其各自的用途。涉及所述方法得到的化合物及其各自的用途。涉及所述方法得到的化合物及其各自的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于合成含硫醚肽的方法
[0001]本专利技术涉及在碘处理下固相肽合成中在色氨酸与半胱氨酸之间形成硫桥的方法。本专利技术还涉及所述方法得到的化合物。
[0002]专利技术背景
[0003]α
‑
鹅膏蕈碱作为一种缓慢作用的毒素(LD
50
＝50
‑
100μg/kg)(T.Wieland，Peptides of Poisonous Amanita Mushrooms(编辑：A.Rich)，Wiley
‑
VCH，Weinheim，1986)，是RNA聚合酶II(Pol II)的选择性抑制剂。其双环八肽结构含有6
‑
羟基
‑
氨基羧乙基硫色氨酸
‑
(R)
‑
亚砜交联结构(图4A，图9)。对结构活性关系的研究表明，氨基羧乙基硫色氨酸交联结构对于该生物活性是必需的，而Trp的6
‑
羟基和亚砜对于细胞毒性却非必需的。因此，基于先前的研究，已经开发出抗体
‑
毒素缀合物(图4B，图9)用于癌症疗法(Pahl等人，Drug Discov Today：Technol，2018，30，85
‑
89.)。在该方法中，鹅膏蕈碱组分充当该缀合物的毒性有效载荷，其被递送至靶细胞并在该处释放。因此，与鹅膏蕈碱相比具有类似构造的环肽充当抗体
‑
毒素缀合物的毒素组分(图4)收到关注。
[0004]多年来已对氨基酸氨基羧乙基硫色氨酸的合成进行了探索，并且对于其形成有三种基本合成方法。氨基羧乙基硫色氨酸的早期合成包括使吲哚与硫基氯反应(Anderson，A.A.Shelat，R.K.Guy，J Org Chem 2005，70，4578
‑
4584)。尽管该方法已被广泛使用，但是与作为获得氨基羧乙基硫色氨酸部分的额外合成方法的Savige
‑
Fontana反应(Savige等人，J.Chem.Soc.，Chem.Commun.1976，600
‑
601)相比，所涉及的费力的保护和脱保护策略使其不受欢迎。使用Savige
‑
Fontana反应，进行鹅膏蕈碱的各种衍生物的初始构效关系以及α
‑
鹅膏蕈碱的首次全合成(Zanotti等人，Chem
‑
Eur J 2001，7，1479
‑
1485；Matinkhoo等人，J Am Chem Soc 2018，140，6513
‑
651)。
[0005]此前，碘介导的未保护的Trp侧链和三苯甲基保护的Cys的硫代反应已经在一些模型肽的实例中进行了描述(Sieber等人，Helv Chim Acta 1980，63，2358
‑
2363)。该方法已被应用于鬼笔环肽及衍生物的合成(Schuresko等人，Angew Chem Int Edit 2007，46，3547
‑
3549；Yao等人，Chem
‑
Eur J 2019，25，8030
‑
8034)，但未对鹅膏蕈碱型肽及其衍生的序列进行描述，因为肽序列的不同长度、次序和分子内氢键会形成不同的结果和收率。
[0006]基于上文所提及的现有技术，本专利技术的目的在于提供在固相肽合成中形成氨基羧乙基硫色氨酸型硫桥的手段和方法，以用于合成环肽，特别是合成鹅膏毒素及衍生物。该目的通过本说明书的独立权利要求的主题来获得。
[0007]专利技术概述
[0008]本专利技术涉及用于制备式(I)的化合物的方法，
[0009]附图说明
[0010]图1单环五肽的固相肽合成。
[0011]图2单环肽的固相肽合成。
[0012]图3单环肽的固相肽合成。
[0013]图4(A)α
‑
膏蕈碱以及A环和B环的结构，(B)抗体
‑
毒素
‑
缀合物的示意性实例。
[0014]图5单环五肽的溶液相肽合成。
[0015]图6Fmoc
‑
L
‑
Trp(6
‑
OBn)
‑
OH的合成。a)POCl3，DMF；b)(B
o
c)2O，DMAP，DCM；c)Boc
‑2‑
膦酰甘氨酸
‑
甲基二甲酯，DBU(1，8
‑
二氮杂双环[5.4.0]十一碳
‑7‑
烯)，DCM，0℃至室温，16小时；d)H2(20巴)，4摩尔％(R)
‑
MonoPhos，2摩尔％[Rh(COD)2BF4]，DCM，3小时，室温，ee＝99％；e)0.5N LiOH/MeOH/THF(1∶1∶1)，2小时；t)TFA/DCM(1∶1)，2小时；g)Fmoc
