一种黄芩苷的高效液相色谱检测方法技术

本发明专利技术涉及药物分析技术领域，特别是涉及一种黄芩苷的高效液相色谱检测方法，包括如下步骤：S1、称取适量黄芩苷供试品，用乙醇超声溶解并配制成供试品溶液；S2、将S1所得供试品溶液注入高效液相色谱仪并检测，以流动相A和流动相B作为流动相进行梯度洗脱，并记录色谱图，所述流动相A为磷酸

【技术实现步骤摘要】
一种黄芩苷的高效液相色谱检测方法


[0001]本专利技术涉及药物分析
，特别是涉及一种黄芩苷的高效液相色谱检测方法。

技术介绍

[0002]黄芩苷(分子式C
21
H
18
O
11
)是从唇形科植物黄芩的干燥根中提取分离出来的一种黄酮类化合物，是黄芩的主要有效成分，具有清热燥湿，泻火解毒，止血，安胎的功效，其纯品常温下为淡黄色粉末，其结构式如下：
[0003][0004]中药黄芩被中国药典一部收录，药典中提供了含量测定的检测方法，但未涉及对其有关物质的检测。国家食品药品监督管理局标准(标准号：YBH03902007)黄芩苷(口服用)提供了黄芩苷中有关物质的检测方法，与中国药典一部中黄芩的含量测定方法一致，但实际应用时发现主峰与杂质峰的峰形欠佳，且主峰中疑似有杂质包裹，因此后续使用中无法准确检测黄芩苷的纯度。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种黄芩苷的高效液相色谱检测方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
[0006]本专利技术是通过以下技术方案实现的：
[0007]一种黄芩苷的高效液相色谱检测方法，包括如下步骤：
[0008]S1、称取适量黄芩苷供试品，用甲醇超声溶解并配制成供试品溶液，所述供试品溶液浓度为0.7mg/ml；
[0009]S2、将S1所得供试品溶液注入高效液相色谱仪并检测，以流动相A和流动相B作为流动相进行梯度洗脱，并记录色谱图，色谱条件为：色谱柱采用Agilent Poroshell EC
‑
C18，4.6mm
×
250mm，填料粒径4μm，所述流动相A为磷酸
‑
水溶液，所述流动相B为甲醇
‑
乙腈，其中甲醇和乙腈的体积比为50:50；
[0010]所述梯度洗脱的顺序如下：
[0011]0～20分钟时，流动相为67％流动相A+33％流动相B；
[0012]20～40分钟时，流动相B的比例逐渐由33％加至80％；
[0013]40～45分钟时，流动相为20％流动相A+80％流动相B；
[0014]46～55分钟时，流动相为67％流动相A+33％流动相B。
[0015]作为本专利技术的进一步方案，所述流动相A中磷酸的体积比浓度为0.18～0.22％。
[0016]作为本专利技术的进一步方案，色谱柱的柱温设置为28～32℃。
[0017]作为本专利技术的进一步方案，采用紫外检测器进行检测，检测波长为280nm。
[0018]作为本专利技术的进一步方案，流动相的流速设置为0.9～1.1ml/min。
[0019]作为本专利技术的进一步方案，供试品溶液的进样量为5μl。
[0020]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
[0021]本专利技术采用高效液相色谱法检测黄芩苷，该方法方便快捷，检测结果显示主峰与各杂质峰的峰形良好，分离度良好，后续使用中能够准确检测黄芩苷的纯度。
附图说明
[0022]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例描述所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0023]图1为本专利技术黄芩苷供试品溶液检测得到的色谱图；
[0024]图2为本专利技术对比例1检测得到的色谱图；
[0025]图3为本专利技术对比例2检测得到的色谱图；
[0026]图4为本专利技术对比例3检测得到的色谱图。
具体实施方式
[0027]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0028]若如无特别说明，实施例中所使用的试剂均可容易地从商业公司获取，所用甲醇、乙腈均为色谱纯试剂。
[0029]实施例1：
[0030]本实施例提供了一种黄芩苷的高效液相色谱检测方法，包括如下步骤：
[0031]S1、称取适量黄芩苷供试品，用甲醇超声溶解并配制成供试品溶液，供试品溶液浓度为0.7mg/ml；
[0032]S2、将S1所得供试品溶液注入高效液相色谱仪，供试品溶液的进样量为5μl，采用紫外检测器进行检测，检测波长为280nm，以流动相A和流动相B作为流动相进行梯度洗脱，并记录色谱图。
[0033]其中，色谱柱采用Agilent Poroshell EC
‑
C18，4.6mm
×
250mm，填料粒径4μm，色谱条件为：柱温30℃，流动相的流速设置为1.0ml/min；
[0034]流动相A为0.2％磷酸水溶液，流动相B为甲醇
‑
乙腈，其中甲醇和乙腈的体积比为50:50；
[0035]梯度洗脱的顺序如下表所示：
[0036]时间(min)流动相A(％)流动相B(％)06733
206733402080452080466733556733
[0037]根据上述检测方法，用高效液相色谱仪检测黄芩苷供试品溶液，附图1为所得色谱图。如附图1所示，采用本实施例提供的检测方法，所得色谱图中主峰与各杂质峰的峰形良好，分离度良好。
[0038]对比例1：
[0039]对比例1采用中国药典/国家食品药品监督管理局标准(标准号：YBH03902007)中的检测方法，对黄芩苷进行检测，包括如下步骤：
[0040]S1、称取适量黄芩苷供试品，用甲醇超声溶解并配制成供试品溶液，供试品溶液浓度为0.7mg/ml；
[0041]S2、将S1所得供试品溶液注入高效液相色谱仪，供试品溶液的进样量为10μl，采用紫外检测器进行检测，检测波长为280nm，以甲醇
‑
水
‑
磷酸(47:53:0.2)为流动相进行等度洗脱，并记录色谱图。
[0042]其中，色谱柱采用Kromasil 100
‑
5C18，4.6mm
×
250mm，填料粒径5μm，色谱条件为：柱温30℃，流动相的流速设置为1.0ml/min；
[0043]根据上述检测方法，用高效液相色谱仪检测黄芩苷供试品溶液，附图2为所得色谱图。如附图2所示，采用对比例1提供的检测方法，所得色谱图中主峰与杂质峰的峰形欠佳，主峰中疑似有杂质包裹。
[0044]对比例2：
[0045]对比例2与对比例1的不同之处在于，将对比例1中的等度洗脱替换为梯度洗脱，以流动相A和流动相B作为流动相进行梯度洗脱，其中，流动相A为0.2％磷酸水溶液，流动相B为甲醇，梯度洗脱的顺序如下表所示：
[0046]时间(min)流动相A本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种黄芩苷的高效液相色谱检测方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、称取适量黄芩苷供试品，用甲醇超声溶解并配制成供试品溶液，所述供试品溶液浓度为0.7mg/ml；S2、将S1所得供试品溶液注入高效液相色谱仪并检测，以流动相A和流动相B作为流动相进行梯度洗脱，并记录色谱图，色谱条件为：色谱柱采用Agilent Poroshell EC
‑
C18，4.6mm
×
250mm，填料粒径4μm，所述流动相A为磷酸
‑
水溶液，所述流动相B为甲醇
‑
乙腈，其中甲醇和乙腈的体积比为50:50；所述梯度洗脱的顺序如下：0～20分钟时，流动相为67％流动相A+33％流动相B；20～40分钟时，流动相B的比例...

【专利技术属性】
技术研发人员：张春燕，吉丽峰，裴欣宇，姜春阳，谢军，李惠，
申请(专利权)人：江苏海悦康医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：