抗体的皮下吸收和生物利用度制造技术

本文提供了选择适于皮下给药的抗体的方法；改善抗体的皮下吸收和生物利用度的方法；和将抗体皮下施用于受试者的方法。和将抗体皮下施用于受试者的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗体的皮下吸收和生物利用度
专利

[0001]本公开涉及选择适于皮下施用的抗体的方法；用于改善抗体的皮下吸收和生物利用度的方法；以及将抗体皮下施用于受试者的方法。
[0002]背景
[0003]在过去几十年中，由于其靶结合特异性、二价相互作用特性、具有天然的效应子功能的潜能及其体外和体内生化稳定性，人或人源化单克隆抗体(mAb)药物已经成功用作多种人类疾病中的治疗方式(Kaplon H和Reichert JM.mAbs2018；10:183
‑
203；Kaplon等，mAbs.2020年1月
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12月；12(1)：1703531)。抗体工程化方法的进展，如实现理想药效学(PD)的人源化、效价和特异性优化，以及药物性能(如药代动力学(PK))的改善，对基于mAb的治疗的成功至关重要。
[0004]相对于静脉内(IV)途径，由于增加的患者便利性和依从性，对于临床环境中的治疗性抗体，SC给药通常是优选的(Matucci A等，Respir Res 2018；19:154；Viola M等，J Control Release 2018；286:301
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14)。经常，这一努力的障碍包括与减少全身暴露的SC注射相关的生物利用度限制。难以预测SC给药后单克隆抗体的生物利用度，其值可能是可变的和部分的，约为50至100％(Lobo ED等，J Pharm Sci 2004；93:2645
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68；Turner MR和Balu
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Iyer SV.J Pharm Sci 2018；107:1247
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60；Wang W等，Clin Pharmacol Ther 2008；84:548
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58)。目前，已上市mAb在人体中的平均SC生物利用度约为60
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80％(Viola M等，J Control Release 2018；286:301
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14；Turner MR和Balu Iyer SV.J Pharm Sci 2018；107:1247
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60；Richter WF和Jacobsen B.Drug metabolism and disposition:the biological fate of chemicals 2014；42:1881
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9)。虽然对一些mAb的不完全生物利用度的相关机制尚不清楚，但普遍认为SC给药后mAb的PK去向和吸收情况需要了解SC空间/解剖结构和组成。
[0005]已经大范围地综述了SC基质或皮下组织(Viola M等，J Control Release 2018；286：301
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14；Turner MR和Balu
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Iyer SV.J Pharm Sci 2018；107：1247
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60；Richter WF和Jacobsen B.Drug Metabolism and Disposition:The Biological Fate of Chemicals 2014；42：1881