‑
OSu，NaHCO3，1，4
‑
二氧杂环己烷/H2O，12小时。
[0016]图7Cbz
‑
L
‑
Trp(Boc)(6OBn)
‑
OMe的合成。A)Cbz
‑2‑
膦酰甘氨酸
‑
甲基二甲酯，DBU，DCM，0℃至室温，16小时；b)H2(20巴)，4摩尔％(R)
‑
MonoPhos，2摩尔％[Rh(COD)2BF4]，DCM，4小时，室温，ee＝99％。
[0017]图8Boc
‑
D
‑
Trp(Boc)(6
‑
OBn)
‑
OMe的合成，H2(20巴)，4摩尔％(S)
‑
MonoPhos，2摩尔％[Rh(COD)2BF4]，DCM，3小时，室温，ee＝99％。
[0018]图9显示不同鹅膏毒素的结构式。粗体形式的数字(1至8)指定形成鹅膏毒素的八个氨基酸的标准编号。还显示了氨基酸1、3和4中原子的标准编号(分别为希腊字母α至γ，希腊字母α至δ，以及1
′
至7
′
的数字)。A环和B环被标记。
[0019]专利技术详述
[0020]术语和定义
[0021]氨基酸序列从氨基端到羧基端给出。序列位置的大写字母是指单字母代码中的L
‑
氨基酸(Stryer，Biochemistry，第3版，第21页)。氨基酸序列位置的小写字母是指相应的D
‑
或(2R)
‑
氨基酸。
[0022]在本说明书的上下文中，术语“保护基”涉及与官能团共价连接的部分(特别是本文所讨论的分子的羧酸部分、氨基部分或羟基部分)，该部分可选择性地与官能团连接并选择性地移除，而不影响保护基所连接的分子的碳主链的完整性或手性取向，也不裂解与分子连接的特定其它保护基。
[0023]在本说明书的上下文本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.用于制备式(I)的化合物的方法，其中在反应步骤(a)中，使式(II)的化合物与碘(I2)、N
‑
溴代琥珀酰亚胺或N
‑
碘代琥珀酰亚胺、一氯化碘、一溴化碘和双(吡啶)碘鎓四氟硼酸盐，特别是与碘，反应，得到式(I)的化合物；其中
‑
Z选自SH、S
‑
三苯甲基(STrt)、S
‑
乙酰氨基甲基(SAcm)、S
‑
二苯甲基(SDpm)、S
‑
单甲氧基三苯甲基(SMmt)和S
‑
叔丁基(S
t
Bu)；特别地Z选自SH、S
‑
三苯甲基(STrt)、S
‑
乙酰氨基甲基(SAcm)、S
‑
二苯甲基(SDpm)、S
‑
单甲氧基三苯甲基(SMmt)和S
‑
叔丁基(S
t
Bu)，最特别地z是STrt；
‑
Y是未取代的或羟基
‑
、卤素
‑
、卤代碳
‑
、炔基
‑
、烯烃
‑
、氰基
‑
保护的羧酸酯和/或羧基酰胺取代的吲哚，特别是未取代的或羟基
‑
、卤素
‑
、卤代碳
‑
、炔基
‑
、烯烃
‑
、氰基
‑
保护的羧酸酯和/或羧基酰胺取代的吲哚；
‑
L1是未取代的或Me
‑
取代的C1‑
C2烷基连接基，特别地L1是CH2；
‑
L2是未取代的或Me
‑
取代的C1‑
C2烷基连接基，特别地L1是CH2或
‑
C(CH3)2‑
；
‑
B是α
‑
氨基酸、β
‑
氨基酸主链、α
‑
甲基氨基酸，特别地B是α
‑
氨基酸主链(NH
‑
CHR
‑
C＝O，其中R是L1或L2)；
‑
每个A独立地选自呈L
‑
或D
‑
构象的蛋白原性和非蛋白原性α
‑
氨基酸或β
‑
氨基酸，特别地每个A独立地选自呈L
‑
或D
‑
构象的蛋白原性和非蛋白原性α
‑
氨基酸；
‑
n是选自2、3和4的整数；
‑
条件是环由14至26个键，特别是15至21个键，更特别是18个键组成；
‑
每个C和D独立地选自呈L
‑
或D
‑
构象的蛋白原性和非蛋白原性α
‑
氨基酸，其中式(II)的C或D与树脂连接或者具有受保护的N端；
‑
m和k独立地选自0至4的整数，特别地其中m和k的总和为0至4的整数；
‑
X是(
‑
(
‑
吲哚
‑
S
‑
)或(
‑
S
‑
吲哚
‑
)
‑
)，其中吲哚是未取代的或羟基
‑
、卤素
‑
、卤代碳
‑
、炔基
‑
、烯烃
‑
、氰基
‑
保护的羧酸酯和/或羧基酰胺取代的吲哚，其中任选地X的硫原子可以随后被氧化。2.权利要求1的方法，其中式(II)的C或D与树脂连接，并与碘(I2)反应，特别地以2∶1的碘/式(II)的化合物的浓度比与碘反应。3.权利要求1的方法，其中式(II)的C或D具有受保护的N端，并与碘(I2)反应，特别地以1∶1的碘/式(II)的化合物的浓度比与碘反应。4.之前权利要求中任一项的方法，其中所述反应步骤(a)在极性溶剂中进行，特别地在MeOH、DCM、NMP(N
