用抗TGF-β的NK细胞克服免疫抑制制造技术

本发明专利技术公开了包含可溶性或膜结合的TGF

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用抗TGF
‑
β
的NK细胞克服免疫抑制
[0001]本申请要求于2020年4月30日提交的美国临时专利申请号63/018,108的权益，该临时专利申请全文以引用方式并入本文。
I.
技术介绍

[0002]1.NK细胞在抗癌疗法中的使用正在增加。然而，研究已表明，癌症分泌的TGF
‑
β可降低NK细胞的杀伤作用。先前解决杀伤力下降问题的尝试包括使用TGF
‑
β抑制剂；然而，TGF
‑
β抑制剂的使用可引起全身性的不良副作用。需要可用于在存在TGF
‑
β的情况下保持NK细胞的杀伤作用(即，TGF
‑
β抗性NK细胞)的新试剂和方法。
II.
技术实现思路

[0003]2.公开了与工程饲养细胞相关的方法和组合物以及使用所述饲养细胞来生成抵抗TGF
‑
β的NK细胞的用途。
[0004]3.在一个方面，本文公开了工程饲养细胞，这些工程饲养细胞经过修饰以表达可溶性或膜结合的TGF
‑
β。例如，TGF
‑
β(可溶性或膜结合的)可以可操作地连接至组成型或诱导型启动子，该组成型或诱导型启动子包括但不限于CMV或EF1A启动子。
[0005]4.本文还公开了任何前述方面的工程饲养细胞，这些工程饲养细胞在其细胞表面上还包含至少一种附加NK细胞效应剂，其中所述至少一种附加NK细胞效应剂是细胞因子、粘附分子或NK细胞活化剂(诸如例如，NK细胞效应剂包括但不限于4
>‑
1BBL、IL
‑
2、IL
‑
12、IL
‑
15、IL
‑
18、IL
‑
21、MICA、LFA
‑
1、2B4、CCR7、OX40L、UBLP2、BCM1/SLAMF2、NKG2D激动剂、CD155、CD112、Jagged1、Jagged2、Delta
‑
1、Pref
‑
1、DNER、Jedi、SOM
‑
11、无翅基因、CCN3、MAGP2、MAGP1、TSP2、YB
‑
1、EGFL7、CCR7、DAP12和DAP10、Notch配体、NKp46激动剂、NKp44激动剂、NKp30激动剂、其他NCR激动剂、CD16激动剂)。在一个方面，所述至少一种附加NK细胞效应剂包括IL
‑
21、4
‑
1BBL、IL
‑
15、IL
‑
21和4
‑
1BBL、IL
‑
21和IL
‑
15、或IL
‑
15和4
‑
1BBL。
[0006]5.在一个方面，本文公开了任何前述方面的工程饲养细胞，其中饲养细胞包括PBMC、RPMI8866、HFWT、K562细胞、EBV
‑
LCL、用膜结合的IL
‑
21转染的NK细胞(包括但不限于PBMC、RPMI8866、NK
‑
92、NK
‑
92MI、NK
‑
YTS、NK、NKL、KIL、KIL C.2、NK 3.3、NK
‑
YS、HFWT、K562细胞)、用膜结合的4
‑
1BBL转染的NK细胞(包括但不限于PBMC、RPMI8866、NK
‑
92、NK
‑
92MI、NK
‑
YTS、NK、NKL、KIL、KIL C.2、NK 3.3、NK
‑
YS、HFWT、K562细胞)、用膜结合的IL
‑
15和4
‑
1BBL转染的NK细胞(包括但不限于PBMC、RPMI8866、NK
‑
92、NK
‑
92MI、NK
‑
YTS、NK、NKL、KIL、KIL C.2、NK 3.3、NK
‑
YS、HFWT、K562细胞)、或用膜结合的IL
‑
21和4
‑
1BBL转染的NK细胞(包括但不限于PBMC、RPMI8866、NK
‑
92、NK
‑
92MI、NK
‑
YTS、NK、NKL、KIL、KIL C.2、NK 3.3、NK
‑
YS、HFWT、K562细胞)。
[0007]6.本文还公开了源自任何前述方面的工程饲养细胞的质膜颗粒或外来体。在一些情况下，这些颗粒或外来体可通过氮空化获得。
[0008]7.在一个方面，本文公开了生成TGF
‑
β抗性NK细胞的方法，这些方法包括在存在任何前述权利要求的工程饲养细胞、质膜颗粒或外来体的情况下温育NK细胞。例如，本文公开
了生成TGF
‑
β抗性NK细胞的方法，这些方法包括在存在已经过工程改造以表达TGF
‑
β的饲养细胞(包括但不限于PBMC、RPMI8866、NK
‑
92、NK
‑
92MI、NK
‑
YTS、NK、NKL、KIL、KIL C.2、NK 3.3、NK
‑
YS、HFWT、K562细胞、EBV
‑
LCL、用膜结合的IL
‑
21转染的NK细胞、用膜结合的4
‑
1BBL转染的NK细胞、用膜结合的IL
‑
15和4
‑
1BBL转染的NK细胞、或用膜结合的IL
‑
21和4
‑
1BBL转染的NK细胞)的情况下温育NK细胞，或在存在源自所述饲养细胞的质膜颗粒或外来体的情况下温育NK细胞。
[0009]8.本文还公开了任何前述方面的生成TGF
‑
