一种多糖纳米剂型的制备方法和应用技术

一种多糖纳米剂型的制备方法和应用，属于食品与医药领域，具体方案包括以下步骤：步骤一、将多糖溶于去离子水中得到溶液A；步骤二、在搅拌的条件下将无水乙醇逐滴加到溶液A中，继续搅拌，得到悬浮液B；步骤三、将悬浮液B离心分离，沉淀物即为多糖纳米剂型；所述多糖为黑松露多糖、红乳牛肝菌多糖或红菇多糖。本发明专利技术制备的黑松露多糖纳米剂型可以显著促进巨噬细胞增殖，对小鼠正常肝细胞具有辐射防护效果，具有蛋白吸附效果好、稳定性强等优点，可以有效解决生物大分子多糖在食品与医药领域中生物利用度低的问题。生物利用度低的问题。生物利用度低的问题。

【技术实现步骤摘要】
一种多糖纳米剂型的制备方法和应用


[0001]本专利技术属于食品与医药领域，具体涉及一种多糖纳米剂型的制备方法和应用。
技术背景
[0002]多糖作为构成生命体的基本物质之一，广泛存在于各种生物中，其具有经济、安全、副作用少、生物活性广泛等优点，目前被广泛应用于医药及功能食品领域。红乳牛肝菌作为一种食用真菌，具有良好的抗氧化、抗炎活性。红乳牛肝菌多糖(SBP)表现出良好的抗炎、辐射防护活性。红菇是一种药食同源真菌，红菇多糖(RVP)具有抗氧化、抗炎、降血糖等活性。黑松露作为一种名贵的药食同源型真菌，具有多种广泛的药理活性。黑松露多糖(TP)作为黑松露子实体富含的主要活性物质之一，表现出优异的抗氧化、抗炎、免疫调节等生物活性。相比于一些中草药来源的生物多糖，TP还具有毒副作用小、生物安全性好等优点。但是以上多糖分子量庞大，可达数万甚至百万Da。巨大的分子量、松散的分子结构导致其难以透过细胞屏障被机体吸收利用，使其生物利用度较低，阻碍其在生物与医药领域的高效应用。

