一种基于磁珠的核酸快速提取方法技术

本发明专利技术公开了一种基于磁珠的核酸快速提取方法，涉及生物技术领域，该核酸快速提取方法采用核酸提取试剂盒，所述核酸提取试剂盒包括裂解液、磁珠、洗涤液、洗脱液、核酸保护剂以及深孔板、磁棒套，所述深孔板包括盒面板、凹面、孔头、螺纹接头、软试管、扭簧、支撑板、底板、限位板、限位槽、延伸板和磁条，所述盒面板的表面开设有凹面，所述底板的表面还开设有限位槽。该基于磁珠的核酸快速提取方法，软试管具有柔软性可以实现折叠，而支撑板通过扭簧可以旋转至凹面内部，且盒面板的外口尺寸与限位板的内口尺寸相适配，由此可使的盒面板以及折叠后的软试管放置于限位板之间，由此可大大降低该深孔板的体积，以便进行大批量的运输。以便进行大批量的运输。以便进行大批量的运输。

【技术实现步骤摘要】
一种基于磁珠的核酸快速提取方法


[0001]本专利技术涉及生物
，具体为一种基于磁珠的核酸快速提取方法。

技术介绍

[0002]磁珠法核酸提取，具有传统DNA提取方法无法比拟的优势，目前已有配合96孔深孔板的核酸自动提取仪，用一个样品的提取时间即可实现对96个样品的处理，其原理是运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后，制备成超顺磁性氧化硅纳米磁珠，该磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合，利用二氧化硅包被的纳米磁性微球的超顺磁性，在Chaotropic盐（盐酸胍、异硫氰酸胍等）和外加磁场的作用下，能从血液、动物组织、食品、病原微生物等样本中分离出DNA和RNA。
[0003]现有的磁珠法核酸提取方法所用的深孔板为塑料材质，具体的即在方形的硬质塑料上设置有96个管位，由于管位的设置导致深孔板体积大大增加，在固定储存空间下所能储存的深孔板的数量是有限的，在保持运输成本不增加的情况下无法大批量运输深孔板，如何在保持运输成本低廉的同时进行大批量深孔板的运输也是提高核酸提取速度的一大因素。

