一种海洋真菌来源的肽类化合物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种海洋真菌来源的肽类化合物及其制备方法与应用。本发明专利技术提供的肽类化合物的结构式如式1所示，是从海洋真菌Penicillium sp.JX

【技术实现步骤摘要】
一种海洋真菌来源的肽类化合物及其制备方法与应用


[0001]本专利技术涉及饲料添加剂
，特别涉及一种海洋真菌来源的肽类化合物及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]腹泻是畜禽养殖过程中最常见的一类疾病，其主要原因是机体受到细菌(大肠杆菌、沙门氏菌等)、病毒(流行性腹泻、轮状病毒等)的感染而引起的。目前，主要治疗方法是使用抗生素直接或间接抑制或杀灭病原(细菌或病毒)。
[0003]为实现畜禽养殖行业的健康发展，动物营养学家将目光转向饲料添加剂
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无抗饲料。饲料添加剂是为满足特殊需要而加入饲料中的少量或微量营养性或非营养性物质。其主要作用功能：一是抗菌、保健，提高存活率；二是促生长、增产量、提高饲料转换效率。
[0004]目前，国内对于饲料添加剂主要研究集中于替代抗生素抗菌作用及促生长作用，包括中药植物提取物、益生菌等。但存在药效远远低于抗生素，导致经济成本高；存在品种稀少，产品粗糙；大量高效、低毒、无残留的饲料添加剂全靠进口等缺点。
[0005]抗菌肽是生物体内经诱导产生的一种具有生物活性的小分子多肽，拥有广谱的抗细菌活性，高效的抗真菌、病毒和原虫的活性，分子量小、热稳定性好(高温水煮不变性)，不易产生抗药性等优点。由于其作为饲料添加剂的众多优点，吸引着众多动物营养学家的目光，最希望替代抗生素的产品之一。
[0006]目前，针对畜禽腹泻类肠道疾病主要治疗方法是使用抗生素，直接或间接抑制或杀灭病原。但长期应用抗生素，能使某些菌株发生耐药性变异并传递耐药因子，给用这些药物预防和治疗动物疾病带来困难，并造成药物在动物体内蓄积，畜禽产品中的药物残留将对人类健康产生危害。

