本发明专利技术公开了一种兼容多种样本的快速核酸提取或纯化试剂盒，包括磁珠混合液、裂解液、洗涤液以及洗脱液，所述提取试剂盒中含有丝氨酸蛋白酶溶液，所述丝氨酸蛋白酶溶液的浓度为1mg/mL～10mg/mL。本发明专利技术通过对试剂盒体系进行设计，使得该试剂盒能够兼容大部分含核酸的待提取样本，如血清、粪便、血浆、拭子洗液、病毒培养物等，同时该试剂盒可配合自动化运行程序，裂解效率高，在提取过程中无需离心等操作，操作简单，提高了提取效率。提高了提取效率。
【技术实现步骤摘要】
一种兼容多种样本的快速核酸提取或纯化试剂盒
[0001]本专利技术涉及分子生物学检测
，特别涉及一种兼容多种样本的快速核酸提取或纯化试剂盒。
技术介绍
[0002]核酸提取作为分子诊断领域的重要组成部分，其结果对下游检测有很大的影响；核酸提取的主要过程包括：通过裂解液裂解样本中细胞或者病原体等，将细胞或病原体中的核酸裸露在裂解液中，通过一种或多种介质吸附裸露的核酸复合物，再通过洗涤液对杂质进行清洗达到纯化核酸的目的，最后使用洗脱液将得到的核酸从吸附介质中洗脱下来。
[0003]目前最常用的核酸提取方法是磁珠吸附法和硅胶膜吸附柱法。硅胶膜吸附柱法处理小批量样本时快速简便，获得的核酸纯度高，但是对小片段DNA或RNA提取效率不高，而且不适用于自动化提取流程，大批量样本处理时费时费力。
[0004]磁珠法核酸提取方法是指以超顺磁性氧化硅纳米磁性微珠(以下简称磁珠)为载体，通过磁珠吸附核酸，经过磁性分离和漂洗杂质后，核酸从磁珠表面解吸附的原理进行核酸提取的方法。该方法不需离心，操作简单，便于高通量、自动化操作，可以使核酸提取效率显著升高，可同时吸附大部分片段大小的DNA和RNA。已成为目前市场主流的核酸提取技术。
[0005]但是目前磁珠法核酸提取也存在一些问题，市面上的核酸提取或纯化试剂盒，存在针对不同样本的核酸提取，需要匹配不同类型的提取或纯化试剂盒，现有试剂盒对样本的兼容性不够，同时针对复杂样本的处理能力不够，需要对复杂样本进行一定的前处理后才能进行自动化提取。因此，亟需一种通用型核酸提取或纯化试剂盒，以适应不同样本核酸的提取。
技术实现思路
[0006]本专利技术的专利技术目的在于：针对上述存在的问题，提供一种兼容多种样本的快速核酸提取或纯化试剂盒，能够兼容多种样本的核酸提取，克服了现有核酸提取试剂盒对样本的兼容性不够、处理能力不足的问题。
[0007]为了解决上述存在的问题，本专利技术采用的技术方案如下：一种兼容多种样本的快速核酸提取或纯化试剂盒，包括磁珠混合液、裂解液、洗涤液、洗脱液以及丝氨酸蛋白酶溶液，所述丝氨酸蛋白酶溶液的浓度为1mg/mL～10mg/mL，例如可以为1mg/mL、1.5mg/mL、2mg/mL、3mg/mL、3.5mg/mL、4mg/mL、4.5mg/mL、5mg/mL、5.5mg/mL、6mg/mL、7mg/mL、8mg/mL、9mg/mL、10mg/mL等，丝氨酸蛋白酶溶液的浓度过低或过高时，试剂盒对于样本的核酸提取效果均较差，对后续核酸检测结果产生明显地负面影响。
[0008]在本专利技术中，所述丝氨酸蛋白酶溶液来自从白色念珠菌分离出来的强力蛋白溶解酶，具有很高的比活性，其优选浓度为5mg/mL，例如可以直接使用商品化蛋白酶K溶液。
[0009]在本专利技术中，所述磁珠混合液的官能团包括但不限于氨基、羟基、羧基、硅羟基中的一种，优选为硅羟基。进一步，磁珠混合液的浓度为10mg/mL～20mg/mL，例如可以是10mg/
mL、12mg/mL、14mg/mL、14.5mg/mL、15mg/mL、16mg/mL、17mg/mL、18mg/mL、19mg/mL、20mg/mL等，优选为15mg/mL。
[0010]在本专利技术中，所述裂解液包括1mmol/L～100mmol/L(例如可以是1mmol/L、5mmol/L、10mmol/L、15mmol/L、20mmol/L、50mmol/L、60mmol/L、80mmol/L、100mmol/L等)的柠檬酸钠、5mmol/L～50mmol/L(例如可以是5mmol/L、10mmol/L、15mmol/L、20mmol/L、40mmol/L、50mmol/L等)的EDTA、0.5mol/L～2.5mol/L(例如可以是0.5mol/L、1.0mol/L、1.5mol/L、1.8mol/L、2.0mol/L、2.5mol/L等)的NaCl、0.5mol/L～5.0mol/L(例如可以是0.5mol/L、1mol/L、1.5mol/L、2.5mol/L、3mol/L、4mol/L、5mol/L等)的盐酸胍，质量百分含量为0.5％～5％(例如可以是0.5％、1％、1.5％、2％、3％、5％等)的月桂醇聚氧乙烯醚、质量百分含量为1％～4％(例如可以是1％、1.5％、1.8％、2％、2.5％、3％、4％等)的Span
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80(司盘80乳化剂)。