技术实现思路

[0004]针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种基于磁珠的核酸快速提取方法，解决了上述
技术介绍
中提出的问题。
[0005]为实现以上目的，本专利技术通过以下技术方案予以实现：一种基于磁珠的核酸快速提取方法，该核酸快速提取方法采用核酸提取试剂盒，所述核酸提取试剂盒包括裂解液、磁珠、洗涤液、洗脱液、核酸保护剂以及深孔板、磁棒套，所述深孔板包括盒面板、凹面、孔头、螺纹接头、软试管、扭簧、支撑板、底板、限位板、限位槽、延伸板和磁条，所述盒面板的表面开设有凹面，且盒面板的底部阵列有孔头，所述孔头的外壁螺纹连接有螺纹接头，且螺纹接头的底部固定有软试管，所述盒面板的两侧设置有扭簧，且扭簧的外壁连接有支撑板，所述盒面板的下方平行设置有底板，且底板的表面两侧设置有限位板，所述底板的表面还开设有限位槽，且限位槽位于限位板之间，所述支撑板的内部滑动连接有延伸板，且延伸板的端部固定有磁条。
[0006]进一步的，所述软试管与限位槽呈一对一对应设置，且软试管的底端位于限位槽内部。
[0007]进一步的，所述支撑板通过扭簧与盒面板弹性连接，且支撑板的侧面与限位板的内侧面相贴合。
[0008]进一步的，所述盒面板的外口尺寸与限位板的内口尺寸相适配，且盒面板通过凹面构成“凹”型状结构。
[0009]进一步的，所述裂解液成分按质量体积比包括如下成分：0.1177% Tris，1.753% NaCl，0.1862% EDTA
·
2Na，5% PEG6000，41.36% 异硫氰酸
胍和体积比5% TritonX
‑
100，pH为8.5，其中Tris中文名为三羟甲基氨基甲烷其分子式为(HOCH2)3CNH2，NaCl中文名为氯化钠，EDTA
·
2Na中文名为乙二胺四乙酸二钠，PEG6000中文名聚乙二醇6000其分子式以HO(CH2CH2O)nH表示，其中n代表氧乙烯基的平均数，TritonX
‑
100中文名为聚乙二醇辛基苯基醚其是一种非离子型表面活性剂。
[0010]进一步的，所述洗涤液选用浓度80%的乙醇。
[0011]进一步的，所述洗脱液选用经过DEPC处理的超纯水。
[0012]进一步的，所述核酸保护剂选用质量体积比为14.34%的三(2
‑
羧乙基)膦盐酸盐。
[0013]进一步的，所述磁棒套用于插入软试管内部。
[0014]进一步的，所述核酸快速提取方法的具体步骤如下：步骤一：于软试管内部加入裂解液，然后再在软试管内部加入咽拭子样本，其中若需获得科研级别RNA，需再加入核酸保护液；步骤二：磁棒套插入软试管内部，然后利用磁棒吸取磁珠并穿过磁棒套将磁珠加入软试管内部，再在摄氏度的条件下将软试管内部的试剂混匀，此时RNA会从样本中释放并吸附在磁珠表面；步骤三：再次利用磁棒取出吸附有RNA的磁珠，磁珠经过洗涤液去除多余杂质后，放入洗脱液中，在摄氏度的条件下RNA溶解在洗脱液中，从而完成RNA的提取。
[0015]本专利技术提供了一种基于磁珠的核酸快速提取方法，具备以下有益效果：1．该基于磁珠的核酸快速提取方法，裂解液使细胞裂解，并释放出核酸，同时在核酸保护剂的辅助下抑制核酸酶，保护核酸不被核酸酶水解；在高盐低PH的环境下，磁珠表面的硅胶高效吸附释放的核酸；用洗涤液洗涤磁性粒子，去除蛋白、盐等杂质；在低盐高PH的环境下，用洗脱液使硅胶释放吸附的核酸，从而快速分离纯化核酸，从而有利于提高核酸提取速度。
[0016]2．该基于磁珠的核酸快速提取方法，软试管具有柔软性可以实现折叠，而支撑板通过扭簧可以旋转至凹面内部，且盒面板的外口尺寸与限位板的内口尺寸相适配，由此可使的盒面板以及折叠后的软试管放置于限位板之间，由此可大大降低该深孔板的体积，以便进行大批量的运输。
[0017]3.该基于磁珠的核酸快速提取方法，孔头内部插入有栓塞以封闭软试管内部，在支撑板通过扭簧可以旋转至凹面内部时，可以将延伸板从支撑板内部拉出，此时两个延伸板相互靠近并通过磁条相互吸附，此设置有利于加强孔头的封闭效果。
[0018]4．该基于磁珠的核酸快速提取方法，人工旋转支撑板使其底部侧面进入限位板内部，此时基于扭簧的弹性回转作用支撑板被稳定安置于底板上，且此时软试管复位呈笔直状，且软试管底部位于限位槽内部以提高笔直程度，防止软试管因其柔软性发生弯曲。
[0019]5.该基于磁珠的核酸快速提取方法，软试管通过螺纹接头与孔头螺纹连接，此设置后期可对出现破损的软试管进行单独替换，以防止单一试管破损就要丢弃整个深孔板的情况产生。
附图说明
[0020]图1为本专利技术深孔板的软试管正视结构示意图；图2为本专利技术深孔板的底板俯视结构示意图；
图3为本专利技术深孔板的盒面板俯视结构示意图。
[0021]图中：1、盒面板；2、凹面；3、孔头；4、螺纹接头；5、软试管；6、扭簧；7、支撑板；8、底板；9、限位板；10、限位槽；11、延伸板；12、磁条。
具体实施方式
[0022]下面结合附图和实施例对本专利技术的实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本专利技术，但不能用来限制本专利技术的范围。
[0023]如图1
‑
3所示，本专利技术提供一种技术方案：一种基于磁珠的核酸快速提取方法，核酸快速提取方法采用核酸提取试剂盒，核酸提取试剂盒包括裂解液、磁珠、洗涤液、洗脱液、核酸保护剂以及深孔板、磁棒套，深孔板包括盒面板1、凹面2、孔头3、螺纹接头4、软试管5、扭簧6、支撑板7、底板8、限位板9、限位槽10、延伸板11和磁条12，盒面板1的表面开设有凹面2，且盒面板1的底部阵列有孔头3，孔头3的外壁螺纹连接有螺纹接头4，且螺纹接头4的底部固定有软试管5，盒面板1的两侧设置有扭簧6，且扭簧6的外壁连接有支撑板7，盒面板1的下方平行设置有底板8，且本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于磁珠的核酸快速提取方法，其特征在于：该核酸快速提取方法采用核酸提取试剂盒，所述核酸提取试剂盒包括裂解液、磁珠、洗涤液、洗脱液、核酸保护剂以及深孔板、磁棒套，所述深孔板包括盒面板（1）、凹面（2）、孔头（3）、螺纹接头（4）、软试管（5）、扭簧（6）、支撑板（7）、底板（8）、限位板（9）、限位槽（10）、延伸板（11）和磁条（12），所述盒面板（1）的表面开设有凹面（2），且盒面板（1）的底部阵列有孔头（3），所述孔头（3）的外壁螺纹连接有螺纹接头（4），且螺纹接头（4）的底部固定有软试管（5），所述盒面板（1）的两侧设置有扭簧（6），且扭簧（6）的外壁连接有支撑板（7），所述盒面板（1）的下方平行设置有底板（8），且底板（8）的表面两侧设置有限位板（9），所述底板（8）的表面还开设有限位槽（10），且限位槽（10）位于限位板（9）之间，所述支撑板（7）的内部滑动连接有延伸板（11），且延伸板（11）的端部固定有磁条（12）。2.根据权利要求1所述的一种基于磁珠的核酸快速提取方法，其特征在于：所述软试管（5）与限位槽（10）呈一对一对应设置，且软试管（5）的底端位于限位槽（10）内部。3.根据权利要求1所述的一种基于磁珠的核酸快速提取方法，其特征在于：所述支撑板（7）通过扭簧（6）与盒面板（1）弹性连接，且支撑板（7）的侧面与限位板（9）的内侧面相贴合。4.根据权利要求1所述的一种基于磁珠的核酸快速提取方法，其特征在于：所述盒面板（1）的外口尺寸与限位板（9）的内口尺寸相适配，且盒面板（1）通过凹面（2）构成“凹”型状结构。5.根据权利要求1所述的一种基于磁珠的核酸快速提取方法，其特征在于：所述裂解液成分按质量体积比包括如下成分：0.1177% Tris，1.753% NaCl，0.1862% EDTA
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2Na，5% PEG6000，41.36% ...

【专利技术属性】
技术研发人员：李耀，周济，杨燚，汪同同，
申请(专利权)人：江苏昱安生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：