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9)。SC给药后，mAb必须通过间质分流以到达这些毛细血管。考虑到细胞(脂肪细胞、巨噬细胞和成纤维细胞)和基质(脂肪、糖胺聚糖(GAG)、蛋白聚糖、弹性蛋白和胶原蛋白)的混合物，PK去向、吸收谱和用于改善mAb SC动力学的工程化策略可能需要了解分子的物理化学性质与SC空间和解剖结构的相互作用。
[0006]有趣的是，虽然基于mAb的生物疗法的数量已经增加，但是关于物理化学特征与其对mAb PK的影响之间的相对平衡仍然存在相当多的争论和信息的匮乏。这导致对这些参数如何影响施用于SC空间的mAb的吸收过程的理解不足。已经研究了一些有限的物理化学要素，如分子量和FcRn结合能力。此外，已经用具有混合发现的基于电荷的mAb变体进行了一些研究。在Khawli等的研究中，用IgGl电荷变体没有报道SC吸收的显著差异；然而，在该报告中，这些IgGl分子的pI变化轻微(在0.1pI单位内)，因此可能没有不同到足以影响SC吸收(Khawli LA等，mAbs 2010；2：613
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24)。相比之下，在另一篇报道中，pI具有更宽范围(1个单位差异)的mAb显示出与递增的mAb pI和递减的SC生物利用度相关的中等趋势(Zheng Y等，
mAbs 2012；4:24 3
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55)。与后来的发现一致，Mach及其合作者报道了带正电荷的mAb在体外与SC组织相互作用，可能是通过静电相互作用介导的(Mach H等，Ther Deliv 2011；2：727
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36)。总之，这些少数研究为内在mAb物理化学特征对SC吸收的速率和程度的作用奠定了一些基础。关于诸如SC注射后mAb的疏水性、热稳定性和聚集潜力等因素以及这些因素与电荷、等电点和FcRn结合作用的相互影响的数据缺乏。
[0007]需要选择适于皮下施用的mAb并改善mAb的皮下吸收和生物利用度。
[0008]专利技术详述
[0009]本文提供了选择适于皮下施用的抗体(例如mAb)的方法；用于改善抗体(例如mAb)的皮下吸收和生物利用度的方法；以及向受试者皮下施用抗体(例如mAb)的方法。
[0010]在一个方面中，本文提供了选择适于皮下施用的抗体(例如mAb)的方法，此类方法包括测量结合相同靶标的第一和第二抗体的T
agg
(聚集起始的温度)、测量第一和第二抗体的T
m起始
(解折叠起始的温度)，比较第一和第二抗体的T
agg
和/或T
m起始
；和选择具有更高T
agg
和/或T
m起始
的第一或第二抗体用于皮下施用。在一些实施方案中，此类方法进一步包括测量第一和第二抗体的HpnIP(heparin binding interaction potential，肝素结合相互作用势)和/或HIP(hydrophobic interaction potential，疏水相互作用势)。在一些实施方案中，此类方法进一步包括选择具有较低HpnIP和/或HIP的第一或第二抗体。在一些实施方案中，此类方法进一步包括测量第一和第二抗体的皮下吸收速率(ka)和/或皮下生物利用度(％F)。
[0011]在一些实施方案中，此类方法进一步包括测量第一和第二抗体的一个或多个PK参数，其中PK参数选自C
max
(maximal observed serum concentration，最大观察血清浓度)，T
max
(time of maximal observed serum concentration，最大观察血清浓度的时间)，AUC0‑
inf
(area under the serum concentra本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种选择适于皮下施用的抗体的方法，所述方法包括：测量结合相同靶标的第一和第二抗体的T
agg
(聚集起始的温度)，测量第一和第二抗体的T
m起始
(解折叠起始的温度)，比较第一和第二抗体的T
agg
和T
m起始
；以及选择具有更高T
agg
和/或T
m起始