[0011]进一步，在所述裂解液中，柠檬酸钠的浓度优选为20mmol/L、40mmol/L、60mmol/L、80mmol/L中的一种；EDTA的浓度优选为10mmol/L、15mmol/L、20mmol/L、25mmol/L中的一种；NaCl的浓度优选为0.6mol/L、1.3mol/L、1.9mol/L、2.0mol/L中的一种；盐酸胍的浓度优选为0.5mol/L、1.0mol/L、1.5mol/L、2.5mol/L、3.5mol/L、5.0mol/L中的一种；月桂醇聚氧乙烯醚的质量百分含量优选为0.8％、1.6％、2％、4％中的一种，Span
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80的质量百分含量优选为1.0％、1.5％、2.5％、3.5％中的一种。
[0012]在本专利技术中，所述洗涤液包括10mmol/L～100mmol/L(例如可以是10mmol/L、15mmol/L、20mmol/L、50mmol/L、60mmol/L、80mmol/L、100mmol/L等)的柠檬酸钠、5mmol/L～20mmol/L(例如可以是5mmol/L、10mmol/L、15mmol/L、20mmol/L等)的EDTA、0.5mol/L～2.0mol/L(例如可以是0.5mol/L、1.0mol/L、1.5mol/L、1.8mol/L、2.0mol/L等)的NaCl、质量百分含量为0.1％～0.5％(例如可以是0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％等)的月桂醇聚氧乙烯醚、0.5mol/L～2.0mol/L(例如可以是0.5mol/L、1mol/L、1.5mol/L、2mol/L等)的盐酸胍、30％～80％(例如可以是30％、40％、50％、55％、60％、70％、80％等)体积比的异丙醇或无水乙醇，优选为异丙醇。
[0013]进一步，在所述洗涤液中，柠檬酸钠的浓度优选为20mmol/L、40mmol/L、60mmol/L、80mmol/L中的一种；EDTA的浓度优选为5mmol/L、10mmol/L、15mmol/L、20mmol/L中的一种；NaCl的浓度优选为0.5mol/L、1.0mol/L、1.5mol/L、2.0mol/L中的一种；月桂醇聚氧乙烯醚的质量百分含量优选为0.1％、0.2％、0.25％、0.3％、0.5％中的一种；盐酸胍的浓度优选为0.5mol/L、1.0mol/L、1.5mol/L、2.0mol/L中的一种；异丙醇的体积比优选为40％、50％、60％、70％中的一种；无水乙醇的体积比优选为30％、40％、50％、90％中的一种。
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【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种兼容多种样本的快速核酸提取或纯化试剂盒，包括磁珠混合液、裂解液、洗涤液以及洗脱液，其特征在于，所述提取试剂盒中含有丝氨酸蛋白酶溶液，所述丝氨酸蛋白酶溶液的浓度为1mg/mL～10mg/mL。2.如权利要求1所述的兼容多种样本的快速核酸提取或纯化试剂盒，其特征在于，所述丝氨酸蛋白酶溶液来自从白色念珠菌分离出来的强力蛋白溶解酶。3.如权利要求1所述的兼容多种样本的快速核酸提取或纯化试剂盒，其特征在于，所述丝氨酸蛋白酶溶液的浓度为5mg/mL。4.如权利要求1所述的兼容多种样本的快速核酸提取或纯化试剂盒，其特征在于，所述磁珠混合液的官能团为氨基、羟基、羧基、硅羟基中的一种，磁珠混合液的浓度为10mg/mL～20mg/mL。5.如权利要求1所述的兼容多种样本的快速核酸提取或纯化试剂盒，其特征在于，所述裂解液包括1mmol/L～100mmol/L的柠檬酸钠、5mmol/L～50mmol/L的EDTA、0.5mol/L～2.5mol/L的NaCl、0.5mol/L～5.0mol/L的盐酸胍，质量百分含量为0.5％～5％的月桂醇聚氧乙烯醚、质量百分含量为1％～4％的Span
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80。6.如权利要求5所述的兼容多种样本的快速核酸提取或纯化试剂盒，其特征在于，在所述裂解液中，柠檬酸钠的浓度为20mmol/L、40mmol/L、60mmol/L、80mmol/L中的一种；EDTA的浓度为10mmol/L、15mmol/L、20mmol/L、25mmol/L中的一种；NaCl的浓度为0.6mol/L、1.3mol/L、1.9mol/L、2.0mol/L中的一种；盐酸胍的浓度为0.5mol/L、1.0mol/L、1.5mol/L、2.5mol/L、3.5mol/L、5.0mol/L中的一种；月...
【专利技术属性】
技术研发人员：郭军辉，卜振中，李红东，李明，梁佳明，
申请(专利权)人：苏州天隆生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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