一种白背叶标准汤剂中葫芦巴苷Ⅱ的含量测定方法及特征图谱的构建方法技术

本发明专利技术涉及药物分析技术领域，尤其是涉及一种白背叶标准汤剂中葫芦巴苷Ⅱ的含量测定方法及特征图谱的构建方法。采用高效液相色谱法进行测定，所述高效液相色谱法的条件包括：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以体积百分数为0.1～0.3％的甲酸水溶液为流动相B，梯度洗脱。本法专属性强，重复性和耐用性好、稳定性和准确度高；所构建的特征图谱及检测方法可快速、全面实现对白背叶标准汤剂中多组分联合控制的目的，实现了白背叶从药材到制剂上的质量把控，有利于保障临床用药的有效性。床用药的有效性。

【技术实现步骤摘要】
一种白背叶标准汤剂中葫芦巴苷Ⅱ的含量测定方法及特征图谱的构建方法


[0001]本专利技术涉及药物分析
，尤其是涉及一种白背叶标准汤剂中葫芦巴苷Ⅱ的含量测定方法及特征图谱的构建方法。

技术介绍

[0002]白背叶原植物为大戟科野桐属植物白背叶Mallotusapelta(Lour.)Muell.Arg.，其叶、根及根茎兼可入药，药材名分别为白背叶、白背叶根，湖南省中药材标准、广西中药材标准均有收载。广泛分布在广西、云南、湖南、江西、福建、广东、海南等地的山谷灌木林中。其叶具有清热解毒，消肿止痛，祛湿止血等功效，常用于痈疖疮疡，鹅口疮，皮肤湿痒，跌打损伤，外伤出血等症；其根及根茎清热祛湿，收敛消淤，用于癥瘕痞块，白带淋浊，子宫下垂，产后风瘫，肠风泄泻，脱肛，赤眼，喉蛾，耳内流脓。
[0003]文献《白背叶HPLC特征指纹图谱及模式识别》中公开了：采用高效液相色谱法建立12个不同产地白背叶药材的指纹图谱，采用phenomenex
‑
C18色谱柱(4.6mm
×
250mm，5μm)；以甲醇
‑
0.1％冰乙酸水为流动相，梯度洗脱。文献《一测多评法测定白背叶中3个黄酮苷类成分的含量》中公开了：采用高效液相色谱法，使用C18色谱柱(4.6mm
×
250mm，5μm)，流动相为甲醇
‑
0.1％乙酸水溶液，梯度洗脱。以葫芦巴苷Ⅱ为内参物，建立其与夏佛托苷和异夏佛托苷的相对校准因子，计算白背叶药材中夏佛托苷、异夏佛托苷的含量，实现一测多评。同时采用外标法测定白背叶药材中3个黄酮碳苷成分的量。
[0004]以上文献的研究对象均为白背叶药材，与之不同的是，白背叶标准汤剂是由白背叶饮片经水提、浓缩、干燥等而成的冻干粉，与药材和饮片相比，已失去其固有的形态，以及对应的活性成分也有相应的变化。目前只有湖南省中药材标准(2009年版)、广西中药材标准对白背叶药材的显微及薄层鉴别进行了质量控制，难以全面反映其内在质量，而目前对于白背叶高效液相定性及定量检测技术的文献报道非常少。因此，有必要建立一种白背叶标准汤剂的HPLC含量测定及特征图谱方法，为有效控制和较全面评价白背叶标准汤剂的质量提供依据。