技术实现思路

[0007]针对现有技术中存在的缺点与不足，本专利技术的首要目的在于提供一种海洋真菌来源的肽类化合物。
[0008]本专利技术的另一目的在于提供上述海洋真菌来源的肽类化合物的制备方法。
[0009]本专利技术的再一目的在于提供上述海洋真菌来源的肽类化合物的应用。
[0010]一种海洋真菌来源的肽类化合物，所述肽类化合物的结构式如式1所示：
[0011][0012]所述肽类化合物是从海洋真菌Penicillium sp.JX
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1的发酵液中分离获得的；海洋真菌Penicillium sp.JX
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1于2019年1月10日保藏在位于广州市先烈中路100号大院59号楼5楼的广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏编号为GDMCC 60525，并于2019年05月28日公开的中国专利技术专利申请201910045112.1中公开过。
[0013]上述海洋真菌来源的肽类化合物的制备方法，包括如下操作步骤：
[0014]S1.将海洋真菌Penicillium sp.JX
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1接入种子培养基，摇床培养，得到种子培养液；
[0015]S2.将种子培养液接入发酵培养基中，静置培养，获得发酵产物；
[0016]S3.将发酵产物过滤得到菌体，菌体用甲醇提取三次，浓缩提取液得到浸膏，，再采用柱层析分离技术，得到结构式如式Ⅰ所示的肽类化合物。
[0017]优选地，步骤S1中所述种子培养基平均每升包括以下组分：马铃薯300克，葡萄糖20克，氯化钠33.3克，水1L。
[0018]优选地，步骤S1中所述摇床培养的条件为摇床转速200rpm，25～30℃培养3～7天。
[0019]优选地，步骤S2中所述发酵培养基平均每升包括以下组分：胰蛋白胨10克；酵母提取物5克；氯化钠33.3克，水1L。
[0020]优选地，步骤S2中所述静置培养的条件为25～30℃静置25～50天。
[0021]优选地，步骤S3中所述柱层析分离技术包括硅胶柱层析、凝胶柱层析和C
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18反相柱层析。
[0022]优选地，步骤S3中所述柱层析分离的具体操作为：
[0023](i)将浓缩后所得浸膏用硅胶柱进行柱层析分离，分别以乙酸乙酯的体积分数为3％、40％、75％、100％的乙酸乙酯
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石油醚为洗脱剂进行梯度洗脱；
[0024](ii)收集步骤(i)中的40％洗脱液，再用C
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18反相柱进行柱层析分离，以甲醇的体积分数为75％的甲醇
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水为洗脱剂进行洗脱；
[0025](iii)收集步骤(ii)中的洗脱液，再以葡聚糖Sephadex LH
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20凝胶柱进行层析分离，以体积比为2:1的甲醇
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氯仿为洗脱剂进行洗脱；
[0026](iv)收集步骤(iii)中的洗脱液，再用硅胶柱进行柱层析分离，以乙酸乙酯的体积分数为30％的乙酸乙酯
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石油醚为洗脱剂进行洗脱，获得化合物1。
[0027]上述海洋真菌来源的肽类化合物在制备抗菌药物中的应用。
[0028]优选地，所述的菌包括革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌；
[0029]所述的革兰氏阳性菌为金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)、绿脓杆菌
(Pseudomonas aeruginosa)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)中的一种或多种组合；
[0030]所述的革兰氏阴性菌为大肠杆菌(Escherchia coli)、沙门菌(Salmonella enteritidis)、副伤寒沙门氏菌(Salmonella enteritidis)、志贺氏菌(Shigella dysenteria)、副溶血性狐菌(Vibrio parahaemolyticus)中的一种或多种组合。
[0031]优选地，所述的金黄色葡萄球菌为金黄色葡萄球菌ATCC 6538。
[0032]所述的大肠杆菌为大肠杆菌CICC 10389。
[0033]所述的绿脓杆菌为绿脓杆菌ATCC 14442。
[0034]所述的沙门菌为沙门菌CICC 21482。
[0035]所述的副伤寒沙门氏菌为副伤寒沙门氏菌ATCC 13076。
[0036]所述的枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌ATCC 6633。
[0037]上述海洋真菌来源的肽类化合物作为饲料添加剂的应用。
[0038]本专利技术相较于现有技术具有如下有益效果：
[0039]本专利技术提供的海洋真菌来源的新型肽类化合物，对肠道微生物中的多种革兰阳性及阴性细菌均有较强的杀灭作用，可用于饲料添加剂，应用前景广阔。
[0040]本专利技术提供的海洋真菌来源的新型肽类化合物，是一种具有生物活性的小分子多肽，拥有的抗细菌活性，分子量小、热稳定性好(高温水煮不变性)，不易产生抗药性等优点。
[0041]本专利技术还提供了海洋真菌来源的新型肽类化合物的制备方法，该方法反应条件温和，副产物少，收率高，成本低。其制备原料可以来源于海洋真菌，海洋真菌种类繁多、数量庞大，从真菌提取本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种海洋真菌来源的肽类化合物，其特征在于：所述肽类化合物的结构式如式1所示：2.根据权利要求1所述的海洋真菌来源的肽类化合物，其特征在于：所述肽类化合物是从海洋真菌Penicillium sp.JX
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1的发酵液中分离获得的；所述海洋真菌Penicillium sp.JX
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1于2019年1月10日保藏在位于广州市先烈中路100号大院59号楼5楼的广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏编号为GDMCC 60525。3.权利要求1所述的海洋真菌来源的肽类化合物的制备方法，其特征在于：包括如下操作步骤：S1.将海洋真菌Penicillium sp.JX
‑2‑
1接入种子培养基，摇床培养，得到种子培养液；S2.将种子培养液接入发酵培养基中，静置培养，获得发酵产物；S3.将发酵产物过滤得到菌体，菌体用甲醇提取三次，浓缩提取液得到浸膏，再采用柱层析分离技术，得到结构式如式Ⅰ所示的肽类化合物。4.根据权利要求3所述的海洋真菌来源的肽类化合物的制备方法，其特征在于：步骤S1中所述种子培养液平均每升包括以下组分：马铃薯300克，葡萄糖20克，氯化钠33.3克，水1L；步骤S2中所述发酵培养基平均每升包括以下组分：胰蛋白胨10克，酵母提取物5克，氯化钠33.3克，水1L。5.根据权利要求3所述的海洋真菌来源的肽类化合物的制备方法，其特征在于：步骤S1中所述摇床培养的条件为摇床转速200rpm，25～30℃培养3～7天；步骤S2中所述静置培养的条件为25～30℃静置25～50天；步骤S3中所述柱层析分离技术包括硅胶柱层析、凝胶柱层析和C
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18反相柱层析。6.根据权利要求5所述的海洋真菌来源的肽类化合物的制备方法，其特征在于：步骤S3中所述柱层析分...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄纪国，冯爱娟，滕晓焕，刘付倩，候发婉，陈静儿，冯艳芳，陈文珠，黄宇娟，
申请(专利权)人：广东轻工职业技术学院，
类型：发明
国别省市：