‑
甲基
‑2‑
吡咯烷酮)或DMF中进行，更特别地在极性非质子溶剂中进行，最特别地在DMF中进行。5.之前权利要求中任一项的方法，其中碘以1
‑
4mg/ml，特别是2mg/ml的浓度使用。6.之前权利要求中任一项的方法，其中n是3。7.之前权利要求中任一项的方法，其中A独立地选自蛋白原性或非蛋白原性α
‑
氨基酸，特别地，A独立地选自未取代的或羟基取代的Gly、Ala、Ile、Leu、Val、Pro、Phe、Lys、Arg、His、D
‑
Pro、D
‑
Ala、L
‑
炔丙基
‑
Gly、Aib、光氨基酸、叠氮氨基酸、炔基氨基酸。8.之前权利要求中任一项的方法，其中C和D独立地选自蛋白原性或非蛋白原性α
‑
氨基酸，特别地，C和D独立地选自Gly、Ala、Ile、Leu、Val、Pro、Phe、Lys、Ser、Cys、Arg、His、Asp、Asn、Gln、Glu、Hyp、L
‑
哌啶甲酸、L
‑
氮杂环丁烷
‑2‑
甲酸、(S)
‑
二氢吲哚
‑2‑
甲酸、L
‑4‑
噻唑烷甲酸、反式
‑4‑
Hyp、L
‑
炔丙基
‑
Gly、羟基化氨基酸、光氨基酸、叠氮氨基酸、炔基氨基酸、氟化Pro和氨基
‑
Pro。9.之前权利要求中任一项的方法，其中Y的吲哚未被取代或者被一个、两个、三个或四个选自羟基、卤素、CN和氟化碳的基团取代，特别地，Y的吲哚未被取代或者被一个羟基或卤素基团取代。10.权利要求1
‑
2或4
‑
9中任一项的方法，其中所述树脂是酸不稳定树脂，特别地是酸不稳定THP树脂、2
‑
氯三苯甲基树脂、Rink酰胺树脂或王氏树脂。11.之前权利要求中任一项的方法，其中z的硫原子被氧化，特别地，i.使用锰离子，更特别地，使所述化合物与式(V)的化合物，以及与Mn(OTf)2和H2O2反应，ii使用PPO、过氧化二苯甲酰、过氧苯甲酸叔丁酯或过氧化月桂酰；或mCPBA；iii.使用碘和氧气。12.用于制备式(VI)的化合物的方法，
其中在反应步骤(a)中，使式(VII)的化合物其中
·
R
NHA1
是氨基保护基，特别是可在酸性或还原条件下裂解的氨基保护基，更特别是Boc、Cbz、或三异丙基甲硅烷基(TIPS)，最特别是Boc，
·
R
NHA2
是氨基保护基，特别是可在酸性或还原条件下裂解的氨基保护基，更特别是Boc或Cbz，最特别是Boc，
·
R
PGP
是酚OH基团的保护基，特别是可在碱性或还原条件下裂解，更特别是可在还原条件下裂解的酚OH保护基，更特别地R
PGP
是苄基或乙酰基，最特别地R
PGP
是苄基；
·
R
COON
是羧基保护基，特别是可在碱性条件下裂解的羧基保护基，更特别是甲基、乙基、苄基或叔丁基，最特别是甲基，与H2、有机金属铑或钌络合物和有机磷配体反应，特别地与H2、有机金属铑络合物和有机磷配体反应，更特别地与H2和双(1，5
‑
环辛二烯)铑(I)
+
、双(2，2
′‑
联吡啶)铑(I)
+
或双(降冰片二烯)铑(I)
+
与单价阴离子，以及选自(R)
‑
MonoPhos或(1R，1
′
R，2S，2
′
S)
‑
DuanPhos或(R，R)
‑
DIPAMP的有机磷配体反应，最特别地与H2、Rh(COD)2BF4和(R)
‑
MonoPhos反应，并将所述化合物与移除R
NHA1
、R
NHA2
、R
PGP
和R
COON
的脱保护剂反应，以得到以(VI)为特征的化合物。13.权利要求12的方法，其中在反应步骤(b)中，使式(VIII)的化合物
其中
·
R
NHA1
和R
PGP
具有与权利要求12中所述相同的含义，与受保护的2
‑
膦酰甘氨酸
‑
甲基二甲酯在碱性条件下反应，特别地与Boc
‑2‑
膦酰甘氨酸
‑
甲基二甲酯、Cbz
‑2‑
膦酰甘氨酸
‑
苄基二甲酯或Cbz
‑2‑
膦酰甘氨酸
‑
甲基二甲酯在碱性条件下反应，更特别地碱选自DBU和四甲基胍，以得到以(VII)为特征的化合物。14.式(IIIa)和(IIIb)的化合物，或者式(IVa)、(IVb)、(IVc)、(IVd)、(IVe)、(IVf)、(IVg)或(IVh)的化合物，
其中
‑
X在式[(IVa)、(IVb)、(IVc)和(IVd)]中为...

【专利技术属性】
技术研发人员：H，
申请(专利权)人：海德堡医药研究有限责任公司，
类型：发明
国别省市：