一种布美诺肽的合成方法技术

本发明专利技术公开了一种布美诺肽的固相合成方法，属于多肽合成领域。该方法选用Wang Resin从碳端到氮端依次按照顺序偶联所有氨基酸，固相合成全保护布美诺肽；采用四(三苯基膦)钯作为催化剂，选择性脱除Lys和Asp的侧链保护基；在偶联剂存在条件下进行树脂上环化；在裂解剂存在条件下，将肽树脂裂解及侧链脱保护得到布美诺肽粗肽。本发明专利技术避免了液相方式成环时所发生的分子间偶联，最终目标肽纯度达到90％以上，纯化总收率达到55％以上，精肽纯度达到99％以上。99％以上。99％以上。

【技术实现步骤摘要】
一种布美诺肽的合成方法


[0001]本专利技术涉及多肽药物合成领域，涉及一种固相合成布美诺肽的方法。

技术介绍

[0002]布美诺肽，英文名：bremelanotide。肽序列为：AC
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Nle
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[Asp
‑
His
‑
D
‑
PheArg
‑
Trp
‑
Lys]cycle
‑
OH 。
[0003]布美诺肽，又称布雷默浪丹，PT 141，是一种黑素皮质素受体
‑
4(MC4r)激动剂，通过激活大脑中的内源性途径来调节性欲和性反应，帮助伴有低活跃性性欲障碍况的绝经前女性保持正常性欲，该多肽为美国PalatinTechnologies制药公司研发的一种治疗女性性功能障碍的新药，目前已完成临床III期研究，已于2019年6月21日获FDA批准上市。布美诺肽相比氟班色林有很大优势，不需要禁酒，没有低血压、眩晕等不良反应，仅有轻微恶心反应，起效迅速，3分钟起效，疗效持续8个小时，目前中国也未批准任何治疗HSDD的药物上市，因此布美诺肽有着广阔的市场前景。
[0004]目前，布美诺肽的合成方法主要为固相合成法。专利CN200610086841.4采用逐步 合成的方法， 肽树脂合成结束后， 选择性脱除Asp及Lys的保护基， 之后在树脂上成环，最后以HF裂解，因为HF的剧烈腐蚀性而导致该方法无法大规模使用，其实施例公布的精肽收率为30～35％；专利CN200710048824.6同样采用选择性脱保护的方法，但其所选择的的脱保护方法在脱除Asp及Lys侧链保护基的同时也会脱除His的保护基，其实施例公布的粗肽收率为80％；专利CN200910131598.7布雷默浪丹的固相合成方法中将对羟基苯甲酸连接在 RinkAmide Resin之后，采用普通氨基酸原料逐步合成，合成结束后以TFA裂解， 在液相条件下成环，但是该方法在进行液相成环时容易发生分子间偶联，产生二聚体，三聚体等多聚物，严重降低合成收率。