的第一或第二抗体用于皮下施用。2.如权利要求1所述的方法，其中所述方法进一步包括测量第一和第二抗体的HpnIP(肝素结合相互作用势)和/或HIP(疏水相互作用势)。3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述方法进一步包括测量第一和第二抗体的皮下吸收速率(ka)和/或皮下生物利用度(％F)。4.如权利要求1
‑
3任一项所述的方法，其中所述方法进一步包括测量第一和第二抗体的一个或多个药代动力学(PK)参数，其中PK参数选自：C
max
(最大观察血清浓度)、T
max
(最大观察血清浓度的时间)、AUC0‑
inf
(从时间零外推至无限时间的血清浓度曲线下面积)、CL/F(SC施用后的清除率)和T
1/2
(消除半衰期)。5.如权利要求1
‑
4任一项所述的方法，其中所述方法进一步包括选择包含以下氨基酸残基的一个或多个的第一或第二抗体：LCDR1的24位的氨基酸残基是赖氨酸；LCDR2的54位的氨基酸残基是亮氨酸；LCDR2的55位的氨基酸残基是天冬氨酸或谷氨酸；LCDR2的56位的氨基酸残基是丝氨酸或苏氨酸；LCDR3的96位的氨基酸残基是苯丙氨酸；或HCDR2的61位的氨基酸残基是谷氨酸；其中所有位置根据Kabat编号进行编号，并且CDR由Kabat和Chothia的混合方式定义。6.如权利要求1
‑
5任一项所述的方法，其中所述方法进一步包括选择包含以下氨基酸残基的一个或多个的第一或第二抗体：LCDR1的25位的氨基酸残基是丙氨酸或丝氨酸；LCDR1的26位的氨基酸残基是丝氨酸；LCDR2的52位的氨基酸残基是丝氨酸或苏氨酸；LCDR3的89位的氨基酸残基是谷氨酰胺或缬氨酸；LCDR3的90位的氨基酸残基是谷氨酰胺；LCDR3的95位的氨基酸残基是脯氨酸；LCDR3的97位的氨基酸残基是苏氨酸；HCDR1的26位的氨基酸残基是甘氨酸；HCDR1的27位的氨基酸残基是酪氨酸；HCDR1的29位的氨基酸残基是苯丙氨酸；HCDR1的30位的氨基酸残基是苏氨酸；HCDR2的62位的氨基酸残基是赖氨酸；或HCDR2的65位的氨基酸残基是甘氨酸；其中所有位置根据Kabat编号进行编号，并且CDR由Kabat和Chothia的混合方式定义。7.一种通过权利要求1
‑
6任一项的方法选择的用于皮下施用的抗体。
8.一种产生与亲本抗体相比具有改善的皮下吸收和生物利用度的变体抗体的方法，所述方法包括：生成亲本抗体的变体抗体，其中变体抗体具有高于亲本抗体的T
agg
和/或T
m起始
。9.如权利要求8所述的方法，其中变体抗体具有低于亲本抗体的HpnIP和/或HIP。10.如权利要求8或9所述的方法，其中所述方法还包括生成包含以下氨基酸残基的一个或多个的变体抗体：LCDR1的24位的氨基酸残基是赖氨酸；LCDR2的54位的氨基酸残基是亮氨酸；LCDR2的55位的氨基酸残基是天冬氨酸或谷氨酸；LCDR2的56位的氨基酸残基是丝氨酸或苏氨酸；LCDR3的96位的氨基酸残基是苯丙氨酸；或HCDR2的61位的氨基酸残基是谷氨酸；其中所有位置根据Kabat编号进行编号，并且CDR由Kabat和Chothia的混合方式定义。11.如权利要求8或9所述的方法，其中所述方法还包括：用赖氨酸替换亲本抗体的LCDR1的24位的氨基酸残基；用亮氨酸替换亲本抗体的LCDR2的54位的氨基酸残基；用天冬氨酸或谷氨酸替换亲本抗体的LCDR2的55位的氨基酸残基；用丝氨酸或苏氨酸替换亲本抗体的LCDR2的56位的氨基酸残基；用苯丙氨酸替换亲本抗体的LCDR3的96位的氨基酸残基；或用谷氨酸替换亲本抗体的HCDR2的61位的氨基酸残基；其中所有位置根据Kabat编号进行编号，并且CDR由Kabat和Chothia的混合方式定义。12.如权利要求8
‑
11任一项所述的方法，其中所述方法还包括生成包含以下氨基酸残基的一个或多个的变体抗体：LCDR1的25位的氨基酸残基是丙氨酸或丝氨酸；LCDR1的26位的氨基酸残基是丝氨酸；LCDR2的52位的氨基酸残基是丝氨酸或苏氨酸；LCDR3的89位的氨基酸残基是谷氨酰胺或缬氨酸；LCDR3的90位的氨基酸残基是谷氨酰胺；LCDR3的95位的氨基酸残基是脯氨酸；LCDR3的97位的氨基酸残基是苏氨酸；HCDR1的26位的氨基酸残基是甘氨酸；HCDR1的27位的氨基酸残基是酪氨酸；HCDR1的29位的氨基酸残基是苯丙氨酸；HCDR1的30位的氨基酸残基是苏氨酸；HCDR2的62位的氨基酸残基是赖氨酸；或HCDR2的65位的氨基酸残基是甘氨酸；其中所有位置根据Kabat编号进行编号，并且CDR由Kabat和Chothia的...

【专利技术属性】
技术研发人员：A，
申请(专利权)人：伊莱利利公司，
类型：发明
国别省市：