技术实现思路

[0003]本专利技术为了解决TP、SBP、RVP的生物利用度低、体内生物活性差的问题，提供一种多糖纳米剂型的制备方法和应用。
[0004]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案如下：
[0005]一种多糖纳米剂型的制备方法，包括以下步骤：
[0006]步骤一、将多糖溶于去离子水中得到溶液A；
[0007]步骤二、在搅拌的条件下将无水乙醇逐滴加到溶液A中，继续搅拌，得到悬浮液B；
[0008]步骤三、将悬浮液B离心分离，沉淀物即为多糖纳米剂型；所述多糖为黑松露多糖、红乳牛肝菌多糖或红菇多糖。
[0009]进一步的，步骤一中，多糖与去离子水的质量体积比为10
‑
20mg/mL。
[0010]进一步的，步骤二中，溶液A与无水乙醇的体积比为1:5
‑
1:20。
[0011]进一步的，步骤三中，沉淀物使用无水乙醇洗涤。
[0012]进一步的，步骤一中，多糖的制备方法包括以下步骤：
[0013]步骤1、以脱脂的黑松露粉末、红乳牛肝菌粉末或红菇粉末为原料，超纯水为溶剂，混合均匀后进行水浴提取，提取温度为90℃，提取时间为2h，得到提取液C；
[0014]步骤2、将提取液C经过离心分离得到上清液，上清液经过抽滤、浓缩得到浓缩液D；
[0015]步骤3、向浓缩液D中加入体积分数为95％的乙醇，于4℃环境下静置12h醇沉，随后离心分离，获得沉淀物，沉淀物加水复溶后经过7000Da透析袋透析36h，将透析后的溶液真空冷冻干燥，相应的获得黑松露多糖、红乳牛肝菌多糖或红菇多糖。
[0016]进一步的，步骤1中，原料与溶剂的料液比为1:30g/mL。
[0017]进一步的，步骤3中，浓缩液D与体积分数为95％的乙醇的体积比为1:4。
[0018]进一步的，步骤1中，脱脂的步骤为：将粉碎的黑松露粉末、红乳牛肝菌粉末或红菇粉末用体积分数为95％的乙醇浸泡，抽滤后舍弃滤液，将滤渣烘干，相应的得到脱脂后的黑松露粉末、红乳牛肝菌粉末或红菇粉末，其中，粉碎的黑松露粉末、红乳牛肝菌粉末或红菇粉末与体积分数为95％的乙醇的料液比为1:30g/mL。
[0019]一种所述的多糖纳米剂型的应用，所述多糖纳米剂型应用在辐射防护食品中。相比于现有技术，本专利技术具有如下优点：
[0020]有益效果：本专利技术与现有技术相比具有如下优势：
[0021]1、本专利技术制备的TP纳米剂型TP
‑
NPs、SBP纳米剂型SBP
‑
NPs、RVP纳米剂型RVP
‑
NPs主要依靠分子间氢键等非共价作用力结合，不涉及化学改建，产物可控、绿色、安全。
[0022]2、本专利技术制备的TP纳米剂型TP
‑
NPs、SBP纳米剂型SBP
‑
NPs、RVP纳米剂型RVP
‑
NPs具有较小的尺寸、均匀的球状形貌，同时其具有较强的pH稳定性、温度稳定性及离子强度稳定性。
[0023]3、本专利技术制备的TP纳米剂型TP
‑
NPs、SBP纳米剂型SBP
‑
NPs、RVP纳米剂型RVP
‑
NPs可以显著提升其对正常肝细胞AML
‑
12的辐射防护能力以及对巨噬细胞RAW 264.7的促增殖能力。
附图说明
[0024]图1中，A、B、C、D分别为TP及不同条件下制备的TP
‑
NPs(NP
‑
1、NP
‑
2、NP
‑
3)的SEM微观形貌图；
[0025]图2中，A为TP及TP
‑
NPs(NP
‑
1、NP
‑
2、NP
‑
3)的FT
‑
IR图谱；B为TP及TP
‑
NPs(NP
‑
1、NP
‑
2、NP
‑
3)的XRD图谱；
[0026]图3为TP及TP
‑
NPs(NP
‑
1、NP
‑
2、NP
‑
3)对RAW 264.7细胞增殖能力的影响效果图，其中脂多糖(LPS)作为阳性对照；
[0027]图4中，A、B分别为TP及TP
‑
NPs(NP
‑
1、NP
‑
2、NP
‑
3)对AML
‑
12细胞的安全性和辐射防护能力效果图，NC代表空白对照组，IR代表辐照模型组；
[0028]图5为TP及TP纳米颗粒NP
‑
3对蛋白质的吸附能力效果图；
[0029]图6中，A、B、C分别为NP
‑
3的pH、温度、离子强度稳定性效果图。
具体实施方式
[0030]下面结合实施例对本专利技术的技术方案作进一步的说明，但并不局限于此，凡是对本专利技术技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本专利技术技术方案的精神和范围，均应涵盖在本专利技术的保护范围中。下述实施例中所使用的实验方法若无特殊说明，均为常规方法。
[0031]具体实施方式一
[0032]本专利技术提供一种多糖纳米剂型的制备方法，用以解决黑松露多糖(TP)、红乳牛肝菌多糖(SBP)、红菇多糖(RVP)的生物利用度低、体内生物活性差的问题，该方法制备的多糖纳米剂型主要依靠TP、SBP、RVP中各自的分子间氢键结合，依靠非共价作用力组装而成。该方法制备的纳米剂型具有尺寸小、稳定性强、生物利用度高等优点，可以有效解决生物与医药领域中，多糖类生物大分子因分子量过大导致的生物利用度低、体内活性差等问题。
[0033]具体方案如下：
[0034]一种多糖纳米剂型的制备方法，包括以下步骤：...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多糖纳米剂型的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、将多糖溶于去离子水中得到溶液A；步骤二、在搅拌的条件下将无水乙醇逐滴加到溶液A中，继续搅拌，得到悬浮液B；步骤三、将悬浮液B离心分离，沉淀物即为多糖纳米剂型；所述多糖为黑松露多糖、红乳牛肝菌多糖或红菇多糖。2.根据权利要求1所述的多糖纳米剂型的制备方法，其特征在于：步骤一中，多糖与去离子水的质量体积比为10
‑
20mg/mL。3.根据权利要求1所述的多糖纳米剂型的制备方法，其特征在于：步骤二中，溶液A与无水乙醇的体积比为1:5
‑
1:20。4.根据权利要求1所述的多糖纳米剂型的制备方法，其特征在于：步骤三中，沉淀物使用无水乙醇洗涤。5.根据权利要求1所述的多糖纳米剂型的制备方法，其特征在于：步骤一中，多糖的制备方法包括以下步骤：步骤1、以脱脂的黑松露粉末、红乳牛肝菌粉末或红菇粉末为原料，超纯水为溶剂，混合均匀后进行水浴提取，提取温度为90℃，提取时间为2h，得到提取液C；步骤2、将提取液C经过离心分离得到上清液，上清液经过抽滤、浓缩得到浓缩液D；步骤3、向浓缩液D中加...

【专利技术属性】
技术研发人员：伊娟娟，鲁吉珂，刘永奇，刘可可，康巧珍，王小龙，李雪，高航，
申请(专利权)人：郑州大学，
类型：发明
国别省市：