技术实现思路

[0005]本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提出一种白背叶标准汤剂中葫芦巴苷Ⅱ的含量测定方法及特征图谱的构建方法，为白背叶标准汤剂的质量和一致性评价提供保障。
[0006]本专利技术的第一方面，提供一种白背叶标准汤剂中葫芦巴苷Ⅱ的含量测定方法，采用外标法，通过高效液相色谱法测定，所述高效液相色谱法的条件包括：
[0007]色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；
[0008]以甲醇为流动相A，以体积百分数为0.1～0.3％的甲酸水溶液为流动相B，梯度洗脱；
[0009]所述梯度洗脱的条件为：
[0010][0011]表中百分号的含义为体积百分数。
[0012]根据本专利技术的一些实施例，所述流动相B为体积百分数为0.1～0.2％的甲酸水溶液；优选体积百分数为0.1％的甲酸水溶液。
[0013]根据本专利技术的一些实施例，所述色谱柱为Agilent Poroshell 120SB
‑
C18。
[0014]根据本专利技术的一些实施例，所述色谱柱的规格为2.1mm
×
150mm，2.7μm。
[0015]根据本专利技术的一些实施例，所述高效液相色谱法的条件还包括：流动相的流速为0.2～0.4mL/min；优选0.3mL/min。
[0016]根据本专利技术的一些实施例，所述高效液相色谱法的条件还包括：色谱柱的柱温为30～35℃；优选30℃。
[0017]根据本专利技术的一些实施例，所述高效液相色谱法的条件还包括：进样量为1～5μL；优选3μL。
[0018]根据本专利技术的一些实施例，所述高效液相色谱法的条件还包括：检测波长为336nm。
[0019]根据本专利技术的一些实施例，所述高效液相色谱法的检测器为二极管阵列检测器。
[0020]根据本专利技术的一些实施例，所述高效液相色谱的理论塔板数按葫芦巴苷Ⅱ峰计算，不低于2000。
[0021]根据本专利技术的一些实施例，所述含量测定方法还包括供试品溶液的制备；所述制备步骤包括：将白背叶标准汤剂供试品与溶剂混合，超声，即得。
[0022]根据本专利技术的一些实施例，所述供试品溶液的质量浓度为1～5mg/mL。
[0023]进一步地，所述试品溶液的溶剂为水或醇水混合溶液。
[0024]更进一步地，所述溶剂为体积百分数为50～70％的甲醇水溶液、体积百分数为50～70％的乙醇水溶液或水；优选地，所述溶剂为体积百分数为50～60％的甲醇水溶液；更优选地，所述溶剂为体积百分数为50％的甲醇水溶液。
[0025]根据本专利技术的一些实施例，本专利技术所述超声条件包括以下i
‑
iii中的至少一项：
[0026]i.功率：400～600W；
[0027]ii.频率：30～50kHz；
[0028]iii.时间：20～40min。
[0029]根据本专利技术的一些实施例，所述含量测定方法还包括对照品溶液的制备，所述制备步骤包括：将对照品与溶剂混合，即得。
[0030]根据本专利技术的一些实施例，所述对照品为葫芦巴苷Ⅱ。
[0031]根据本专利技术的一些实施例，所述对照品溶液的质量浓度为20～100μg/mL。
[0032]进一步地，所述对照品溶液的溶剂为水或醇水混合溶液。
[0033]更进一步地，所述溶剂为体积百分数为50～70％的甲醇水溶液、体积百分数为50～70％的乙醇水溶液或水；优选地，所述溶剂为体积百分数为50～60％的甲醇水溶液；更优选地，所述溶剂为体积百分数为50％的甲醇水溶液。
[0034]本专利技术的第二方面，提供一种白背叶标准汤剂特征图谱的构建方法，将对照品溶液、对照药材溶液和供试品溶液分别经高效液相色谱法测定，标定共有峰，即得；所述高效液相色谱法采用上述的条件。
[0035]根据本专利技术的一些实施例，所述特征图谱包括五个特征峰，其中，以峰1葫芦巴苷Ⅱ为参照峰，计算其余各特征峰与所述参照峰的相对保留时间，所述相对保留时间应在规定值的
±
10％范围之内，所述规定值为：峰2：1.36、峰3：1.48、峰4：1.59、峰5：2.86。
[0036]根据本专利技术的一些实施例，所述对照药材溶液的制备步骤包括：将对照药材与溶剂混合，超声，即得。
[0037]根据本专利技术的一些实施例，所述对照药材溶液的质量浓度为1～5mg/mL。
[0038]根据本专利技术的一些实施例，本专利技术所述溶剂为水或醇水混合溶液；
[0039]根据本专利技术的一些优选的实施例，所述溶剂为体积百分数为50～70％的甲醇水溶液、体积百分数为50～70％的乙醇水溶液或水。优选地，所述溶本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种白背叶标准汤剂中葫芦巴苷Ⅱ的含量测定方法，其特征在于，通过高效液相色谱法测定，所述高效液相色谱法的条件包括：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以体积百分数为0.1～0.3％的甲酸水溶液为流动相B，梯度洗脱；所述梯度洗脱的条件为：2.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，所述甲酸水溶液的体积百分数为0.1～0.2％。3.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的条件还包括以下i
‑
iv中的至少一项：i.流速：0.2～0.4mL/min；ii.柱温：30～35℃；iii.进样量：1～5μL；iv.检测波长：336nm。4.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，理论塔板数按葫芦巴苷Ⅱ峰计算，不低于2000。5.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，还包括供试品溶液和对照品溶液的制备；优选地，所述供试品溶液的质量浓度为1～5mg/mL；优选地，所述对照品溶液的质量浓度为20～100μg/mL。6.根据权利要求5...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈曙，欧阳习叶，费翔，周开发，刘汝佳，陈洁，沈帆顺，唐正平，彭佳莉，杨紫觉，
申请(专利权)人：湖南春光九汇现代中药有限公司，
类型：发明
国别省市：