盐酸多柔比星脂质体注射液中溶血卵磷脂的检测方法和应用技术

本发明专利技术涉及化学药物分析方法技术领域，尤其是涉及一种盐酸多柔比星脂质体注射液中溶血卵磷脂的检测方法和应用。盐酸多柔比星脂质体注射液中溶血卵磷脂的检测方法，包括如下步骤：采用HPLC

【技术实现步骤摘要】
盐酸多柔比星脂质体注射液中溶血卵磷脂的检测方法和应用


[0001]本专利技术涉及化学药物分析方法
，尤其是涉及一种盐酸多柔比星脂质体注射液中溶血卵磷脂的检测方法和应用。

技术介绍

[0002]盐酸多柔比星脂质体注射液是一种新剂型抗肿瘤药物，在治疗卵巢癌方面具有明显的效果。盐酸多柔比星脂质体是以磷脂和胆固醇为主要成分的纳米微球，将盐酸多柔比星包裹在空腔中，大大减少了盐酸多柔比星与人体正常组织的直接接触，从而显著降低了其毒副作用。
[0003]溶血卵磷脂是盐酸多柔比星脂质体注射液在生产过程和放置过程中磷脂降解产生的有害杂质，从而影响药物的质量。并且溶血卵磷脂具有较强的表面活性，能使红细胞及其它细胞膜破裂，引起溶血或细胞坏死。盐酸多柔比星脂质体注射液降解产生的为溶血卵磷脂(18﹕0)及其异构体，因此盐酸多柔比星脂质体注射液中对于该溶血卵磷脂的控制至关重要。
[0004]陈华等(《药物分析杂志》，2014年第34卷第3期，442
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446页)发表了利用HPLC
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ELSD同时测定丙泊酚注射液中溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的含量的方法，然而该方法虽然能够同时进行溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的检验，但在该方法中，溶血磷脂酰胆碱呈现双峰且不能实现完全分离，不能进行准确定量计算。
[0005]梁亚龙等(《西北药学杂质》，2020年第35卷第1期，49
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52页)发表了利用HPLC
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ELSD测定丙泊酚中/长链脂肪乳注射液中溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的含量的方法，该方法虽运行时长较短(17min)，但所使用的色谱柱为固定色谱柱Lichroshpher 100 DIOL(250mm
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4mm，5μm)，相对较昂贵，且该方法对色谱柱选择耐用性不好。
[0006]公开号为CN114324622A的专利申请公开了一种改进的药物制剂中溶血磷脂酰胆碱的检测方法，该方法采用高效液相色谱法(蒸发光散射检测器)对氟比洛芬酯注射液中溶血磷脂酰胆碱进行检测，其中以二羟基键合硅胶为填充剂，以甲醇
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冰乙酸
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三乙胺
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异丙醇的混合溶液为流动相，通过调节流动相pH值以减缓对色谱柱的损坏。但该方法使用液相正相系统，不适用于液相反相系统。
[0007]因而，开发一种简单、耐用性好且适用于反相液相系统的方法对于盐酸多柔比星脂质体制剂中的溶血卵磷脂的检测十分必要。
[0008]有鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0009]本专利技术的一个目的在于提供盐酸多柔比星脂质体注射液中溶血卵磷脂的检测方法，以解决现有技术中存在的检测方法耐用性差及不适用于反相液相系统等的技术问题。
[0010]本专利技术的另一目的在于提供盐酸多柔比星脂质体注射液中溶血卵磷脂的检测方法在盐酸多柔比星脂质体注射液制剂的质量控制中的应用。
[0011]为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：
[0012]盐酸多柔比星脂质体注射液中溶血卵磷脂的检测方法，包括如下步骤：
[0013]采用HPLC
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ELSD对供试品溶液进行检测；
[0014]所述HPLC
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ELSD的检测条件包括：
[0015]采用流动相A和流动相B进行梯度洗脱；流动相A为体积比为79﹕(7～9)的甲醇和四氢呋喃的混合溶剂，流动相B为水；
[0016]所述梯度洗脱程序如下：
[0017][0018]在本专利技术的具体实施方式中，所述梯度洗脱程序如下：
[0019][0020]本专利技术的盐酸多柔比星脂质体注射液中溶血卵磷脂的检测方法，能够一次性高效的分离溶血磷脂酰胆碱的两异构体峰，这种限量的检测方法有利于制剂的质量控制，保证制剂的有效性。并且，本专利技术所建立的方法准确度高、专属性强、重复性好、耐用性良好。通过对盐酸多柔比星脂质体注射液中溶血卵磷脂的含量控制，提高产品质量。
[0021]如在不同实施方式中，流动相A中，甲醇和四氢呋喃的体积比可以为79﹕7、79﹕7.5、79﹕8、79﹕8.5、79﹕9等等，优选为79﹕(7.5～8.5)，更优选为79﹕8。
