一种改善CAR-T细胞群的持久性的方法技术

本发明专利技术涉及医学领域，特别是涉及一种利用太空环境或模拟微重力环境改善CAR

【技术实现步骤摘要】
一种改善CAR
‑
T细胞群的持久性的方法


[0001]本专利技术涉及医学领域，特别是涉及一种利用太空环境或模拟微重力环境改善CAR
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T细胞群（尤其是靶向前列腺癌特异性膜抗原PSMA 的CAR
‑
T细胞群）的持久性的方法、及通过所述方法获得的CAR
‑
T细胞在制备抗肿瘤药物中的应用。

技术介绍

[0002]前列腺癌是男性泌尿生殖系统最常见的肿瘤之一。传统的前列腺癌治疗方法包括根治性前列腺切除、放疗、化疗和雄激素剥夺疗法。这些疗法虽然具有一定疗效，但对大部分患者的病情缓解作用仍十分有限。因此，对前列腺癌患者的治疗是长期以来未满足的医疗需求。
[0003]CAR是一种合成分子，由细胞外肿瘤抗原结合结构域、以及与之相连的铰链、跨膜和细胞内信号结构域组成，其通过特异性识别肿瘤细胞上表达的表面蛋白，诱导针对肿瘤细胞的T细胞反应，以根除肿瘤。表达CAR的T细胞（即，CAR
‑
T细胞）可以通过CAR多肽胞外结构域的单链可变片段（single chain variable fragment, scFv）直接识别肿瘤相关抗原,然后被胞内信号转导激活,释放多种细胞因子、穿孔素、颗粒酶、干扰素等, 诱导肿瘤细胞凋亡。
[0004]与前列腺癌相关的一个抗原是前列腺特异性膜抗原 (PSMA)，其是一种已被充分描述的肿瘤相关抗原。 已经报道，PSMA 表达水平在正常和癌性前列腺组织之间存在显著区别。因此，PSMA被提出作为CAR
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T细胞的一个理想靶抗原。该靶点的选择在一定程度上改进了基于 CAR 的疗法在前列腺癌治疗中的疗效。但已有的临床前和临床证据表明，CAR
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T细胞易衰竭，持久性差，这限制了该免疫疗法的有效性。参见例如，doi:10.1158/0008
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5472.CAN
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05
‑
0436，“Targeted Elimination of Prostate Cancer by Genetically Directed Human T Lymphocytes”， 2005；和Robbins PF等，Cutting Edge: Persistence of Transferred Lymphocyte Clonotypes Correlates With Cancer Regression in Patients Receiving Cell Transfer Therapy. J Immunol (2004) 173:7125
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30. doi: 10.4049/jimmunol.173.12.7125。
[0005]既往的研究已经指出，太空微重力环境能够影响生物的许多特征，例如生长速率、细胞形态、细胞代谢水平。因此，已经提出应用太空环境或模拟的微重力环境来开发新物种和新医药产品。然而，尚未有太空环境或模拟的微重力环境在CAR
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T细胞上应用和相关应用效果的任何报道。