技术实现思路

[0005]本专利技术所要解决的技术问题是针对现有固液合成过程中所存在的杂质多，纯度和收率低，操作步骤繁琐，废液过量，不利于工业化生产的问题，提供一种新的固相合成布美诺肽的方法，该方法避免了液相方式成环时所发生的分子间偶联，目标肽纯度和总收率高。
[0006]本专利技术所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的。本专利技术是一种布美诺肽的固相合成方法，其特点是：该方法选用Wang Resin从碳端到氮端依次按照顺序偶联所有氨基酸，固相合成全保护布美诺肽；采用四(三苯基膦)钯作为催化剂，选择性脱除Lys和Asp的侧链保护基；在偶联剂存在条件下进行树脂上环化；在裂解剂存在条件下，将肽树脂裂解及侧链脱保护得到布美诺肽粗肽。
[0007]本专利技术所述的一种布美诺肽的固相合成方法，其进一步优选的技术方案是：固相合成全保护布美诺肽的方法如下：选用Wang Resin作为固相载体，依照布美诺肽序列，在偶联剂存在条件下，依次偶联Fmoc
‑
Lys(Alloc)
‑
OH，Fmoc
‑
Trp(Boc)
‑
OH，Fmoc
‑
Arg(pbf)
‑
OH， Fmoc
‑
D
‑
Phe
‑
OH， Fmoc
‑
His(Boc)
‑
OH， Fmoc
‑
Asp(Oall)OH， Fmoc
‑
Nle
‑
OH， 偶联完成后脱
除Fmoc保护基，以乙酸酐/N
‑
甲基吗啉进行乙酰化，得AC
‑
Nle
‑
Asp(Oall)
‑
His(Boc)
‑
D
‑
Phe
‑
Arg(pbf)
‑
Trp(Boc)
‑
Lys(Alloc)
‑
WangResin。
[0008]本专利技术所述的一种布美诺肽的固相合成方法，其进一步优选的技术方案是：其具体步骤包括：（1）选用Wang Resin作为固相载体，依照布美诺肽序列，在偶联剂存在条件下， 依次偶联Fmoc
‑
Lys(Alloc)
‑
OH，Fmoc
‑
Trp(Boc)
‑
OH，Fmoc
‑
Arg(pbf)
‑
OH， Fmoc
‑
D
‑
Phe
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OH， Fmoc
‑
His(Boc)
‑
OH， Fmoc
‑
Asp(Oall)OH， Fmoc
‑
Nle
‑
OH， 偶联完成后脱除Fmoc保护基，以乙酸酐/N
‑
甲基吗啉进行乙酰化，得AC
‑
Nle
‑
Asp(Oall)
‑
His(Boc)
‑
D
‑
Phe
‑
Arg(pbf)
‑
Trp(Boc)
‑
Lys(Alloc)
‑
Wang Resin；（2）采用四(三苯基膦)钯作为催化剂，选择性脱除Lys侧链保护基Alloc，Asp侧链保护基Oall，得AC
‑
Nle
‑
Asp
‑
His(Boc)
‑
D
‑
Phe
‑
Arg(pbf)
‑
Trp(Boc)
‑
Lys
‑
Wang Resin；（3）在偶联剂存在条件下进行树脂上环化，制得： AC
‑
Nle
‑
[Asp
‑
His(Boc)
‑
D
‑
Phe
‑
Arg (pbf)
‑
Trp(Boc)
‑
Lys]cycle
‑ꢀ
Wang Resin；（4）在裂解剂存在条件下，将肽树脂裂解及侧链脱保护，制得： AC
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Nle
‑
[Asp
‑
His
‑
D
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PheArg
‑
Trp
‑
Lys]cycle
‑
OH；（5）以乙腈、水或者乙腈溶液将AC
‑
Nle
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[Asp
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His
‑
D
‑
PheArg
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种布美诺肽的固相合成方法，其特征在于：该方法选用Wang Resin从碳端到氮端依次按照顺序偶联所有氨基酸，固相合成全保护布美诺肽；采用四(三苯基膦)钯作为催化剂，选择性脱除Lys和Asp的侧链保护基；在偶联剂存在条件下进行树脂上环化；在裂解剂存在条件下，将肽树脂裂解及侧链脱保护得到布美诺肽粗肽。2.根据权利要求1所述的一种布美诺肽的固相合成方法，其特征在于：固相合成全保护布美诺肽的方法如下：选用Wang Resin作为固相载体，依照布美诺肽序列，在偶联剂存在条件下，依次偶联Fmoc
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Lys(Alloc)
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OH，Fmoc
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Trp(Boc)
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OH，Fmoc
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Arg(pbf)
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OH， Fmoc
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D
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Phe
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OH， Fmoc
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His(Boc)
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OH， Fmoc
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Asp(Oall)OH， Fmoc
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Nle
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OH， 偶联完成后脱除Fmoc保护基，以乙酸酐/N
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甲基吗啉进行乙酰化，得AC
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Nle
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Asp(Oall)
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His(Boc)
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D
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Phe
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Arg(pbf)
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Trp(Boc)
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Lys(Alloc)
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Wang Resin。3.根据权利要求1所述的一种布美诺肽的固相合成方法，其特征在于：其具体步骤包括：（1）选用Wang Resin作为固相载体，依照布美诺肽序列，在偶联剂存在条件下， 依次偶联Fmoc
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Lys(Alloc)
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OH，Fmoc
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Trp(Boc)
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OH，Fmoc
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Arg(pbf)
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OH， Fmoc
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D
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Phe
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OH， Fmoc
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His(Boc)
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OH， Fmoc
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Asp...

【专利技术属性】
技术研发人员：金方翔，赵呈青，李顺子，玄其存，
申请(专利权)人：杭州诺泰澳赛诺医药技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：