β抗性NK细胞的方法，其中饲养细胞在其细胞表面上还包含至少一种附加NK细胞效应剂，其中所述至少一种附加NK细胞效应剂是细胞因子、粘附分子或NK细胞活化剂(诸如例如，NK细胞效应剂包括但不限于4
‑
1BBL、IL
‑
2、IL
‑
12、IL
‑
15、IL
‑
18、IL
‑
21、MICA、LFA
‑
1、2B4、CCR7、OX40L、UBLP2、BCM1/SLAMF2、NKG2D激动剂、CD155、CD112、Jagged1、Jagged2、Delta
‑
1、Pref
‑
1、DNER、Jedi、SOM
‑
11、无翅基因、CCN3、MAGP2、MAGP1、TSP2、YB
‑
1、EGFL7、CCR7、DAP12和DAP10、Notch配体、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种工程饲养细胞，所述工程饲养细胞已经过修饰以表达可溶性或膜结合的TGF
‑
β。2.根据权利要求1所述的工程饲养细胞，其中TGF
‑
β由诱导型或组成型启动子表达。3.根据权利要求1或2所述的工程饲养细胞，其中所述饲养细胞包括白血病K562细胞。4.根据权利要求1或2所述的工程饲养细胞，其中所述饲养细胞包括NK细胞。5.根据权利要求1至3中任一项所述的工程饲养细胞，所述工程饲养细胞在其细胞表面上还包含至少一种附加NK细胞效应剂，其中所述至少一种附加NK细胞效应剂是细胞因子、粘附分子或NK细胞活化剂。6.根据权利要求5所述的工程饲养细胞，其中所述至少一种附加NK细胞效应剂选自4
‑
1BBL、IL
‑
2、IL
‑
12、IL
‑
15、IL
‑
18、IL
‑
21、MICA、LFA
‑
1、2B4、CCR7、OX40L、UBLP2、BCM1/SLAMF2、NKG2D激动剂、CD155、CD112、Jagged1、Jagged2、Delta
‑
1、Pref
‑
1、DNER、Jedi、SOM
‑
11、无翅基因、CCN3、MAGP2、MAGP1、TSP2、YB
‑
1、EGFL7、CCR7、DAP12和DAP10、Notch配体、NKp46激动剂、NKp44激动剂、NKp30激动剂、其他NCR激动剂、CD16激动剂。7.根据权利要求5所述的工程饲养细胞，其中所述至少一种附加NK细胞效应剂包括IL
‑
21、4
‑
1BBL、IL
‑
15、IL
‑
21和4
‑
1BBL、IL
‑
21和IL
‑
15、或IL
‑
15和4
‑
1BBL。8.根据权利要求1至7中任一项所述的工程饲养细胞，其中所述饲养细胞包括PBMC、RPMI8866、HFWT、K562细胞、EBV
‑
LCL、用膜结合的IL
‑
21转染的NK细胞、用膜结合的4
‑
1BBL转染的NK细胞、用膜结合的IL
‑
15和4
‑
1BBL转染的NK细胞、或用膜结合的IL
‑
21和4
‑
1BBL转染的NK细胞。9.一种质膜颗粒或外来体，所述质膜颗粒或外来体源自根据权利要求1至8中任一项所述的工程饲养细胞。10.一种生成TGF
‑
β抗性NK细胞的方法，所述方法包括在存在根据权利要求1至8中任一项所述的工程饲养细胞或根据权利要求9所述的外来体或质膜颗粒的情况下温育NK细胞。11.一种生成TGF
‑
β抗性NK细胞的方法，所述方法包括在存在已经过工程改造以表达TGF
‑
β的饲养细胞的情况下温育NK细胞，或在存在源自所述饲养细胞的质膜颗粒或外来体的情况下温育NK细胞。12.根据权利要求11所述的生成TGF
‑
β抗性NK细胞的方法，其中所述饲养细胞包括PBMC、RPMI8866、HFWT、K562细胞、EBV
‑
LCL、用膜结合的IL
‑
21转染的NK细胞、用膜结合的4
‑
1BBL转染的NK细胞、用膜结合的IL
‑
15和4
‑
1BBL转染的NK细胞、或用膜结合的IL
‑
21和4
‑
1BBL转染的NK细胞。13.根据权利要求11或12所述的生成TGF
‑
β抗性NK细胞的方法，其中所述饲养细胞在其细胞表面上还包含至少一种附加NK细胞效应剂，其中所述至少一种附加NK细胞效应剂是细胞因子、粘附分子或NK细胞活化剂。14.根据权利要求13所述的生成TGF
‑
β抗性NK细胞的方法，其中所述至少一种附加NK细胞效应剂选自4
‑
1BBL、IL
‑
2、IL
‑
12、IL
‑
15、IL
‑
18、IL
‑
21、MICA、LFA
‑
1、2B4、CCR7、OX40L、UBLP2、BCM1/SLAMF2、NKG2D激动剂、CD155、CD112、Jagged1、Jagged2、Delta
‑
1、Pref
‑
1、DNER、Jedi、SOM
‑
11、无翅基因、CCN3、MAGP2、MAGP1、TSP2、YB
‑
1、EGFL7、CCR7、DAP12和DAP10、Notch配体、NKp46激动剂、NKp44激动剂、NKp30激动剂、其他NCR激动剂、CD16激动剂。15.根据权利要求14所述的生成TGF
‑
β抗性NK细胞的方法，其中所述至少一种附加NK细胞效应剂包括IL
‑
21、4
‑
1B...

【专利技术属性】
技术研发人员：D，
申请(专利权)人：全国儿童医院研究所，
类型：发明
国别省市：