[0022]在本专利技术的具体实施方式中，色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱。进一步的，所述色谱柱为Agilent 5 TC
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C18(2)，250mm
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4.6mm，5μm或Waters Symmetry C18，250mm
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4.6mm，5μm。
[0023]在本专利技术的具体实施方式中，色谱柱的柱温为30～40℃。
[0024]如在不同实施方式中，色谱柱的柱温可以为30℃、31℃、32℃、33℃、34℃、35℃、36℃、37℃、38℃、39℃、40℃等等，优选为34～36℃，更优选为35℃。
[0025]在本专利技术的具体实施方式中，所述梯度洗脱的流速为0.8～1.2mL/min，优选为0.9～1.1mL/min，更优选为1mL/min。
[0026]如在不同实施方式中，所述梯度洗脱的流速可以为0.8mL/min、0.85mL/min、0.9mL/min、0.95mL/min、1.0mL/min、1.05mL/min、1.1mL/min、1.15mL/min、1.2mL/min等等。
[0027]在本专利技术的具体实施方式中，蒸发光散射检测器的载气流速为1L/min，蒸发温度为48～52℃。
[0028]如在不同实施方式中，蒸发温度可以为48℃、49℃、50℃、51℃、52℃等等，优选为49～51℃，更优选为50℃。
[0029]在本专利技术的具体实施方式中，所述溶血卵磷脂包括溶血磷脂酰胆碱18﹕0及其异构体。
[0030]在本专利技术的具体实施方式中，所述供试品溶液的制备包括：采用溶剂溶解并稀释供试品，过滤，取续滤液作为供试品溶液；其中，所述溶剂为体积比为3﹕1的甲醇和氯仿的混合溶剂。进一步的，所述稀释的倍数为8～12倍，如10倍。进一步的，所述供试品为盐酸多柔比星脂质体注射液。
[0031]在本专利技术的具体实施方式中，系统适用性溶液的制备包括：采用甲醇溶解溶血磷脂酰胆碱对照品，先加入盐酸溶液于室温下放置2～3h后，再加入氢氧化钠溶液，定容摇匀，得到系统适用性溶液。进一步的，所述系统适用性溶液的制备包括：采用适量甲醇溶解溶血磷脂酰胆碱对照品4mg，先加入1mol/L盐酸溶液5mL，于室温下放置2h后加入1mol/L氢氧化钠溶液5mL，用甲醇稀释至25mL，摇匀。系统适用性溶液的制备可根据实际情况放大或缩小规格。
[0032]在本专利技术的具体实施方式中，所述方法还包括：采用标准曲线法对所述供试品溶液中的溶血卵磷脂的含量进行计算。进一步的，所述方法包括：将溶血磷脂酰胆碱标准系列工作溶液分别注入高效液相色谱仪中，在与所述供试品溶液相同的条件下测定相应的色谱图，以标准系列工作溶液本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.盐酸多柔比星脂质体注射液中溶血卵磷脂的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：采用HPLC
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ELSD对供试品溶液进行检测；所述HPLC
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ELSD的检测条件包括：采用流动相A和流动相B进行梯度洗脱；流动相A为体积比为79﹕(7～9)的甲醇和四氢呋喃的混合溶剂，流动相B为水；所述梯度洗脱程序如下：优选的，所述梯度洗脱程序如下：2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；优选的，所述色谱柱为Agilent 5TC
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C18(2)，250mm
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4.6mm，5μm或Waters Symmetry C18，250mm
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4.6mm，5μm。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，色谱柱的柱温为30～40℃；优选的，所述色谱柱的柱温为34～36℃；更优选的，所述色谱柱的柱温为35℃。4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱的流速为0.8～1.2mL/min；优选的，所述梯度洗脱的流速为0.9～1.1mL/min；
更优选的，所述梯度洗脱的流速为1mL/min。5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，蒸发光散射检测器的载气流速为1L/min；蒸发温度为48～52℃。6.根据权利要求1所述的检测方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：王红芳，聂磊，张辉，王艳，石亮，
申请(专利权)人：山西振东制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：