一种昆虫样本除色剂以及一种昆虫RNA提取方法技术

本发明专利技术提供了一种昆虫样本除色剂以及一种昆虫RNA提取方法，属于昆虫样本处理技术领域。本发明专利技术意外发现苯酚、氯仿、异戊醇和聚乙烯吡咯烷酮以特定比例组成的除色剂对昆虫样本能够产生显著的除色效果，能够克服现有技术中昆虫样本除色效果差的问题，可以用于昆虫核酸提取。经实验验证本发明专利技术的除色剂不会影响后续实验，所得核酸样品质量较高。所得核酸样品质量较高。所得核酸样品质量较高。

【技术实现步骤摘要】
一种昆虫样本除色剂以及一种昆虫RNA提取方法


[0001]本专利技术涉及昆虫样本处理
，尤其涉及一种昆虫样本除色剂以及一种昆虫RNA提取方法。

技术介绍

[0002]核酸提取是分子生物学试验的基础，高质量的核酸是进行分子标记、基因克隆及基因表达研究等下游技术的必要前提。目前用于昆虫DNA提取的方法主要有SDS法、CTAB法等，用于昆虫RNA提取的方法主要有异硫氰酸胍法、TRIzol法等，这些方法使用过程中常存在干扰核酸完整性、纯度和浓度的酶和色素等物质，直接或间接地影响核酸的提取质量。
[0003]现有技术一般采用氯仿作为除色剂，通过增加氯仿抽提除色次数来提升脱色效果(参见董小林.昆虫总RNA提取及实时荧光定量PCR方法探讨[J].应用昆虫学报，2013，50(5):5.)，但是专利技术人在研究中发现，此方法对于色素含量较高、不易除去的昆虫种类来说并不可行，因此，现有技术中的昆虫样本除色剂除色效果仍需改进。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种昆虫样本除色剂以及一种昆虫RNA提取方法，以解决现有技本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种昆虫样本除色剂，其特征在于，包含如下重量份数的组分：苯酚75～150份、氯仿20～30份、异戊醇0.5～1.5份、聚乙烯吡咯烷酮0.2～2份。2.权利要求1所述的昆虫样本除色剂的制备方法，其特征在于，包含如下步骤：先将苯酚、氯仿和异戊醇混合，得到混合溶液；将聚乙烯吡咯烷酮溶于所述混合溶液，得到昆虫样本除色剂。3.权利要求1所述的昆虫样本除色剂在昆虫核酸提取过程中的应用。4.一种昆虫RNA提取方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：将昆虫样本与TRIzol提取液混合，静置后进行第一次离心，得到第一上清和第一沉淀；S2：将所述第一上清与权利要求1所述的昆虫样本除色剂混合，静置后进行第二次离心，得到第二上清和第一下层有机溶液；S3：将所述第二上清与权利要求1所述的昆虫样本除色剂混合，静置后进行第三次离心，得到第三上清和第二下层有机溶液；S4：将所述第三上清与氯仿混合，静置后进行第四次离心，得到第四上清和第三下层有机溶液；S5：将所述第四上清与异丙醇混合，静置后进行第五次离心，得到第五上清和第二沉淀；S6：采用乙醇水溶液将所述第二沉淀进行洗涤，然后进行第六次离心，得到第六上清和第三沉淀；所述第三沉淀即为昆虫RNA。5.根据权利要求4所述的昆虫RNA提取方法，其特征在于，所述昆虫样本与TRI...

【专利技术属性】
技术研发人员：李萌萌，朱芬，石志辉，万雨佳，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：