技术实现思路

[0006]干细胞样记忆性T细胞(stem like memory T cells, Tscm)和中央记忆T细胞(central memory T cells, Tcm)具有抗原特异性记忆、接触抗原后自我更新、和体内长期存活等特点。已经报道CAR
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T细胞群中Tscm和Tcm记忆细胞亚群与CAR
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T细胞的体内持久性相关，并提出增加Tscm和Tcm记忆细胞亚群比例在CAR
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T细胞的临床应用中价值。参见，
Chimeric antigen receptor T cell persistence and memory cell formation，Immunology & Cell Biology 2019; 97: 664
–
674。本专利技术人在探索太空环境对CAR
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T细胞的细胞表型/功能的影响过程中，令人惊奇地发现，太空环境可以有效地促进靶向前列腺癌特异性膜抗原PSM的CAR
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T细胞群中Tscm/Tcm样细胞亚群的占比，增强CAR
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T细胞的持久性。考虑到太空环境干扰/降低宇航员免疫功能或来自其的淋巴细胞的免疫功能的已有报道，本专利技术人的上述发现是尤其令人惊奇的。
[0007]因此，在第一个方面，本专利技术提供了一种改善CAR
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T细胞群（尤其是，靶向前列腺癌特异性膜抗原(PSMA)的CAR
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T细胞群）的持久性的方法，所述方法包括：在太空环境或模拟微重力环境中维持所述CAR
‑
T细胞群，由此，相比于未接受所述处理的对照CAR
‑
T细胞群，获得具有增加持久性的CAR
‑
T细胞群（CAR
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T
‑
S细胞群）。在本文中，经太空环境或模拟微重力环境处理的CAR
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T细胞群也简称“CAR
‑
T
‑
S细胞”，或在靶抗原为PSMA时，称作
ꢀ“
PSMA
‑
CAR
‑
T
‑
S细胞群”。
[0008]在第二方面，本专利技术提供了一种增加CAR
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T细胞群中的Tscm和/或Tcm比例或两者比例之和的方法，包括，(a) 获得包含并表达嵌合抗原受体(CAR)多肽的CAR
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T细胞群；(b) 在太空环境或模拟微重力环境中维持所述CAR
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T细胞群，由此，相比于未接受所述处理的对照CAR
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T细胞群，获得具有增加的Tscm和/或Tcm比例的CAR
‑
T细胞群（CAR
‑
T
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S细胞群）。在一些实施方案中，除步骤(b)外，所述方法的其余步骤均在正常重力环境(即，具有地球等同重力的环境)中进行。
[0009]在第三方面，本专利技术也提供太空环境或模拟微重力用于改善CAR
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T细胞群的持久性的用途、用于增加CAR
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T细胞群的Tscm和/或Tcm比例或两者比例之和的用途、或用于提高CAR
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T细胞群的存活率和/或逆转或延迟T细胞耗竭的用途。
[0010]在上述本专利技术方法或用途的一些实施方案中，优选地，通过轨道太空飞行，实现在太空环境中维持所述CAR
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T细胞群。
[0011]在第四方面，本专利技术提供了通过本专利技术方法获得的CAR
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T
‑
S细胞群(尤其是，PSMA
‑
CAR
‑
T
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S细胞群)。在一些实施方案中，所述CAR
‑
T
‑
S细本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种改善CAR
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T细胞群的持久性的方法，其特征在于，所述方法包括：在太空环境或模拟微重力环境中维持所述CAR
‑
T细胞群，由此，相比于未接受所述处理的对照CAR
‑
T细胞群，获得具有增加持久性的CAR
‑
T
‑
S细胞群。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在太空环境或模拟微重力环境下维持所述CAR
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T细胞群至少24小时、至少48小时或至少72小时。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在太空环境或模拟微重力环境下维持所述CAR
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T细胞群1
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5天。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在太空环境或模拟微重力环境下维持所述CAR
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T细胞群3天。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述CAR
‑
T
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S细胞群，相比于所述对照CAR
‑
T细胞群，在接触靶抗原后，具有增加的Tscm比例和/或Tcm比例。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述CAR
‑
T
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S细胞群，相比于所述对照CAR
‑
T细胞群，在接触靶抗原后，具有增加的Tscm和Tcm比例之和，其中，相比于所述对照CAR
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T细胞群，所述Tscm和Tcm比例之和增加至少0.5倍、1倍、1.5倍、2.0倍、2.5倍或3倍。7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述Tscm和所述Tcm是CD3
+ T细胞。8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述Tscm和所述Tcm是CD3
+ CD8
+ T细胞。9.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，在接触靶抗原后，通过流式细胞术检测CAR
‑
T
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S细胞群中的Tscm和Tcm细胞亚群比例。10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述CAR
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T细胞群中的CAR
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T细胞包含嵌合抗原受体(CAR)多肽，其中所述嵌合抗原受体多肽从N端到C端包含：
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任选的，信号肽，
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特异性结合前列腺癌特异性膜抗原(PSMA)的单链scFv抗体，
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CD8或CD28跨膜结构域，
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任选的，CD28和/或4
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1BB共刺激结构域，和
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CD3ζ信号传导结构域。11.一种增加CAR
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T细胞群中的Tscm和/或Tcm比例或两者比例之和的方法，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟晓松，张莹，
申请(专利权)人：卡瑞济北京生命科技有限公司，
类型：发明
国别省市：